蒲地蓝消炎口服液联合干扰素对肠道病毒71型感染致手足口病患儿病情进展和血清角蛋白18裂解片段M30及全长片段M65的影响

黄振红，赵保玲，王 芳

(郑州大学附属儿童医院感染性疾病科，郑州 450000)

手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)多发生于儿童，主要通过呼吸道、消化道及亲密接触等途径进行传播，属于常见的肠道病毒性感染疾病，其主要病毒包括肠道病毒71型(Enterovirus 71，EV71)。该病主要特点为感染性强、传播快，临床症状为手、足、口腔等部位的疱疹、皮疹，少数严重患者还可能出现肺水肿、脑脊髓炎、微循环障碍等，且预后差[1-3]。有相关研究显示[4]，HFMD与肝功能异常、心肌异常及免疫功能紊乱有关。目前，HFMD的主要治疗措施是对症治疗，且无特效药[5]。近些年，蒲地蓝消炎口服液治疗HFMD取得较好的疗效[6]。因此，本院在干扰素基础上联用蒲地蓝消炎口服液治疗EV71感染致HFMD的患儿，观察两种药物联合使用对患儿临床疗效、肝功能、血清角蛋白18(cytokeratin 18，CK18)裂解片段M30(CK18-M30)和全长片段M65(CK18-M65)水平的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年5月～2018年10月本院收治的260例HFMD患儿的临床资料及随访资料，将其分为对照组(n=130)和观察组(n=130)。对照组：男性63例，女性67例；年龄 1～5岁，平均年龄(2.28±1.21)岁。观察组：男性66例，女性64例；年龄1～6岁，平均年龄(3.54±2.02)岁。两组年龄、性别等一般资料无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。本研究已通过医学伦理委员会的批准。

纳入标准：① 符合《手足口病诊疗指南(2010年版)》对HFMD的诊断标准者。② 病原学确认EV71感染致HFMD者。③ 出疹期者。④ 自愿参加本研究并签署知情同意书者。

排除标准：① 对本研究药物过敏者。② 病程大于3天者。③ 依从性差者。④ 伴有心、肝、肾或肺等脏器严重功能不全者。

1.2 治疗方法

两组患者需根据相关临床症状进行补液、抗感染、退热等预防处理。对照组：采用重组人干扰素α2b喷雾剂(假单胞菌)[天津未名生物医药有限公司，国药准字S20030028，规格：10 ml/支]涂于疱疹处，每一疱疹处喷1～2次，tid。观察组：在对照组基础上加用蒲地蓝消炎口服液(济川药业集团有限公司，国药准字Z20030095；规格：每支装10 ml)，患儿6个月～1岁，口服5 ml，tid；患儿1～3岁，口服10 ml，bid；患儿4～6岁，口服10 ml，tid。

1.3 观察指标

1.3.1临床疗效

显效：治疗5天内，患儿手足皮疹、口腔溃疡消失，体温达到正常，未发生不良反应；有效：治疗5天内，患儿手足皮疹、口腔溃疡明显减少，体温达到正常，未发生不良反应；无效：治疗5天内，患儿手足皮疹、口腔溃疡未得到缓解，甚至加重，体温未恢复正常，或出现心肺功能衰竭、神经系统受累等不良反应[7]。总有效率=显效率+有效率。

1.3.2临床症状消退时间

记录两组患儿临床症状消退时间，包括皮疹、溃疡消退时间、发热消退时间、痊愈时间。

1.3.3心肌酶谱、CRP、ALT、CK18-M30、CK18-M65水平

抽取患儿外周静脉血4 ml，放于EDTA抗凝管内，静置30 min，1000 r/min离心15 min，取上清液放置-20 ℃冰箱待测：① 使用PA-600特定蛋白分析仪及配套试剂检测C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)。② 使用日立7600全自动生化分析仪测定心肌酶谱[磷酸肌酸激酶同工酶(myocardial zym ogram，CK-MB)、磷酸肌酸激酶(creatine phosphokinase，CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)]、肝功能[丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)]、CK18-M30、CK18-M65水平。试剂盒由上海闪谱生物科技有限公司提供。按照试剂盒说明书对血清CK-MB、CK、LDH、ALT、CK18-M30、CK18-M65水平进行检测。

1.3.4不良反应

统计两组患儿用药期间不良反应发生率，包括腹泻、胃肠道反应、皮肤过敏。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 临床疗效

对照组与观察组临床总有效率分别为79.23%和95.38%(P<0.05)。见表1。

表1 两组临床疗效比较 n=130，n(%)

