血必净注射液辅助治疗对脓毒症患者病情及微小高迁移率族蛋白B1、微小RNA-223表达的影响

刘红新，孟 舰，武小娟，魏会会，刘 娜，刘 艳

脓毒症是一种因感染导致全身炎症反应综合征的常见危急重症，多由严重烧伤、休克、感染、外科手术等引起，具有病情变化快、预后差等特点[1]。脓毒症机制复杂，重症者可致凝血功能障碍、多器官功能障碍、循环障碍等，若未及时治疗可造成患者死亡，调查显示脓毒症发病率逐年上升，病死率为30%～50%[2]。临床治疗脓毒症多以“病因治疗”为原则，控制炎症反应、保护器官功能是救治关键，但有研究显示，仅给予上述对症支持、抗感染治疗较难获得理想效果[3]。病理状态下细菌易位进入血液大量繁殖是脓毒症发生发展的病理基础，后可进一步激活全身炎症反应[4]。微小RNA-223(miR-223)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是体内调控炎症反应激活的重要途径，miR-223能靶向抑制核因子κB抑制因子(IκB)并削弱其对核因子κB(NF-κB)的抑制作用，进而活化NF-κB、启动HMGB1表达并介导全身炎症反应[5]。血必净注射液是近年研制成功的具有抗菌、抗毒素、调节免疫反应、保护内皮细胞作用的中药注射液，有利于脓毒症的病情控制[6]。本研究旨在分析血必净注射液辅助治疗对脓毒症患者病情转归及外周血HMGB1、miR-223表达的影响，旨在明确其具体作用机制，为临床治疗提供有力依据。

1 资料与方法

1.1纳入及排除标准 ①纳入标准：符合脓毒症诊断标准[7]；预计生存期>7 d；急性生理学和慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health condition score system Ⅱ score, APACHEⅡ)评分>12分；年龄30～70岁，性别不限；无药物过敏史；临床资料完整者。②排除标准：合并恶性肿瘤、急性脑卒中、自身免疫性疾病及严重躯体疾病者；妊娠及哺乳期妇女；有抗感染治疗史者；有精神病史者；临床资料欠缺者。

1.2临床资料 选取我院2019年1—10月收治的符合上述纳入及排除标准的脓毒症68例。男39例，女29例；年龄32～64(44.23±6.05)岁；基础疾病：糖尿病17例，高血压病32例；病程12～48(30.4±5.2)h；病因：肺部感染43例，腹腔感染12例，烧伤13例。按照治疗方法不同分为观察组和对照组，每组34例。2组性别、年龄、基础疾病等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。本研究经医院伦理委员会批准。

表1 2组脓毒症患者一般资料比较

1.3治疗方法 对照组给予常规治疗：积极控制原发病、抗感染、维持水电解质平衡、营养支持，并根据病情给予护肝、营养心肌等[7]。观察组在对照组基础上联合血必净注射液(天津红日药业股份有限公司生产，国药准字：Z20040033)100 ml加入0.9%氯化钠注射液100 ml静脉滴注，2/d。2组均治疗5 d。

1.4观察指标及方法

1.4.1病情指标检测：分别于治疗前及治疗后1 d 比较2组APACHEⅡ评分、全身感染相关器官功能衰竭评分(sepsis-related organ fai lureassessment，SOFA)。APACHEⅡ评分包括急性生理学评分、年龄评分、慢性健康状况3个维度，满分71分，得分越高表示病情越重[8]。SOFA评分包括呼吸、凝血、肝脏、循环、神经、肾脏6个维度，满分24分，得分越高表示病情越重[9]。

1.4.2炎性因子、HMGB1和miR-223检测：分别于治疗前及治疗后1 d采集2组空腹静脉血20 ml，2000 r/min、离心5 min取血清待测。采用酶联免疫吸附法测定C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、内毒素含量及HMGB1水平。采用mirVanamiRNA试剂盒提取血细胞RNA并纯化，使用PrimeScript RT reagent Kit行逆转录并测定miR-223表达水平。上述试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，严格按照说明书进行操作。

1.4.3不良反应：观察并记录2组治疗期间不良反应发生情况。

2 结果

2.1病情指标比较 2组治疗前APACHEⅡ、SOFA评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较，2组治疗后APACHEⅡ、SOFA评分均降低，且观察组低于对照组(P<0.01)。见表2。

