赖氨酸和其他必需氨基酸对1～18日龄中速型黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标、器官指数和肠道组织形态的影响

施寿荣 刘勇强 张 珊 朱沛霁

(1.中国农业科学院家禽研究所，扬州 225125；2.江苏立华牧业股份有限公司，常州 213100)

赖氨酸是家禽饲粮中的第二限制性氨基酸，被称为“生长型氨基酸”，具有参与能量代谢、蛋白质合成及增强机体免疫等功能[1-3]。赖氨酸添加量对确定其他必需氨基酸的添加量极为重要，保持一定的必需氨基酸比例对家禽生长具有重要意义。国内外学者提出了理想氨基酸平衡模式[4]，赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸是家禽玉米-豆粕型饲粮的限制性氨基酸[5-7]，已有学者针对氨基酸比例进行研究。席鹏彬等[8]研究表明，饲粮赖氨酸∶蛋氨酸∶色氨酸为100∶40∶17时，快长型岭南黄鸡能获得最佳生长性能。林厦菁等[9]综合生长性能、血浆生化指标等认为适合快大型黄羽肉鸡的饲粮赖氨酸∶蛋氨酸∶苏氨酸∶色氨酸∶异亮氨酸为100∶(44～55)∶72∶23∶(54～72)。然而，关于黄羽肉鸡营养需要量的研究不尽相同，加之我国黄羽肉鸡品种繁多，市场覆盖范围逐步增大，完善我国黄羽肉鸡饲养标准的营养需要量至关重要。因此，本试验旨在研究赖氨酸和其他必需氨基酸对1～18日龄黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标、器官指数和肠道组织形态的影响，为黄羽肉鸡的营养需要量以及实际生产提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与设计

选择遗传背景相同、同批次、同性别(雄性)、发育正常的1日龄健康中速型“优麻”黄羽肉鸡(江苏立华牧业股份有限公司)810羽，随机分为9组，每组6个重复，每个重复15羽。试验采用双因素试验设计，以我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)中黄羽肉鸡仔鸡营养需要中的氨基酸添加推荐量为基础，结合江苏立华牧业股份有限公司中速鸡的前期研究，确定了本试验的中氨基酸水平，即赖氨酸水平为1.05%、蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%；以中氨基酸水平为基础，梯度设置依次为85%基础、100%基础、115%基础，即设3个赖氨酸水平(0.89%、1.05%、1.20%)和3个其他必需氨基酸(蛋氨酸+苏氨酸+色氨酸)水平(低水平：0.66%蛋氨酸+0.58%苏氨酸+0.16%色氨酸；中水平：0.78%蛋氨酸+0.68%苏氨酸+0.19%色氨酸；高水平：0.90%蛋氨酸+0.78%苏氨酸+0.22%色氨酸)，试验设计见表1。

表1 试验设计

1.2 试验饲粮

试验饲粮参考我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)配制，选用玉米、豆粕、玉米蛋白粉等配制而成，其组成及营养水平见表2。各组饲粮能量、钙、磷等营养水平相同，通过添加氨基酸调整各组氨基酸水平。

表2 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)

1.3 饲养管理

动物养殖试验在中国农业科学院家禽研究所仪征试验基地开展。试验期18 d(即1～18日龄，为江苏立华牧业股份有限公司确定的中速型黄羽肉鸡的第1生长阶段)。试验采用网面平养，人工持续光照，育雏温度前3 d为32～35 ℃，之后每天降低0.5～1.0 ℃，直至常温。试验期间试验鸡自由采食和饮水。按试验基地的常规程序进行免疫和饲养管理。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 生长性能

在动物试验期间观察试验肉鸡的生长和健康状况，并记录死淘情况，在试验开始时以重复为单位进行称重并记录，试验结束前1天晚上进行断料，第2天06：00以重复为单位称重，记录饲养期间耗料量和死淘状况，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清生化指标

