假蒟提取物对小鼠胃肠运动的实验研究

黄永毅 凌秀孟 蒙玥 陈敬怡 李波 梁绿萍

【摘要】 目的 觀察假蒟提取物对小鼠胃排空和小肠推进的影响，并分析假蒟对胃肠运动的影响机制。

方法 采用碳末推进试验法，以正常对照组为对照模型，观察假蒟水提液高、中、低剂量（2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg）对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响。以阿托品、肾上腺素分别建立小鼠的胃肠运动抑制模型，以新斯的明建立胃肠运动亢进模型，用胃残留率和小肠推进率为指标，观察不同剂量的假蒟水提液对小鼠胃肠道作用的影响。

结果 与正常对照组相比，假蒟水提液的中、高剂量组对小鼠的胃排空有促进作用（P<0.05或0.01），高剂量组对小鼠的小肠推进率有促进作用（P<0.01）;假蒟的高剂量组可拮抗阿托品所致小鼠胃肠运动抑制，显著降低小鼠胃残留率，促进小鼠小肠的推进率（P<0.05）;假蒟中、高剂量组与肾上腺素模型组比较，胃残留率增加，差异有统计学意义（P<0.05或0.01），小肠推进率无显著变化（P>0.05）;假蒟中、高剂量组可拮抗新斯的明导致的胃肠运动亢进，显著提高小鼠的胃残留率，差异有统计学意义（P<0.01），小肠推进率下降，差异有统计学意义（P<0.05或0.01）。

结论 假蒟水提液对小鼠的胃肠运动有一定促进作用，在胃肠病理状态下呈现出双向调节的效果，其机制可能与胆碱能系统及肾上腺素能系统有关。

【关键词】 假蒟;水提液;胃排空;小肠推进

中图分类号：R285.5   文献标志码：A   DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.12.002

【Abstract】 Objective To observe the effects of extracts of Piper sarmentosum Roxb on gastric emptying and small intestinal propulsion in mice， and to analyze the mechanism of Piper sarmentosum Roxb extracts on gastrointestinal motility.

Methods Carbon powder propulsion test was used， normal control group was used as control model， and the effects of high， medium and low doses （2 g/kg， 1 g/kg and 0.5 g/kg） of water extracts of Piper sarmentosum Roxb on gastric emptying and small intestinal propulsion in mice were observed. Atropine and epinephrine were respectively used to establish the inhibition model of gastrointestinal motility in mice， and neostigmine was used to establish the hypermotility model of gastrointestinal motility. The effects of different doses of water extracts of Piper sarmentosum Roxb  on gastrointestinal tracts in mice were observed by the indexes of gastric residue rate and intestinal propulsion rate.

Results Compared with the normal control group， the medium and high doses of Piper sarmentosum Roxb groups had promoting effect on gastric emptying of mice （P<0.05 or 0.01）， and the high dose group had significant promoting effect on the small intestine propulsion rate of mice（P<0.01）. The high dose group could antagonize the inhibition of gastrointestinal motility in mice caused by atropine， significantly reduce the rate of gastric residue in mice， and promote the propulsion rate of the small intestine of mice （P<0.05）; compared with the adrenaline model group， medium and high dose groups showed increased gastric residual rate， and the difference was statistically significant （P<0.05 or 0.01）， but the small intestine propulsion rate did not change significantly （P>0.05）; the medium and high dose groups could antagonize gastrointestinal hypermotility induced by neostigmine， the gastrointestinal hypermotility significantly increased in mice， and the difference was statistically significant （P<0.01）， the small intestine propulsion rate decreased， and the difference was statistically significant （P<0.05 or 0.01）.

Conclusion The water extract of Piper sarmentosum Roxb can promote gastrointestinal motility in mice， and exhibit a two-way regulation effect under gastrointestinal pathology， and the mechanism of which may be related to cholinergic system and adrenergic system.

