胶体果胶铋动力黏度的测定方法

李 娜， 王旭文， 刘艳之

(山西振东安特生物制药有限公司，山西 晋中 030600)

胶体果胶铋是一种新型胶体铋制剂，具有保护胃肠黏膜、直接杀灭幽门螺杆菌和止血作用，可促进溃疡愈合、炎症好转，并可降低溃疡的复发率。其作用机制在于本药具有较强的胶体特性，在酸性介质中形成高黏度溶胶，与溃疡面及炎症表面强力亲和，形成有效的保护膜，隔离胃酸，增强胃黏膜的屏障作用，因此本药对消化性溃疡和慢性胃炎有较好的治疗作用[1]。

大量药理及临床资料表明，铋盐类药物对胃肠疾病的治疗作用与其和受损伤胃肠黏膜的黏附性呈正相关，而黏附性又与药物的胶体特性有关，胶体特性好的铋盐不仅能增强对胃肠黏膜的保护作用，同时也有利于杀灭幽门螺杆菌。黏度可反映出药物的胶体特性，胶体果胶铋黏度越大，在胃粘膜上形成的保护膜越牢固，对糜烂面和溃疡灶保护作用越强；反之，黏度越小，在胃黏膜上形成的保护膜越薄弱，对糜烂面和溃疡灶保护作用越弱[2]。

因此，胶体果胶铋的胶体特性拟用黏度来进行评价，以更好地控制其质量。

本研究是将胶体果胶铋加适量水分散后，再加人工胃液形成高黏度的稳定溶胶，采用转子型旋转黏度计测定上述溶胶在37 ℃条件下的动力黏度，操作简便快速，结果准确。在模拟人体胃肠环境中测定动力黏度，更能体现出胶体果胶铋在人体中的黏度情况，以体现出胶体果胶铋或含胶体果胶铋制剂的胶体特性。

1 仪器与试药

1.1 仪器

NDJ-8S微机型数字显示旋转黏度计，上海衡平仪器仪表厂；DC-0506W低温恒温槽，上海衡平仪器仪表厂。

1.2 试药

胶体果胶铋，山西振东安特生物制药有限公司，批号：20180501、20180502、20180503；胃蛋白酶，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，分析纯，活力1:15000，批号：L1714086；盐酸，西陇化工股份有限公司，分析纯，批号：151204；试验用水为纯化水。

2 方法及结果

2.1 溶液的制备

样品溶液的制备：取胶体果胶铋4.0 g(以铋计0.6 g)，精密称定，置于500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，即得。

人工胃液的制备：取稀盐酸16.4 mL，加水约800 mL，胃蛋白酶10 g，摇匀后，加水稀释成1 000 mL，即得[3]。

稀盐酸的制备：取盐酸234 mL，加水稀释至1 000 mL，即得。本液含HCl体积分数为9.5%～10.5%[4]。

2.2 黏度测定方法各实验条件的确定

2.2.1 测定温度

中国药典2015年版黏度测定温度为20 ℃和25 ℃[5]，考虑到为评价胶体果胶铋进入人体内的黏附力，因此测定温度选用人体温度37 ℃。

2.2.2 转子及转速

取20180501批胶体果胶铋4.0 g，精密称定，置于500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加水380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液。将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定。旋转黏度计分别选用1#、2#转子，转速6、12、30、60 r/min，结果见表1。

表1 不同转子、转速的动力黏度测定结果

使用旋转黏度计测定动力黏度时，质量分数应在10%～90%，且质量分数在50%附近时动力黏度值误差较小。由表1可见，1#转子、转速6 r/min时，质量分数55.3%，最接近50%。因此，旋转黏度计的转子确定为1#、转速确定为6 r/min。

2.2.3 溶剂

取20180501批胶体果胶铋3份，每份各4.0 g，精密称定，置500 mL烧杯中，依次加水100、120、140 mL，搅拌使其分散，再分别加人工胃液400、380、360 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定，结果见表2。

表2 加水量考察测定结果

由表2可见，加水量为100、120、140 mL时百分比均在10%～90%，其中加水量为120 mL时样品溶液的动力黏度值最高，因此分散样品的加水量确定为120 mL。

2.2.4 样品浓度

取20180501批胶体果胶铋2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 g，精密称定，分别置于500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法测定(中国药典2015年版四部通则0633第三法)，结果见表3、图1。

表3 不同浓度样品溶液的动力黏度测定结果

图1 样品溶液的动力黏度曲线图

由图1可见，动力黏度随样品溶液浓度增加而增大。由表3可见，样品溶液质量浓度为0.004、0.006、0.008、0.010 g/mL时质量分数均在10%～90%，质量浓度为0.012 g/mL时质量分数超出10%～90%。当称样量为4.0 g即质量浓度为0.008 g/mL时，质量分数48.0%，动力黏度值误差较小，因此样品溶液质量浓度确定为0.008 g/mL，即样品称样量4.0 g(以铋计0.6 g)。

2.3 实验结果

2.3.1 重复性实验

取20180502批胶体果胶铋6份，每份各4.0 g，精密称定，分别置500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定。6份样品溶液，每份测定1次，动力黏度平均值为630.7 mPa·s，RSD为1.42%(n=6)，表明方法重复性良好。结果见表4。

表4 重复性测定结果

2.3.2 稳定性实验

取20180503批胶体果胶铋4.0 g，精密称定，置500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，分别于0、1、2、3、4、5、6 h依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定，动力黏度平均值为622.8 mPa·s，RSD为1.45%(n=7)，表明样品溶液在6 h内稳定性良好。结果见表5。

表5 稳定性考察测定结果

2.3.3 三批样品测定结果

取20180501、20180502、20180503批胶体果胶铋，各4.0 g，精密称定，分别置于500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定。每个样品重复测6次，动力黏度平均值分别为557.6、634.0、627.3 mPa·s，RSD分别为1.45%、1.43%、1.41%(n=6)，表明仪器精密度良好。结果见表6。

3 动力黏度测定方法

综合上述结果，确定胶体果胶铋动力黏度测定方法：取胶体果胶铋4.0 g(以铋计0.6 g)，精密称定，置500 mL烧杯中，加水120 mL，搅拌使分散，再加人工胃液380 mL，搅拌均匀，作为样品溶液；将烧杯垂直固定于37 ℃恒温水浴槽中，放置15 min后，依法(中国药典2015年版四部通则0633第三法)测定。旋转黏度计选用1#转子、转速6 r/min。

4 结果及讨论

4.1 溶剂的选择

胶体果胶铋在乙醇等有机溶剂中不溶，在水中结块，振摇后能均匀分散在水中。为评价胶体果胶铋进入人体内的黏度情况，模拟人体胃肠环境，考虑用人工胃液，结果发现样品直接加人工胃液不溶，必需先加少量的水使其均匀分散，再加人工胃液，才能形成稳定的溶胶，以测定其动力黏度。

表6 三批样品的动力黏度测定结果

4.2 胃蛋白酶的选择

使用不同生产厂家、不同活力的胃蛋白酶配制的人工胃液，测定样品溶液的动力黏度值差别较大。分别考察了卡迈舒(上海)生物科技有限公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)、北京奥博星生物技术有限责任公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、上海阿拉丁生化科技股份有限公司胃蛋白酶(活力1∶15 000)配制的人工胃液，在37 ℃条件下测定样品溶液的动力黏度，结果显示，卡迈舒胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)测定的黏度值不稳定且随放置时间延长而增大，奥博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)测定的黏度值稳定，考虑到奥博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000))测的黏度值较阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)数值低，误差较大，因此选用阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)。