试验结束后于每个重复随机选取2只鸡进行采血，翅静脉采血并置于促凝管中，静置离心制备血清，于-20 ℃保存。用全自动生化分析仪(UniCel DxC 800 Synchron，Beckman Coulter，美国)测定血清总蛋白(TP)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)含量，试剂盒购于中山标佳生物科技有限公司。

1.4.3 器官指数

在试验结束后每个重复随机选取2只鸡，称重后屠宰，分离单侧胸腺、肝脏、脾脏和法氏囊，并称重，计算相关的器官指数：

胸腺指数(g/kg)=单侧胸腺重量(g)×2/活体重(kg)；肝脏指数(g/kg)=肝脏重量(g)/活体重(kg)；脾脏指数(g/kg)=脾脏重量(g)/活体重(kg)；法氏囊指数(g/kg)=法氏囊重量(g)/活体重(kg)。

1.4.4 肠道组织形态

在试验结束后每个重复随机选取2只鸡，屠宰后迅速剪取空肠前端1 cm左右，置于10%甲醛溶液中浸泡保存，固定24 h以上，留作肠道切片。然后进行洗涤、脱水、浸蜡、包埋、切片，并用苏木精-伊红染色，用荧光显微镜(DM4000B，Leica Microsystems，Wetzlar，德国)测量绒毛高度和隐窝深度，计算绒毛高度/隐窝深度(villous height/crypt depth，V/C)。

1.5 数据处理与统计分析

试验数据采用SPSS 19.0软件的一般线性模型(GLM)的单变量进行分析，若组间差异显著，则采用Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著。试验结果用平均值和均值标准误(SEM)表示。

2 结 果

2.1 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能的影响

赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能的影响见表3。赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05)。赖氨酸显著影响黄羽肉鸡的ADG和F/G(P<0.05)，表现为1.05%、1.20%赖氨酸水平组ADG显著高于0.89%赖氨酸水平组(P<0.05)，1.05%赖氨酸水平组F/G显著低于0.89%、1.20%赖氨酸水平组(P<0.05)。其他必需氨基酸对黄羽肉鸡ADG、ADFI和F/G均无显著影响(P>0.05)。

表3 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能的影响

2.2 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡血清生化指标的影响见表4。赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡血清TP含量有显著影响(P<0.05)，对其他血清指标无显著影响(P>0.05)。同时，赖氨酸对黄羽肉鸡的血清TP和UA含量有显著影响(P<0.05)，表现为1.05%赖氨酸水平组的血清TP和UA含量显著低于0.89%、1.20%赖氨酸水平组(P<0.05)；赖氨酸对黄羽肉鸡的血清CHO、TG和HDL含量无显著影响(P>0.05)。其他必需氨基酸对黄羽肉鸡的血清CHO、TG和HDL含量有显著影响(P<0.05)，表现为低、中其他必需氨基酸水平组的血清CHO和HDL含量显著高于高其他必需氨基酸水平组(P<0.05)，低、中其他必需氨基酸水平组的血清TG含量显著低于高其他必需氨基酸水平组(P<0.05)。

表4 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

2.3 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡器官指数的影响

赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡器官指数的影响见表5。赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡的法氏囊指数有显著影响(P<0.05)，表现为Ⅷ组的法氏囊指数显著高于其他各组(P<0.05)；对胸腺指数、肝脏指数、脾脏指数无显著影响(P>0.05)。赖氨酸对黄羽肉鸡的胸腺指数、肝脏指数、脾脏指数和法氏囊指数均无显著影响(P>0.05)。其他必需氨基酸对黄羽肉鸡的胸腺指数有显著影响(P<0.05)，表现为中其他必需氨基酸水平组的胸腺指数显著高于低、高其他必需氨基酸水平组(P<0.05)。