2.2 临床症状消退时间

观察组临床症状消退时间均短于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组临床症状消退时间比较 天

2.3 心肌酶谱、ALT及CRP水平变化

治疗前，两组心肌酶谱(CK、LDH、CK-MB)、ALT及CRP水平无统计学差异(P>0.05)。与治疗前相比，两组治疗后CK、LDH、CK-MB、ALT、CRP水平均有所降低，且观察组降低程度大于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 两组治疗前和治疗后心肌酶谱、ALT及CRP水平变化比较

2.4 血清CK18-M30、CK18-M65水平变化

治疗前，两组CK18-M30、CK18-M65水平无统计学差异(P>0.05)。与治疗前相比，两组治疗后CK18-M30、CK18-M65水平均有所降低，且观察组降低程度大于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 两组治疗前和治疗后血清CK18-M30、CK18-M65水平变化比较

2.5 不良反应

对照组与观察组不良反应发生率分别为21.54%和11.54%(P<0.05)。见表5。

表5 两组治疗期间不良反应比较 n=130，n(%)

3 讨论

儿童感染HFMD的病毒有20多种，其中以Cox A16、EV71为主，具有较强的传染性。病毒从呼吸道进入，直达消化道，可在呼吸道及消化道的局部黏膜上进行增殖，也可根据血液扩散至全身多个器官，严重时可损害患儿心肌及中枢神经系统，引发神经源性肺水肿等严重不良反应[8-9]。

蒲地蓝消炎口服液主要成分为板蓝根、黄芩、蒲公英、苦地丁。板蓝根含有β-谷甾醇、靛苷，蒲公英含有豆甾醇、甾醇等，可抑制细菌、病毒；黄芩含有黄芩苷元等，除能抑制细菌、病毒外，还能消炎、解热、抗过敏[10-12]。干扰素主要利用DNA重组技术生成水溶性蛋白质，使特殊膜受体与细胞表面结合，从而抑制感染病毒细胞的复制[13]。同时，干扰素还可提高K和T细胞的活性物质，诱导产生淋巴细胞，抑制病毒，提高患儿免疫力及机体抗病毒能力，促进患儿尽早恢复健康[14]。

肝功能异常是HFMD常见的不良反应，通过坏死肝细胞分泌酶，来反映肝功能异常，同时可通过肝功能异常程度来判断患儿病情严重程度[15]。在本研究中，两组治疗后ALT水平均有所降低，且观察组降低程度大于对照组(P<0.05)，说明联合治疗能有效改善肝功能。CRP属于肝脏合成的急性时相蛋白，能加大组织损伤程度，诱导淋巴、单核细胞功能紊乱，与炎症反应程度具有一致性[16-17]。CK、LDH、CK-MB是临床中使用较多的心肌酶谱指标，当患儿心肌细胞受到破坏时，心肌酶会流入血液中，造成心肌酶谱各指标增加。因此，心肌酶谱是提示心肌损伤严重程度的重要指标之一[18]。在本研究中，两组治疗后CK、LDH、CK-MB、CRP水平均有所降低，且观察组降低程度大于对照组(P<0.05)，说明联合治疗能有效改善患儿心肌功能，减少炎症反应，抑制CRP释放。

CK18位于染色体12q13位置上，是构成细胞骨架的重要结构蛋白，属于细胞角蛋白家族。坏死肝细胞释放的完整CK18蛋白或新表位蛋白片段被称为CK18-M65片段，是反映细胞总体死亡水平、肝细胞凋亡或坏死的重要标志之一[19-20]。当CK18在特定点被剪切时，会暴露凋亡特异抗原点位Asp396，含有该表位的CK18片段被称为CK18-M30片段，是标志肝细胞凋亡的重要指标之一[21]。相关研究显示[22]，CK18-M30、CK18-M65表达水平与HFMD病程程度具有一定关系，随着病程严重程度增加，CK18-M30、CK18-M65水平增加。这说明CK18-M30、CK18-M65表达可作为检测HFMD严重程度的重要方法之一。在本研究中，与治疗前相比，两组治疗后CK18-M30、CK18-M65水平均有所降低，且观察组降低程度大于对照组(P<0.05)，说明联合治疗能有效降低血清CK18-M30、CK18-M65水平，缓解病情严重程度。对照组与观察组不良反应发生率分别为21.54%和11.54%(P<0.05)，说明联合治疗能有效降低不良反应发生率。

综上所述，蒲地蓝消炎口服液联合干扰素治疗EV71感染致HFMD患儿，能有效提高临床疗效，减轻患儿肝功能损害，增强患儿免疫功能，减少心肌损伤，降低血清CK18-M30、CK18-M65水平，抑制炎症反应，减少不良反应发生率，值得临床进一步推广。