【Key words】 Piper sarmentosum Roxb;water extract; gastric emptying; small intestinal propulsion

假蒟（Piper sarmentosum Roxb），又名蛤蒟、假蒌、假著、荜茇子、巴岩香，为胡椒科假蒟属植物，主产于广西、福建、广东等省区。具有祛风利湿、温中散寒、止痛消肿等功效，常用于治疗肾炎水肿、胃腹寒痛等疾病[1～2]。袁宏球等[3]报道，在假蒟叶中分离到的化合物对杆状细菌和埃希氏菌属有抑制作用，说明此类物质有潜在的抗菌价值，以及假蒟叶甲醇提取物中含有抑制真菌的活性次生物质。周斯仪等[4]报道，假蒟甲醇提取液有抗氧化活性，其中的黄酮、生物碱有抗菌活性，假蒟全株水提液有降低糖尿病大鼠血糖水平等作用。假蒟主要含糖、多糖、有机酸、苷类、挥发油、生物碱、黄酮、内酯、植物甾醇、香豆素、三萜类、油脂等成分[5]。目前未见有假蒟（茎叶部分）提取物对小鼠胃肠运动影响的相关报道，为进一步研究假蒟的药效，本实验以小鼠为研究对象，初步探讨假蒟水提液对小鼠胃肠运动功能的影响，旨在为临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 药品与试剂

假蒟（广西壮族自治区百色市市售药材），经右江民族医学院民族医学教研室覃道光教授鉴定为假蒟茎叶;活性碳末（西陇化工股份有限公司，批号：170114）;羧甲基纤维素钠（成都市新都区木兰镇工业开发区，批号：20170727）;盐酸阿托品注射液（河南润弘制药有限股份公司，批号：1806302）;盐酸肾上腺素注射液[远大医药（中国）有限公司，批号：170609];甲氧氯普胺（山西云鹏制药有限公司，批号：F170301）。新斯的明注射液（上海信谊金朱药业公司，批号：1710503）

1.1.2 实验动物

普通昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，由右江民族医学院实验动物中心提供，许可证号：SYXK（桂）2017-0004。

1.1.3 仪器

电子天平（余姚市纪铭称重校验设备有限公司，型号：JM-B1003）

1.1.4 假蒟水提液的制备

称取假蒟干燥茎叶200 g，加入5倍量水（1000 mL）常温浸泡1 h，大火煮沸后慢火煎煮1 h，过滤留下滤液，取滤渣再加水1000 mL煮沸后慢火煎煮1 h，过滤弃滤渣，合并两次滤液用纱布过滤，隔水蒸发浓缩，定容为2 g/mL，冰箱冷藏，用时恢复至室温。

1.1.5 碳末混悬液的制备

称取活性碳末5 g、羧甲基纤维素钠2 g溶于100 mL双蒸水中，搅拌均匀配制成碳末混悬液[6]，冰箱冷藏，用时恢复至室温。

1.2 方法

1.2.1 假蒟水提液对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响

小鼠随机分成5个组：正常对照组，阳性药（胃复安）组，假蒟水提液高、中、低剂量（2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg）组，每组10只。各组都按10 mL/kg的容积灌胃给药，正常对照组灌胃等容积的蒸馏水，阳性药组每次灌胃甲氧氯普胺（胃复安）2.5 mg/kg，假蒟高、中、低剂量组每次分别灌胃假蒟水提液2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg，各组每天灌胃2次，连续4 d。末次给药前禁食不禁水12小时，给药30 min后，每只小鼠灌胃5%碳末混悬液0.25 mL/10 g，20 min后用颈椎脱臼法处死小鼠。迅速剪开腹腔，取出胃，称胃全重和胃净重。计算胃内容物残留率（%）=[（胃全重-胃净重）/碳末混悬液质量]×100%[7]。以胃内容物残留率为指标评价胃排空速度。同时取出小肠幽门至回盲部分离肠系膜，自然平铺于桌面上，自由伸展后测量小肠总长度及碳末混悬液在小肠内推进的距离，用于计算小肠推进率，推进率（%）=小肠内碳末推进的距离（cm）/小肠总长度（cm）×100%[7]。

1.2.2 对阿托品致小鼠胃排空及小肠推进抑制的影响[8]