表5 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡器官指数的影响

2.4 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡空肠组织形态的影响

赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡空肠组织形态的影响见表6。赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡空肠隐窝深度有显著影响(P<0.05)，对空肠绒毛高度和V/C无显著影响(P>0.05)。赖氨酸对黄羽肉鸡空肠绒毛高度有显著影响(P<0.05)，表现为0.89%赖氨酸水平组的空肠绒毛高度显著高于1.05%赖氨酸水平组(P<0.05)，与1.20%赖氨酸水平组差异不显著(P>0.05)。其他必需氨基酸对黄羽肉鸡的空肠隐窝深度和V/C有显著影响(P<0.05)，表现为低其他必需氨基酸水平组的空肠隐窝深度显著低于中、高其他必需氨基酸水平组(P<0.05)，而V/C显著高于中、高其他必需氨基酸水平组(P<0.05)。

表6 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡空肠组织形态的影响

3 讨 论

3.1 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能的影响

赖氨酸是家禽体内用于正常生长和发育不可或缺的营养元素，不但参与机体内蛋白质的合成，而且对机体的能量代谢也有着重要的影响，在实际生产中适宜的赖氨酸添加量对提高肉鸡生长速度及饲料转化率等有重要意义[10-11]。赖氨酸添加量对确定其他必需氨基酸的添加量极为重要，当饲粮中的赖氨酸水平降低时，其他氨基酸的吸收利用也会受到很大的影响。蛋氨酸作为家禽玉米-豆粕型饲粮的第一限制性氨基酸，在饲粮中的添加量是影响动物体增重、F/G、屠宰性能的主要因素[12-15]。苏氨酸亦是肉鸡的必需氨基酸之一，对肉鸡的生长性能、饲料转化率等具有重要影响[16]。国内外亦有研究表明饲粮中色氨酸缺乏会抑制肉鸡的体增重和采食量，同时会显著降低饲料转化率，通过补充合成色氨酸可显著改善肉鸡的生长性能[17-18]。本研究结果表明，赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡生长性能无显著影响，但赖氨酸显著影响黄羽肉鸡的ADG和F/G，当赖氨酸水平为1.05%时，黄羽肉鸡获得最大ADG和最低F/G，在本试验条件下其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能影响不大，可能是因为试验鸡品种及营养需求特征不同，加之当地饲养环境也存在差异。

Knowles等[19]研究4～15日龄的肉仔鸡获得最大体增重、ADFI以及最佳饲料转化率的赖氨酸需要量分别为1.01%、0.91%和1.07%，这与本研究得到的赖氨酸需要量接近。Bernal等[20]研究10～21日龄的肉仔鸡获得最大体增重的赖氨酸需要量为1.22%，高于本试验研究所得到的结果，这可能是因为不同品种鸡的生理特点以及营养需要特点不同。国内关于不同种类黄羽肉鸡赖氨酸营养需要量的试验研究比较缺少，陈继兰等[21]研究1～3周龄石岐黄肉鸡获得最大生长性能的赖氨酸需要量为1.03%，与本试验的赖氨酸需要量接近。陈盼盼等[22]研究表明，饲粮中赖氨酸水平从0.60%升至1.40%时，1～21日龄肉鸡ADG与ADFI呈先增加后降低的趋势，F/G呈先降低后增加的趋势；而当饲粮赖氨酸水平为1.00%时，F/G显著低于其他各组。本试验研究与陈盼盼等[22]的研究结果相似，随着饲粮中的赖氨酸水平的提高，黄羽肉鸡ADG升高，但1.05%和1.20%赖氨酸水平组的ADG无显著差异，F/G则先降低后升高，表明肉鸡的生长性能并没有总随着赖氨酸水平的升高而升高。当饲粮中赖氨酸水平过量时可能会与其他种类的氨基酸发生拮抗作用，从而抑制肉鸡蛋白质的合成，阻碍生长。

