Wnt1与WT1在卵巢癌中的表达及临床意义

裴 越，刘盈盈，孙森森，付 莉，吕荣荣，张凤舜

(吉林大学第二医院 妇产科，吉林 长春130041)

Wnt的激活已经在乳腺、肺、结直肠和造血系统恶性肿瘤中被观察到，并与肿瘤的复发相关[1]。其中，Wnt1蛋白是一种分泌信号蛋白，结合卷曲体受体(FZD)和协同受体低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5),启动Wnt信号通路[2]。Wilms’tumour(WT1)在成人肿瘤中广泛表达，包括来自上皮、间充质、造血和神经元组织。哺乳动物WT1基因长度为50 kb，编码多达10个外显子的蛋白质。至少有36种潜在的哺乳动物WT1亚型，其多样性是通过替代转录起始位点、翻译起始位点、剪接和RNA编辑的组合而产生的[3]。Carter.等[4]对196例卵巢肿瘤进行研究，结果表示WT1与卵巢肿瘤类型、分级、FIGO分期及患者生存相关。本研究探讨卵巢癌、正常卵巢组织中Wnt1蛋白及WT1阳性表达及临床意义。为今后临床检测卵巢癌提供新思路。

1 资料和方法

1.1 研究对象

收集 2019年6月至2020年6月于吉林大学第二医院就诊的34例卵巢癌患者作为研究对象，同时取因子宫肌瘤行全子宫、双附件切除术患者的正常卵巢组织10例，作为对照组，年龄为 43-73岁。所有患者均接受手术治疗并经病理确诊，其中浆液性癌 24 例，黏液性癌 2例，透明细胞癌 4例，子宫内膜样癌3 例，未分化癌1例，且均未接受放疗、化疗及其他抗肿瘤治疗;所有患者均未合并其他原发性肿瘤。患者按(FIGO，2014) 标准进行手术-病理分期，其中Ⅰ期4例，Ⅱ期12例，Ⅲ期17例，Ⅳ期1 例;按是否伴有淋巴结转移进行分组，其中淋巴结转移组8例，无淋巴转移组17例。本研究已通过我院伦理委员会审批。

1.2 方法

1.2.1免疫组化检测Wnt1、WT1表达情况 按照说明书，采用免疫组化(SP) 法观察Wnt1 、WT1阳性反应情况。试剂由Immunoway公司提供。比较不同年龄、手术-病理分期、病理学分组、淋巴结转移情况时Wnt1、WT1表达阳性率(计算公式为Wnt1表达阳性例数÷总例数×100%) 。

1.2.2统计学方法 应用SPSS22.0软件进行χ2检验、计算P值，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 Wnt1和WT1在正常卵巢及卵巢癌组织中表达和比较卵巢癌组织中 Wnt1 和WT1的阳性率均显著高于正常卵巢组织(表1) 。Wnt1卵巢癌组与正常卵巢组差异无统计学意义(P>0.05)，WT1表达卵巢癌组与正常卵巢组差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 不同卵巢组织中Wnt1、WT1表达情况

2.2 卵巢癌组织 Wnt1与卵巢癌临床病理特征间的关系免疫组化染色后，镜下可见Wnt1 阳性细胞质与细胞核呈棕黄色染色，不同年龄的卵巢癌患者Wnt1蛋白相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。不同手术-病理分期卵巢癌的Wnt1蛋白相对表达量不同(P<0.05)，从Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相对表达量逐渐增高，差异有统计学意义(P<0.05)。不同病理学分组卵巢癌的 Wnt1蛋白相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌伴有淋巴结转移时，Wnt1蛋白相对表达量高于无淋巴结转移患者，差异有统计学意义(P<0.05) (表2)。

表2 卵巢癌组织中Wnt1的表达情况

2.3 卵巢癌组织中WT1的表达免疫组化染色后，镜下可见WT1 阳性细胞质呈棕黄色染色，不同年龄的卵巢癌患者WT1蛋白相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。不同手术 -病理分期卵巢癌的WT1蛋白相对表达量不同(P<0.05) ，从Ⅰ- Ⅳ期Wnt1蛋白相对表达量逐渐增高，差异有统计学意义(P<0.05) 。不同病理学分组卵巢癌的 WT1蛋白相对表达量差异有统计学意义(P<0.05) 。卵巢癌有、无淋巴结转移时，WT1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05) (表3)。

表3 卵巢癌组织中WT1的表达情况

3 讨论

Wnt1蛋白作为Wnt/β-catenin通路的配体之一，由于其基因突变与肿瘤发生密切相关，近年来，已成为研究的热点。既往有研究发现，上皮性卵巢浆液性癌组织中WNT1蛋白高表达[5]，但其在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及机制尚未完全明确。我们通过对已确诊的卵巢癌患者的组织进行免疫组化分析，Wnt1蛋白不仅在卵巢癌中表达，也在正常卵巢组织中表达，在卵巢癌中表达的阳性率高于正常卵巢组织中表达的阳性率，但由于正常卵巢组织样本数量相对较少，不除外存在偏差，未来仍需要大样本数据进一步研究。另外，Wnt1蛋白与卵巢的分期、有无淋巴转移有关，分期越晚，表达程度越高，Ⅲ期明显高于Ⅰ-Ⅱ期，由于Ⅳ期患者术前大多采用新辅助化疗，样本量较少，此次数据中的Ⅳ期患者标本Wnt1表达阳性，不除外个体差异。有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组。Wnt1的表达与年龄、肿瘤病理学类型无明显相关性。

WT1在肿瘤侵袭和转移中发挥重要作用,小鼠模型中WT1缺失显著抑制细胞迁移和侵袭，逆转上皮-间充质转化(EMT)，并阻止卵巢癌细胞的转移[6]。在本研究中表明，WT1表达与卵巢癌病理学类型有明显的相关性，几乎大部分浆液性卵巢癌中均表达WT1，其他病理学类型如：子宫内膜样、透明细胞样、粘液性卵巢癌中，WT1表达较弱，或不表达。这也与崔丽燕等[7]的研究结果一致。WT1的表达与手术-病理分期有关，病理分期越晚，其表达率越高，与年龄、淋巴转移无相关性。