表2 2组脓毒症患者治疗前后APACHEⅡ和SOFA评分比较分)

2.2血清炎性因子比较 2组治疗前CRP、PCT、内毒素水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较，2组治疗后CRP、PCT、内毒素水平均降低，且观察组低于对照组(P<0.01)。见表3。

表3 2组脓毒症患者治疗前后血清炎性因子水平比较

2.3血清HMGB1及miR-223表达比较 2组治疗前血清HMGB1及miR-223表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较，2组治疗后血清HMGB1及miR-223表达均降低，且观察组低于对照组(P<0.01)。见表4。

表4 2组脓毒症患者治疗前后血清HMGB1及miR-223表达比较

2.4不良反应比较 2组治疗过程中均未发生明显不良反应。

3 讨论

脓毒症是由感染所引起的全身炎症反应综合征，重症感染、大面积烧伤、重大外科术后菌群移位发生菌血症是其发生的基础[10-12]；多伴有水电解质紊乱、弥散性血管内凝血等症状，随着病情发展可危及患者生命健康。血必净注射液是近年被用于脓毒症治疗的中药注射液，具有抗菌、抗毒素、调节免疫反应、保护内皮细胞作用，有利于控制脓毒症病情，辅助应用价值高[13]。血必净注射液以血府逐瘀汤为基础，主要成分包括赤芍、丹参、红花、当归、川芎，可起到清热解毒、扶正固本、活血化瘀的作用[14]。现代药理研究显示，血必净注射液不仅能抑制内源性炎性因子分泌、减轻机体炎症反应，还能改善机体内微循环、保护血管内皮细胞、调节机体免疫功能，有利于保护和修复机体损伤的器官[15]。黄彩英等[16]报道，血必静注射液辅助治疗脓毒症效果显著。本研究结果显示，2组治疗后APACHEⅡ、SOFA评分均降低，且观察组低于对照组。提示血必净注射液辅助治疗能显著改善脓毒症病情及预后，与上述文献报道结果相符[15-16]。

全身炎症反应的放大激活是脓毒症病情变化的核心环节。CRP是肝细胞在促炎因子刺激下合成和分泌的急性时相蛋白，能反映机体炎症反应程度[17]；PCT是无活性的降钙素前体，正常情况下极少释放入血，细菌感染后能刺激全身多个实质脏器细胞分泌PCT[18]；内毒素可在细菌裂解过程中大量释放，具有极强的促炎活性[19]。本研究结果显示，2组治疗后CRP、PCT、内毒素均降低，且观察组低于对照组。提示血必净注射液辅治能显著抑制脓毒症患者炎性因子释放、有利于减轻机体炎症反应程度。

HMGB1具有促炎活性，能激活多种炎性细胞及促进炎性因子释放[20]。Alpkvist等[21]指出，脓毒症大鼠miR-223高表达且能增强NF-κB活性，进而激活体内炎症反应。马斌等[22]研究发现，HMGB1作为炎症介质与脓毒症密切相关，能促进炎性细胞活化，刺激中性粒细胞、巨噬细胞等分泌多种炎性因子，加速炎症反应进程，参与机体氧化应激反应。还有研究发现，miR-223/HMGB1在炎症反应激活过程中发挥重要作用，脓毒症大鼠miR-223高表达所致HMGB1表达增强介导了大鼠体内炎性因子的级联释放[23]。miR-223能靶向抑制IκB并削弱IκB对NF-κB的抑制作用，进而活化NF-κB、启动HMGB1表达并介导炎症反应[24]。本研究结果显示，2组治疗后血清HMGB1及miR-223表达均降低，且观察组低于对照组。提示血必净注射液辅助治疗能够增强脓毒症患者体内miR-223/HMGB1途径抑制的程度，可能是通过抑制miR-223/HMGB1途径，减少机体炎性因子分泌，减轻机体炎症反应程度来发挥治疗作用的。本研究结果显示2组治疗期间并未产生明显不良反应，提示血必净注射液治疗脓毒症安全性好。

综上所述，血必净注射液辅治可以有效改善脓毒症病情、减少机体炎性因子及炎症反应程度，抑制miR-223/HMGB1途径可能是其作用机制。