3.2 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

血清TP含量可以反映出机体的营养以及代谢状况，当机体营养欠缺时，或者血液中的水分增多等都能够引起TP含量降低，机体营养不良也可以造成血清TP含量下降[23]。Grisoni等[24]研究表明，血清TP含量是能够有效反映家禽体内蛋白质代谢状况的指标，血清TP含量越高，表明家禽体内的蛋白质代谢越旺盛，营养状况表现良好。孙丰[25]研究报道，饲粮中添加高精氨酸和高赖氨酸的1～21日龄和22～42日龄2个阶段肉鸡血清TP含量均显著高于基础饲粮组。Debnath等[26]研究发现，饲粮中添加苏氨酸可使血清TP含量增加。本试验结果表明，赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对血清TP含量影响显著，适宜的饲粮氨基酸水平能够提高血清TP的含量，从而加强了肉鸡合成蛋白质的能力，与前人报道研究一致。

UA是核酸中嘌呤代谢的终极产物，它是用来衡量机体内蛋白质营养状况和分解代谢水平的一个非常重要的指标，当蛋白质合成增加时，血清UA含量将降低。王纪亭等[27]研究表明，适宜的饲粮氨基酸比例可以显著降低血清UA含量。本试验结果表明，不同的赖氨酸水平组的血清UA含量差异显著，但其他必需氨基酸以及赖氨酸和其他必需氨基酸的交互作用对血清UA含量无显著影响，从结果看以饲粮中赖氨酸水平为1.05%、蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%时，1～18日龄中速型黄羽肉鸡血清UA含量最低，且增加了血清TP含量，从而加强了肉鸡合成蛋白质的能力。

CHO不但是构成动物机体的重要组织成分，而且也是血液中的脂类转移系统的必需因子。动物血清中CHO含量的高低能够体现出动物机体内脂肪的沉积状况。血清TG含量在一定意义上能够表明肉仔鸡脂肪合成的强度，当机体某种氨基酸过量或者少量时，其他氨基酸的吸收利用将会受到影响，不能用于合成蛋白质的氨基酸可能用于合成TG[28]。当机体脂肪沉积增加时，血清CHO和TG含量降低。田大龙等[29]研究表明，饲粮赖氨酸水平对22～42日龄爱拔益加肉鸡的血清CHO、TG含量等指标无显著影响。本试验结果与其类似，赖氨酸对黄羽肉鸡血清CHO、TG含量无显著影响，这可能是由于本试验设计的赖氨酸水平不足以对肉鸡体内的脂类代谢产生影响。而其他必需氨基酸对黄羽肉鸡的血清CHO、TG含量有显著影响，且血清CHO和HDL含量随着其他必需氨基酸水平的提高呈现降低趋势。根据血清生化指标确定1～18日龄中速型黄羽肉鸡饲粮适宜氨基酸组和为：赖氨酸水平1.05%、蛋氨酸水平0.78%、苏氨酸水平0.68%、色氨酸水平0.19%。

3.3 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡器官指数的影响

动物机体的免疫状况能够通过对其主要的免疫器官重量以及免疫器官指数来评价，比如胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数等可以在一定程度上反映动物机体的免疫功能[30]，免疫器官的生长和发育对机体的免疫力强度有着直接的影响作用，免疫器官指数的提高则代表机体免疫系统发育的速度较快，表明机体的免疫力比较强。陈盼盼等[22]研究发现，饲粮赖氨酸水平为1.00%时，肉鸡胸腺、肝脏等器官重量最大。田大龙等[29]研究表明，饲粮赖氨酸水平对22～42日龄爱拔益加肉鸡的胸腺指数、肝脏指数和脾脏指数有显著影响。而李燕蒙等[31]研究表明，饲粮赖氨酸缺乏会显著抑制胸腺的发育，而对脾脏和法氏囊指数没有显著影响。本试验结果表明，赖氨酸对黄羽肉鸡的胸腺指数、肝脏指数、脾脏指数以及法氏囊指数无显著影响。而赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡法氏囊指数具有显著影响，饲粮中赖氨酸水平为1.20%、蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%时，肉鸡的法氏囊指数最高，说明合理的氨基酸配比在一定程度上可以促进黄羽肉鸡的免疫器官发育，从而增强机体免疫力。

