谢冬梅,黄勇华,刘运保,赖艳娥,喻红玲,张杰嫦,虢 娟,张松英,廖丽梅,龚嘉聪,梁伟文,林雪珍,邓凯航
清远市中心血站,广东清远 511518
随着人们生活方式和饮食结构的改变及餐后献血等原因,血站采集的血液中乳糜血越来越多,中华人民共和国国家标准GB 18469《全血及成分血质量要求》[1]对乳糜血浆制定了质量标准,血站也是按此标准来筛选乳糜血。目前我国供血不足的问题日益严峻,为了合理地利用乳糜血浆,研究者对不同乳糜指数(CI)新鲜冰冻血浆质量开展了研究,现报道如下。
1.1一般资料 2019年1—6月取得献血者知情同意,采集无偿献血者血液,采血后6 h以内分离血浆,收集新鲜冰冻血浆160袋,其中无乳糜血浆(CI≤1)20袋,不同CI血浆(CI为2、3、4、5、6、8及CI>8)各20袋,1 h内完成速冻,-18 ℃以下保存。
1.2仪器与试剂 CA-600全自动血凝仪由希森美康生物科技有限公司提供;CS-600B全自动生化分析仪由迪瑞医疗科技股份有限公司提供;BD BACTEC FX40全自动细菌培养系统由碧迪医疗器械(上海)有限公司提供;SEPAMATIC-SL(Ⅲ)全自动血液成分分离机由德国普特公司提供;因子Ⅷ活性测定试剂盒(凝固法)由希森美康生物科技有限公司提供,批号547668B;纤维蛋白原(Fg)由希森美康生物科技有限公司提供,批号R8051;活化部分凝血活酶时间由希森美康生物科技有限公司提供,批号R8035;氯化钙溶液由希森美康生物科技有限公司提供,批号R8026;缓冲液由希森美康生物科技有限公司提供,批号R8025;清洗液由希森美康生物科技有限公司提供,批号A8094;正常质控血浆由希森美康生物科技有限公司提供,批号507753;异常质控血浆由希森美康生物科技有限公司提供,批号556708C;血浆总蛋白(TP)试剂由迪瑞医疗科技股份有限公司提供,批号20180418;标准需氧瓶由碧迪医疗器械(上海)有限公司提供,批号8360578,仪器经检定合格。
1.3方法
1.3.1标本处理 取出新鲜冰冻血浆37 ℃水浴复融,混匀使乳糜层均匀分布,于生物安全柜内无菌操作,每袋抽取5 mL新鲜冰冻血浆接种至标准需氧瓶,同时进行留样,每袋留取2份标本(每份2 mL),一份用于血浆CI确定,另一份用于血浆凝血因子Ⅷ(FⅧ)、Fg、TP测定。
1.3.2检测方法 采用CA-600全自动血凝仪凝固法检测FⅧ、Fg(CI为4、5标本用生理盐水稀释2倍、CI为6、8及CI>8标本用生理盐水稀释4倍进行检测,以排除乳糜微粒的干扰)[2];采用CS-600B全自动生化分析仪双缩脲法检测TP;采用BD BACTEC FX40全自动细菌培养系统进行细菌培养。具体操作严格按照产品说明书进行。
1.3.3血浆CI和乳糜程度确定 按照文献[3]要求进行操作,以血浆的稀释倍数作为血浆CI,将乳糜程度定为无乳糜血浆(CI≤1)、轻度乳糜血浆(1
不同CI新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP、无菌试验检测结果显示,CI为5的新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP检测结果与无乳糜血浆比较,差异有统计学意义(t=7.201、2.651、4.989,P<0.05);CI为6的新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP检测结果与无乳糜血浆比较,差异有统计学意义(t=13.224、5.152、3.869,P<0.05);CI为8的新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP检测结果与无乳糜血浆比较,差异有统计学意义(t=11.672、3.888、7.407,P<0.05);CI>8的新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP检测结果与无乳糜血浆比较,差异有统计学意义(t=10.872、6.816、5.116,P<0.05),见表1。
表1 不同CI新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP、无菌试验检测结果分析(n=20)
乳糜微粒是人血浆中最大的脂蛋白颗粒,主要来源于食物脂肪,由小肠黏膜细胞合成,是机体转运膳食三酰甘油的主要形式,在肠黏膜细胞内把体内重新组装的三酰甘油与载脂蛋白结合,合成乳糜微粒,乳糜微粒仅于餐后在血液中出现,约维持30 min即被肌肉和脂肪组织中的脂蛋白脂肪酶迅速降解为三酰甘油及乳糜微粒残体,若因遗传因素或机体缺乏脂蛋白脂肪酶或某种载脂蛋白,血中乳糜微粒的清除发生障碍,使血清中三酰甘油显著升高,这种血清外观呈乳糜状,故通常称乳糜血。
随着人民生活水平的提高,无偿献血者中乳糜血人群比例很大,而乳糜浓度并不是献血初筛项目之一,因此本站采集到的不同CI乳糜血也逐年上升。临床上对乳糜血浆的使用顾虑有两个方面,一方面是乳糜血浆的质量与无乳糜血浆是否有区别,另一方面是乳糜血浆是否会引起输血不良反应。新鲜冰冻血浆适用于各种凝血因子缺乏引起的出血和需要补充血容量或血浆蛋白的疾病,如严重创伤、手术出血、大量输血、血浆交换、体外循环、弥散性血管内凝血、肝硬化、低蛋白血症、新生儿溶血病、血栓性血小板减少性紫癜等,以往有研究报道输血不良反应的原因分为溶血性输血反应和非溶血性输血反应,其中以非溶血性发热反应和过敏反应为最常见[4-12],但是这些输血不良反应均与乳糜微粒没有直接关系。
为了利用好宝贵的血液,有学者探讨低温倒置离心法去除血浆中的乳糜微粒[13-14],取得良好的效果。也有学者调研了乳糜血发生率在不同献血人群的分布,指导血液机构在招募献血者时采取相应对策,如征询献血者时认真、详细地询问献血者献血前饮食情况,做好招募前的宣传及献血前注意事项的告知工作,让献血者在献血前合理控制饮食等[15]。本研究对乳糜血浆本身的质量进行了研究,FⅧ、Fg、TP这3个指标是评价血浆功效性的关键指标,FⅧ、Fg主要用于出凝血疾病的止血;TP主要作用是营养功能、运输功能、保持血液pH的稳定、维持血浆胶体渗透压、参与机体的免疫功能、参与凝血和抗凝血功能等。本研究结果显示,CI为5、6、8及CI>8的新鲜冰冻血浆FⅧ、Fg、TP检测结果与无乳糜血浆比较,差异有统计学意义(P<0.05)。文献[1]对新鲜冰冻血浆要求是FⅧ≥0.7 IU/mL,TP≥50 g/L,无菌生长,对新鲜冰冻血浆Fg没有做出要求。FⅧ、TP、无菌试验在CI<5的均能达到文献[1]要求。
综上所述,CI<5的新鲜冰冻血浆质量是有保证的,临床上可以正常使用,本站按此标准供应的血液,没有收到任何关于乳糜血的投诉及因乳糜血引起的输血不良反应的反馈。血站应把好乳糜血浆质量关,采取有效方法对血浆CI做出准确判断,保证临床用血的安全性、有效性。