胶红酵母菌引起的真菌血症1例

杨姗姗，刘 威，陈 勃

(吉林大学第一医院二部 1.检验科;2.输血科，吉林 长春130031)

红酵母菌(Rhodotorula spp)，属于隐球菌科，孢子为球形、卵圆形或长形，有明显的红色或橘黄色色素，广泛存在于自然界中，既往被认为无致病性。近年来，由红酵母菌引起的腹膜透析性相关性腹膜炎、中枢神经系统的真菌血症逐年增多，视为条件致病菌[1-4]，现将由于误输入“井水”导致胶红酵母菌感染，引起真菌血症1例病例，报道如下。

1 病例资料

患者，女性，77岁，高血压病史20年，入院前7 h因误输入井水后出现周身疼痛，以剑突下为主，伴寒战、发热，体温38.3℃，呼吸困难，咳嗽、咳痰，无腹痛、腹泻症状。

实验室检查：真菌D-葡聚糖检测66.36 pg/ml，降钙素原9.87 μg/L；钾(K) 3.33 mmol/L，AST 186 U/L，GGT 196 U/L，ALT 126 U/L；D-二聚体(D-D)>20 μg/ml；纤维蛋白(原)降解产物(FDP)>150 μg/ml；CRP:15.45 mg/L；WBC:15.31×109/L，NE%:93.3%。由于高热伴随炎症反应给予头孢他啶2 g,2次/d。患者再次发热寒战，采集静脉血分别注入需氧、厌氧及真菌/结核培养瓶，各2瓶，患者拒绝抗真菌治疗，定期监测真菌D-葡聚糖。

经BACTEC(TM)FX-400全自动血培养鉴定系统(美国BD公司)进行培养，真菌瓶BACTEC Myco/F-Lytic 2天15 h 17 min报警阳性,需氧树脂瓶13 h 15 min报警阳性(美国BD公司)，直接涂片革兰染色(珠海贝索)镜检见酵母样孢子，将报警阳性瓶接种于沙保弱葡萄糖琼脂培养基(SDA)，2套分别放置28℃和36℃孵育箱，培养24-48 h。

MALDI-TOF MS(美国BD公司布鲁克质谱鉴定仪)全血快速鉴定。将报警阳性瓶中的全血抽出放入带分离胶的BD采血管,采集6 ml/管，1 200 g离心10 min,将分离管底部灰白色沉淀用无菌加样枪移至1.5 ml无菌 eppdorf管中,管中加入75%乙醇900 μl,振荡器充分混匀后13 000 g离心3 min，取50 μl乙腈和50 μl 70%的甲酸加入eppdorf管中，震荡混匀后13 000 g离心2 min。用无菌加样枪取已制备好的上清液1 μl至不锈钢靶板孔，自然干燥后加1 μl基质液(仪器配套)待干燥后上机。

MALDI-TOF MS质谱鉴定结果为胶红酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)Score Value2.316。菌落特征：在SDA培养基上生长较快，酵母样菌落，光滑湿润，随着培养时间的延长可出现脑回样褶皱，因产生胡萝卜素，菌落颜色为桃红色、珊瑚色或浅橙色，直接压片镜检，细胞多细长，出芽，似有假菌丝，具有荚膜的圆形的出芽酵母，荚膜较小。区分鉴别试验：胶红酵母酵素酶阳性，硝酸盐还原试验阴性，不能发酵其他糖类，无同化肌醇的能力，粘红酵母硝酸盐还原试验阳性。与隐球菌属的区别：隐球菌镜检荚膜宽大，SDA上菌落为奶白色，胶红酵母镜检荚膜小且SDA上菌落为桃红色。

根据美国CLSI-M27-S4进行体外药敏，结果判读质控菌株为ATCC6258，药敏试剂为Thermo sensititerTM YeastOne YO10,胶红酵母菌药敏MIC值结果：米卡芬净(MF)>8 μg/ml，卡泊芬净(CAS)>8 μg/ml，阿尼芬净(AND)>8 μg/ml,氟康唑(FCA)>256 μg/ml，两性霉素B(AMB)0.25 μg/ml,5-氟胞嘧啶(5-FC) ≤0.06 μg/ml,伊曲康唑(ITR)0.25 μg/ml，伏立康唑(VRC)0.25 μg/ml，泊沙康唑(PZ)1 μg/ml。

2 讨论

常见的红酵母菌有60种，导致人类致病的是胶红酵母菌、小红酵母菌、粘红酵母菌，红酵母菌是潮湿皮肤的定植菌，可以从浴帘、浴缸、牙刷中分离出来，近年来由于广谱抗生素，粒细胞的减少及HIV感染，恶性肿瘤，中心静脉导管(CVC)置管，以及器官移植后免疫抑制剂的使用，使红酵母菌引起的真菌血症持续增加[5]，据报道红酵母菌感染最多为血流感染，其次眼角膜炎、腹膜透析相关性腹膜炎、心内膜炎及神经中枢系统感染，除胶红酵母菌外还有少量粘红酵母菌感染[6]，在免疫正常人群中红酵母菌较其他念珠菌毒力相对较低，真正由于红酵母菌引起菌血症死亡人数较少[7]，本实验体外真菌药敏不难看出胶红酵母菌对氟康唑、棘白菌素类抗真菌药耐药，两性霉素B伊曲康唑、伏立康唑较敏感，与报道一致[8]，推荐首选两性霉素B，该患者用药7天，未出现发热，体温降至正常，由于费用较高，患者出院。传统培养镜检耗时长，能够利用质谱鉴定仪直接对真菌瓶中全血快速准确的鉴定尤为重要。