郑辉等[32]研究表明，饲粮中不同的蛋氨酸水平对肉鸡的胸腺指数有显著影响。Azzam等[33]研究表明，饲粮中苏氨酸水平的提高对肉鸡的胸腺指数、法氏囊指数没有显著影响。Taghinejad-Roudbaneh等[16]研究8种不同水平的苏氨酸饲粮对21～42日龄肉鸡免疫器官指数的影响，发现苏氨酸对肉鸡脾脏指数没有显著影响。王红梅等[34]研究发现，饲粮苏氨酸水平对肉鸡法氏囊指数没有显著影响，但对脾脏指数有显著影响，且苏氨酸水平为0.67%时肉鸡脾脏指数最高。本试验研究结果与之接近，本试验结果表明，随着氨基酸水平的提高，肉鸡胸腺指数有先增高后降低的趋势，饲粮中蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%时，肉鸡胸腺指数最高，表明试验肉鸡的免疫器官指数并没有总随着氨基酸水平的升高而升高，饲粮氨基酸水平过低或过高均会影响机体免疫系统的发育及功能的发挥。

3.4 赖氨酸和其他必需氨基酸对黄羽肉鸡空肠组织形态的影响

良好的小肠结构和小肠功能是动物体消化并吸收营养物质和健康生长的生理学基础[35]。消化系统的消化吸收强度会随着肠绒毛高度的增加而增强，从而促进动物的生长发育[36]。蒋桂韬等[37]研究发现，饲粮赖氨酸水平为0.75%时，临武鸭的肠绒毛高度显著增加，表明适宜的赖氨酸水平可以提高肠道绒毛高度。而杨麒[38]研究表明，提高饲粮中赖氨酸水平能够显著降低肉鸡肠道绒毛高度，赖氨酸水平为1.15%时，各个肠段的隐窝深度最浅。本研究结果表明，随着饲粮赖氨酸水平增加，空肠绒毛高度呈先降低而后升高的趋势，饲粮赖氨酸水平为0.89%时，空肠绒毛高度最大，而各组的空肠隐窝深度无显著差异。这可能是高水平的赖氨酸会增加空肠的消化吸收负担，从而引起空肠绒毛的发育速度降低。

陈娜娜等[39]研究表明，蛋氨酸锌可以显著降低空肠黏膜的隐窝深度。对于蛋氨酸、苏氨酸以及色氨酸对肠道黏膜影响的研究鲜见。本研究结果表明，赖氨酸和其他必需氨基酸交互作用对黄羽肉鸡空肠隐窝深度有显著影响，当赖氨酸水平为1.05%时，低、高其他必需氨基酸水平组空肠黏膜隐窝深度相对较低。V/C能够综合反映小肠的功能状态，若V/C降低，则代表黏膜不完整，机体消化吸收功能会降低，常易发生腹泻，从而阻碍动物生长；若V/C升高，表明肠内膜面积比较大，肠黏膜的结构得到益化，单位面积内的肠绒毛细胞数量提高，消化吸收功能得增强，腹泻率降低[40-41]。Selle等[42]研究报道，饲粮赖氨酸水平为1.15%时，肉鸡的回肠消化率得到显著改善。本试验结果表明，赖氨酸对肉鸡空肠黏膜V/C没有显著影响，而其他必需氨基酸对空肠黏膜V/C有显著影响，低其他必需氨基酸水平即蛋氨酸水平为0.66%、苏氨酸水平为0.58%、色氨酸水平为0.16%时，回肠黏膜V/C最高，从而增加空肠肠段的消化率。

4 结 论

① 饲粮赖氨酸水平为1.05%时，1～18日龄中速型黄羽肉鸡获得最大ADG和最低F/G，而其他必需氨基酸对黄羽肉鸡生长性能影响不大。

② 饲粮赖氨酸水平为1.05%、蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%时，1～18日龄中速型黄羽肉鸡血清UA含量最低，且血清TP含量较高。

③ 饲粮赖氨酸水平为1.20%、蛋氨酸水平为0.78%、苏氨酸水平为0.68%、色氨酸水平为0.19%时，1～18日龄中速型黄羽肉鸡的法氏囊指数最高。