食品微生物检验常用培养基配制、灭菌及贮藏研究

□ 吴芳媛 冯秋芳 林 黎 湖州市食品药品检验研究院

当前，各个领域的检测设备及其自动化已经得到了一定的发展，但在微生物检验领域，仍然采用传统的检测方法，即利用培养法，对微生物进行培养、分离以及生化鉴定。检测的过程中，微生物培养基的合理性对微生物的生长、分离以及鉴定结果的准确性具有一定影响。基于此，本文开展了食品微生物检验常用培养基配制、灭菌及贮藏研究。

1 食品微生物检验常用培养基配制

针对食品微生物检验常用培养基的配制，应当根据不同检验目的，选择不同的配制材料，表1 为3 种常见的培养基材料配比表。

表1 3 种常见的培养基材料配比

表1 中牛肉膏蛋白胨培养基主要用于食品微生物中细菌的培养，为保证培养基的质量，需要在125 ℃环境下持续进行15 min 的灭菌处理；Gause1 号培养基主要用于放线菌的培养，在配制的过程中，首先应当在淀粉中添加少量的冷水，通过搅拌得到糊状淀粉后，再将其倒入100 ℃的水中，然后加热并加入其余配制材料搅拌至溶化，配制后同样需要在125 ℃环境下持续进行15 min 的灭菌处理；Martin 琼脂培养基主要作用是食品微生物中真菌的分离，完成灭菌处理后，在使用前加入0.02%链霉素稀释液，通常为100 ～150 mL，保证每毫升培养基当中均含有25 μg 链霉素。在实际食品微生物检验过程中，根据不同的需要对配制材料进行选择。按照上述材料及配制方法完成培养基的配制，并将其装入立式压力蒸汽灭菌装置当中，根据需要对pH 值进行调节。

2 食品微生物检验常用培养基灭菌

培养基可选用物理法和化学法两种灭菌方法，其中物理法包括湿热灭菌法、干热灭菌法等，化学法包括抗生素抑菌法、消毒剂消毒法等。湿热灭菌法将培养基放置在高压蒸汽装置中，通过其潜热作用以及穿透力，使菌体蛋白质凝固并变性[1]。高压蒸汽装置压力通常在0.12 ～0.13 MPa，持续15 ～25 min 可得到最佳的灭菌效果。

干热灭菌法利用恒温干燥箱，将其内部温度调节至155 ～165 ℃，持续70 ～90 min 后，将培养基放置在干燥箱中，达到灭菌的效果。

消毒剂消毒法常用的试剂包括甲醛（HCHO）、高锰酸钾（KMnO4）、乙 醇（C2H6O）， 用0.5% ～0.6% 氯化汞、12.5%次氯酸钠、饱和漂白粉等进行灭菌可达到良好的灭菌效果[2]。抗生素抑菌法中常见的抗生素包括青霉素、链霉素和新霉素，将抗生素添加在培养基当中可以有效预防微生物感染，以此达到抑菌的效果。

3 食品微生物检验常用培养基贮藏

按照需要将灭菌后的食品微生物检验常用培养基进行瓶装保存或倾注至平板容器密封保存。通常情况下，培养基可在1.5 ～7.5 ℃的冰箱中贮藏。贮藏的有效期应当根据实际情况进行调整。

4 结语

本文针对几种常见的食品微生物检验培养基的配制、灭菌及贮藏进行研究，为后续微生物培养基质量控制提供参考。在实际检验过程中，根据不同的检验目的选择对应的培养基进行培养，以为检验结果准确性和精度的提高提供保证，以达到事半功倍的效果。