小鼠随机分成5个组：正常对照组、阿托品模型组、阳性药组、假蒟中剂量组、假蒟高剂量组，每组10只。各组都按10 mL/kg容积灌胃给药，正常对照组和阿托品模型组灌胃等容积的蒸馏水，假蒟中、高剂量组给药剂量同1.2.1;阳性药组每次灌胃甲氧氯普胺（胃复安）2.5 mg/kg，各组都是每天灌胃2次，连续给药4 d，末次给药前禁食不禁水12小时，给药30 min后，正常对照组腹腔注射等量生理盐水，其余各组均给予腹腔注射硫酸阿托品0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末懸液0.25 mL/10 g，20 min后用颈椎脱臼法处死小鼠，取胃和小肠，计算胃排空率和小肠推进率。方法同1.2.1。

1.2.3 对肾上腺素致小鼠胃排空及小肠推进抑制的影响[9]

小鼠随机分成5个组：正常对照组、肾上腺素模型组、阳性药组、假蒟中剂量组、假蒟高剂量组，每组10只。各组均按10 mL/kg容积灌胃给药，正常对照组和肾上腺素模型组灌胃等容积蒸馏水，假蒟中、高剂量组给药剂量同1.2.1;阳性药组每次灌胃甲氧氯普胺（胃复安）2.5 mg/kg，各组都是每天灌胃2次，连续给药4 d，末次给药前禁食不禁水12小时，给药30 min后，正常对照组腹腔注射等量生理盐水，其余各组均腹腔注射盐酸肾上腺素注射液0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末悬液0.25 mL/10 g，20 min后用颈椎脱臼法处死小鼠，取胃和小肠，计算胃排空率和小肠推进率。方法同1.2.1。

1.2.4 对新斯的明致小鼠胃排空及小腸推进亢进的影响[9]

小鼠随机分成5个组：正常对照组、新斯的明模型组、阳性（阿托品）组、假蒟中剂量组、假蒟高剂量组，每组10只。各组均按10 mL/kg容积灌胃给药，正常对照组、新斯的明模型组、阳性药（阿托品）组均灌胃等容积蒸馏水，假蒟中、高剂量组给药剂量同1.2.1，各组都是每天灌胃2次，连续给药4 d，末次给药前禁食不禁水12小时，正常对照组灌胃等容积蒸馏水，其余各组均灌胃新斯的明2 mg/kg，阳性药（阿托品）组还同步给予腹腔注射阿托品0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末悬液0.25 mL/10 g，20 min后用颈椎脱臼法处死小鼠，取胃和小肠，计算胃排空率和小肠推进率。方法同1.2.1。

1.3 统计学方法

采用SPSS 26.0软件对数据进行处理，计量资料呈正态分布，实验数据以均数±标准差（±s）表示，用单因素方差分析，组间两两比较用LSD法，检验水准：α=0.05，双侧检验。

2 结  果

2.1 假蒟水提液对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响

假蒟水提液中、高剂量组和胃复安组的小鼠胃残留率均低于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05或0.01），提示假蒟中、高剂量组对小鼠胃排空有促进作用;胃复安组和假蒟高剂量组的小肠推进率高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05或0.01）;提示假蒟高剂量组对小鼠小肠推进有促进作用;低剂量组小鼠的胃残留率和小肠推进率与正常对照组比较均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.2 对阿托品致小鼠胃排空及小肠推进抑制的影响

阿托品模型组小鼠的胃残留率高于正常对照组，小肠推进率低于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.01），提示阿托品抑制小鼠胃肠运动;与阿托品模型组比较，假蒟中剂量组有降低胃残留率和增加小肠推进率的趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）;假蒟高剂量组的胃残留率降低，小肠推进率增加，差异有统计学意义（P<0.05），提示假蒟高剂量可拮抗阿托品导致的胃排空及小肠推进抑制;胃复安可拮抗阿托品所致的胃肠运动抑制（P<0.01）。见表2。

