康晨 张希 黄利美 杨颖
1 天津市黄河医院检验科 (天津 300110)
2 天津市河东区疾病预防控制中心检验科 (天津 300151)
内容提要: 血液分析仪作为目前临床血液学广泛应用的一种检验方法,在很大程度上促进了临床血液检验发展的新方向,使其更加规范化与自动化,但由于检测技术并非参考方法,因此做好质量方面的控制具有重要意义。由于血液分析仪在血液检验过程中仍然存在部分问题,导致检验结果受到影响,因此需总结相应问题,并提出相应解决办法。
近些年来,随着科学技术的全面发展,血液分析仪逐渐由三分类法过渡至五分类法,分析原理也逐渐由电阻抗原理过渡至VCS技术、细胞染色技术、光散射技术、流式细胞分析技术等,但上述各项技术均为仪器分析,无法有效替代显微镜分析与形态识别方法,因此国际上在白细胞分类计数时仍然以血涂片人工显微镜作为主要参考方法[1,2]。实际操作过程中往往会出现各种问题(试剂质量与仪器故障),导致最终分析结果的精密度与准确性受到影响[3]。在实际分析过程中,如患者血液成分出现异常变化也可影响最终结果,导致血细胞直方图异常或者细胞计数假性变化。为确保分析结果的准确性,许多仪器存在相应的警示符号,当发现分析问题时自动发出警告,使操作者能够做好血涂片显微镜与人工计数检查。
目前我国许多大型医院检验科存在不同型号的血液分析仪,在复查时通常更换仪器进行检测。根据相关规定,如血液分析仪出现以下情况时,需进行血涂片与人工计数检查。情况主要包括:①血细胞技术异常变化;②血细胞直方图形态异常;③出现细胞形态的警示符号。但在实际操作过程中,部分操作者会出现错误理解的情况,使人工复查转变为仪器复查。由于血液分析仪重复性较好,在复查时即便更换不同型号的仪器复查,最终结果也十分接近,因此当出现错误分析情况时,无法通过仪器复查的方式达到复查目的。
在血液分析仪中均设有细胞形态相关的警示功能,主要在于提示操作者分析结果存在误差,需重新检查。而不同型号仪器警示符号均存在一定差异性,因此在实际操作前要求操作者熟悉仪器相关说明书,对各项内容进行充分了解。以常用的三分类血液分析仪为例,在进行数据测量时,其左侧各种符号含义如下:①!:说明数据属于线性保证范围外;②*:说明粒度分布异常情况时,数据存在较低可靠性;③+:说明数据高于异常判定界限值上限;④-:说明数据低于异常判定界限值上限[4]。
当出现测量数据异常情况时,可通过以下方法进行表示:①[+++.+]可用于表示超过范围;②[***.*]可用于表示仪器异常且无法计算出数据情况;③[---.-]可用于表示数据异常且无法计算出数据情况[5]。其余警示符号见表1。
表1. 各种警示符号直方图与实际意义具体情况
在血液分析仪实际使用过程中,对细胞数量进行计数时需提供相应的细胞体积分布图,以飞升( fl)为单位,以细胞体积大小为横坐标,以不同体积细胞出现频率为纵坐标,以%进行表示[6]。直方图作为一种常用的表现方式,主要以曲线形式进行表达,能够准确反映细胞群体情况,其中红细胞直方图与正弦曲线较为相似,曲线峰与平均红细胞体积相对应,曲线底部宽度与红细胞分布宽度相等[7]。而白细胞直方图通常呈三峰型典型曲线图,正常情况下可表示为“两个大高峰与一个小高峰”或者“两个高峰与一个谷”,其中第一个大高峰为淋巴细胞,第二个大高峰为中性粒细胞,第三个谷或者小高峰为中间细胞(嗜酸性、单核细胞、嗜碱性粒细胞)。相较于红细胞直方图而言,血小板直方图具有较高相似性,其体积范围处于2~20 fl的范围内,大部分血小板体积处于3~7 fl的范围内,如图形曲线出现变化或者受到各种因素干扰后,操作者需做好血涂片核查。可通过直方图直接判断各种类型的血小板病变、贫血、白血病等,但在实际检查过程中仍然存在不够重视的情况,导致误诊或者漏诊情况发生。
不同型号的血液分析仪均存在相应的配套试剂,如互换试剂进行检查,使红细胞、白细胞与三个细胞直方图出现改变,导致最终结果出现明显差异,因此在实际操作中需确保配套试剂最终检测结果完全相同方可更换使用。
通常情况下血液分析仪校正品无白细胞分类的矫正,因此五分类校正只能依靠操作者镜检五分类结果进行白细胞分类校正,在实际操作中存在部分仪器单核偏高情况。
需做好每日室内质控,确保患者标本与质控品能够同时接受检测,在检查时由当日在岗检验人员严格按照相关流程进行操作,并分析质控结果,确保质控合格后方可继续完成标本检测。
严格按照相关规定使用血液分析仪,确保使用方法与流程的正确性,当检测过程中出现直方图变化、警示符号与异常数量变化情况时需做好血涂片显微镜检查与人工计数;如果仍然未能解决问题,可邀请医院资深检验人员进行复查,确保检测结果的准确性。
做好血液分析仪校对工作。在检测开始前需认真做好校对工作,通过修正电子系统、气压系统、流体系统精度的方式,以维持系统精度,确保测量结果精度。在校对时仅需将校对者输入仪器中方可完成校对,通常情况下仪器首次校对由仪器安装时的代理商完成。当仪器安装完成并投入使用后,定期由操作者进行校对,并注意维持仪器精度,如有需要还可进行相应的质控。①校对实施原则为:在正常使用时,无需按照特定周期进行校对,但出现质控且数据随时间变动时,方可进行红细胞压积与血红蛋白的校对。需注意的是,当试剂与仪器出现异常情况,且质控血液出现变质情况,质控存在异常数据时,不可进行校对。②校对标本:需使用满足以下条件的5个以上新鲜血液标本进行校对,主要包括:①近期未接受过药物治疗的健康者血液;②血液中存在适量抗凝血剂;③个标本全血量超过2mL;④血红蛋白值超过100g/L;⑤红细胞压积值维持于35.5%~55.5%[8]。
在实际检测过程中,如发现仪器单核偏高情况,可将多名经验丰富检验人员的镜检单核百分比结果作为依据,以此完成白细胞分类的校正,确保白细胞分类校正结果与检验人员镜检结果一致,可有效解决仪器单核偏高问题。但如果出现仪器单核真正增高且触及复检规则情况时,需完成镜检。
随着我国居民生活方式、饮食习惯及整体环境的变化,导致各种疾病发生率逐渐升高,血液检验能够在很大程度上为临床诊断与病情评估提供重要参考依据,因此确保检测分析结果准确性具有积极意义。血液分析仪作为血液检验中常用的检验方法,不仅具有检测速度快、精密度高、质控化等优点,还可在很大程度上避免由人为操作所导致的误差,目前应逐渐取代部分血液检验中的显微镜检查,对于临床诊断具有重要作用,因此总结血液分析仪在血液检验中的各种问题,并提出相应解决方法能够在很大程度上确保血液检验结果的准确性。