电感耦合等离子体质谱法测定硫辛酸注射液中6种杂质元素含量

李文莉 汪汝沛 徐燕

（四川省食品药品检验检测院，四川 成都 611731）

硫辛酸，是一种存在于生物线粒体中的辅酶。硫辛酸注射液可用于静脉注射或肌肉注射，临床上被广泛用于治疗糖尿病周围神经病变引起的感觉异常[1]。受原料药、辅料和生产工艺等方面的影响，硫辛酸注射液在生产过程中可能会带来杂质元素。

由于杂质元素不能为患者提供任何治疗效果，为了降低对人体的毒害作用，其含量要控制在可接受的范围内，因此必须建立严格的控制措施和标准[2], 依据人用药品注册技术要求国际协调会（International conference on harmonization of technical requirements for registration of pharmaceuticals for human use，ICH）Q3D元素杂质指导原则中对注射液的杂质元素进行了严格的要求[3]。目前，国内外常用的元素检测方法主要有:比色法、石墨炉原子吸收分光光度法、火焰原子吸收分光光度法、氢化物原子荧光光度法和电感耦合等离子体质谱法等[4]。本文采用电感耦合等离子体质谱法对硫辛酸注射液中砷（As）、铅（Pb）、镉（Cd）、铁（Fe）、钛（Ti）和锑（Sb）6种痕量杂质元素进行测定，建立了一种高效、准确的测量硫辛酸注射液中杂质元素的分析方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

THERMO ICAPQC电感耦合等离子体质谱；梅特勒XS204电子天平；CEM MARS微波消解仪；默克公司Advantage A10纯水仪。

1.1.2 标准溶液

砷（As）标准溶液（批号:211065073，1000μg·mL-1）、铅（Pb）标准溶液（批号:211035050）、镉（Cd）标准溶液（批号:211095083，1000μg·mL-1）、铁（Fe）标准溶液（批号:212015035，1000μg·mL-1），购于AccuStandard®；钛（Ti）标准溶液（批号:13538-1，1000μg·mL-1）、锑（Sb）标准溶液（批号:13560-1，1000μg·mL-1）购于国家有色金属及电子材料分析测试中心；内标溶液:铑（Rh）标准溶液（批号:122811，1000μg·mL-1）购于NSI Solutions incorporateol。

1.1.3 试剂

水为超纯水: 硝酸、过氧化氢为优级纯。

1.1.4 样品

硫辛酸注射液6批，由企业提供（13052214S、13052314S、13052414S、13052214S、13052215S、13052216S）。

1.2 方法

1.2.1 ICP-MS 工作条件

碰撞反应池（CCT）模式，经调谐液优化的工作参数:载气:氮气，进入透镜:-70伏特，偏转进入透镜:-35伏特，提取透镜1极性:0，提取透镜1负:0伏特，提取透镜1正:0伏特，雾室温度:2.7℃，蠕动泵转速:40 转·min-1，冷却气流量:14 L·min-1，采样深度:5 mm，辅助气流量:0.8 L·min-1，雾化气流量:1.02 L·min-1，矩管水平位置:0.13 mm，矩管垂直位置:0.6mm，提取透镜:2-200伏特，重复次数:3次。

1.2.2 标准曲线溶液的制备

分别精密量取As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb标准溶液1 mL，置同一100 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容后摇匀，精密量取上述溶液1 mL，用2%硝酸溶液定容至10mL，摇匀，得浓度为1000 μg·L-1的As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb的混合标准储备溶液。再分别精密量取混合标准储备溶液0.25，0.5，1.25，2.5，3.75 mL，分别至25 mL两瓶中，用2%硝酸溶液稀释并制成含As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb为10，20，50，100，150 μg·L-1的系列浓度标准曲线溶液。

1.2.3 内标溶液的制备

精密量取铑标准溶液1 mL，置100 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容后摇匀，再精密量取上述溶液1 mL置10 mL容量瓶中，用2%硝酸溶液定容至刻度，摇匀，再精密量取上述溶液0.25 mL，用2%硝酸溶液定容至25 mL，摇匀，即得10 μg·L-1的内标溶液。

1.2.4 供试品溶液的制备

取本品1 mL，置聚四氟乙烯消解罐内，加入硝酸10 mL，浸泡过夜，加入过氧化氢2 mL，盖好内盖，旋紧外套，置微波消解炉内，进行消解（消解功率:1600 W可调，升温程序:8 min升至120℃，保持15 min；7 min升至160℃，保持20 min，7 min升至185℃，保持25 min），冷却至室温，取消解内罐置加热器上160℃加热至酸液剩余1 mL左右，用2%硝酸溶液转移并定容至25 mL容量瓶中，过滤，作为供试品溶液。同时同法制备全试剂空白溶液。

1.2.5 测定法

以铑Rh（103）作内标，手动进样，在给定仪器条件下将上述标准系列溶液由蠕动泵进样分析，以As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb元素浓度（ppb）为横坐标，相应仪器响应值为纵坐标，绘制标准曲线；供试品溶液在同样条件下进样分析，自动扣除样品试剂空白后，从标准曲线上读出供试品溶液中As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb元素的浓度（ppb），并计算出样品中As、Pb、Cd、Fe、Ti、Sb的含量。待测同位数质量数见表1。

1.2.6 标准曲线与检出限

取标准曲线溶液进样测定，分别以各元素理论浓度（X，μg·L-1）为横坐标，对应浓度下各元素信号值（Y）（内标校正后结果）为纵坐标，绘制标准曲线，线性关系良好。取空白溶液连续测定11次，计算样品检出限，见表2。

表1 待测同位数质量数

表2 标准曲线与检出限

1.2.7 重复性试验

精密量取样品6份，分别加入1.25 mL混合标准储备液，按照“1.2.4”项下制备，进样分析，结果样品中As75、Pb208、Cd111、Fe56、Ti47、Ti48、Sb121元素平均含量分别为1.053，1.179，1.149，1.273，1.020，1.462，1.003 mg·L-1，RSD分别为1.2%，2.4%，1.5%，6.1%，2.2%，5.3%，2.2%（n=6），均小于10%，表明方法的重复性良好。

1.2.8 加样回收率试验

精密量取样品6份，分别加入1.25mL混合标准储备液进样分析，各元素的平回收率在80.3～112.2%之间，表明方法的准确度良好，结果见表3。

2 结果

9批硫辛酸注射液中元素杂质结果见表4，各批次样品中元素杂质含量均远小于限度值。

表3 回收率结果表

3 讨论

样品的前处理方法有湿法消解、干法消解、微波消解等。微波消解具有密闭、高压、时间短、消耗试剂少等优点，适用于该产品的前处理。

本实验采用微波消解样品，采用ICP-MS法测定了硫辛酸注射液中砷、铅、镉、铁、钛、锑6种元素的含量。采用碰撞反应池（CCT）模式测定消除了样品中可能存在的其他元素以及气体对测定的干扰。

本方法回收率良好，检出限低、灵敏度高，为硫辛酸注射液中砷、铅、镉、铁、钛、锑6种杂质元素含量的测定提供了可行的方法。

表4 样品测定结果表（μg·mL-1）