2.3 对肾上腺素致小鼠胃排空及小肠推进抑制的影响

肾上腺素模型组小鼠胃残留率高于正常对照组，小肠推进率低于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.01），提示肾上腺素有抑制小鼠的胃肠运动的作用;与肾上腺素模型组比较，假蒟中、高剂量组小鼠胃残留率增加，差异有统计学意义（P<0.05或0.01），小肠推进率变化无统计学意义（P>0.05），提示假蒟中、高剂量在某些胃肠功能障碍状态下，胃排空抑制情况会加重，但对小肠推进无明显改变，胃复安可明显拮抗肾上腺素所致的胃排空和小肠推进抑制（P<0.01）。见表3。

2.4 对新斯的明致小鼠胃排空及小肠推进亢进的影响

新斯的明模型组小鼠胃残留率低于正常对照组，小肠推进率高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.01），提示新斯的明对小鼠的胃肠运动起到亢进作用。与新斯的明模型组比较，假蒟中、高剂量组小鼠胃残留率增加，差异有统计学意义（P<0.01），小肠推进率下降，差异有统计学意义（P<0.05或0.01），提示假蒟中、高剂量可拮抗新斯的明所致胃排空和小肠推进亢进。阿托品可明显拮抗新斯的明所致胃肠运动亢进（P<0.01）。见表4。

3 讨  论

假蒟在壮药中用于治疗腹胀、肠炎腹泻、腹痛、食欲不振[10]，本实验在前期研究中观察到一定浓度的假蒟水提液对正常小鼠的胃排空和小肠推进均有促进作用。在此基础上，我们采用阿托品和肾上腺素建立小鼠的胃排空和小肠推进抑制模型，新斯的明建立胃肠运动亢进模型，进一步研究假蒟对胃肠运动病理模型状态下的影响。

胃肠运动的调节主要由交感神经和副交感神经系统以及存在肠壁内的肠神经系统来控制，目前研究显示，胃肠道上存在胆碱能的M受体以及肾上腺素的α受体、β受体[11]。神经系统中的各种递质与相应受体结合后，表现出不同的生理作用[12]。

阿托品为非选择性M胆碱能受体阻断剂，通过阻断乙酰胆碱跟M受体结合的作用，导致乙酰胆碱无法发挥兴奋胃肠道平滑肌的作用，使平滑肌松弛，从而形成胃肠蠕动的障碍，其效果为降低蠕动的频率及幅度，最终表现出抑制平滑肌的收缩[13～14]。肾上腺素是由肾上腺髓质分泌的一类激素，也是α和β受体激动药，其通过兴奋α和β受体，致使平滑肌收缩力降低[15]。新斯的明是抗胆碱酯酶药，通过抑制胆碱酯酶的活性，表现出拟胆碱效果，有兴奋胃肠道平滑肌，加强胃收缩和促进肠蠕动的作用[9]。

本实验结果显示，与正常对照组比较，阿托品和肾上腺素均能够显著提高小鼠胃内容物的残留率及降低小肠推进率，新斯的明能够显著降低胃残留率和提高小肠推进率，说明实验小鼠使用造模药后的症状符合用药后的临床表现。假蒟高剂量组能够促进小鼠的胃排空和小肠推进，可改善阿托品对胃肠运动抑制作用，同时又抑制新斯的明致胃肠运动的亢进作用，说明假蒟有可能是通过影响胆碱能受体的途径来发挥促胃肠运动作用的。在肾上腺素组的实验结果显示，假蒟中、高剂量组对肾上腺素抑制小鼠的胃排空有协同作用。这提示了在肾上腺素能系统引起的胃肠道功能障碍情况下服用假蒟可能会加重病情，要谨慎使用。在不同的病理状态下，假蒟不同剂量引起不同的作用。我们推测假蒟对小鼠胃肠道的调节作用有可能与M胆碱能受体和肾上腺素能系统有关，也可能由于假蒟药物的成分复杂，胃肠机能状态存在差异，对草药不同成分引起不同效果。

综上所述，假蒟水提液对小鼠的胃肠运动有一定促进作用，在胃肠病理状态下呈现出双向调节的效果，其机制可能跟胆碱能系统及肾上腺素能系统有关。

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（收稿日期：2021-08-30 修回日期：2021-11-13）

（编辑：潘明志）