住院患者红细胞血型不规则抗体特点调查

2020-11-30 04:35陈碧乐蔡雪娇叶银才林双女卓盛林谢作听
温州医科大学学报 2020年11期
关键词:血型盐水试管

陈碧乐,蔡雪娇,叶银才,林双女,卓盛林,谢作听

(1.温州医科大学附属第一医院 输血科,浙江 温州 325015;2.永嘉县人民医院 输血科,浙江 温州 325100)

红细胞血型不规则抗体是指ABO血型系统以外的血型抗体[1],可引起免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病、血型鉴定和交叉配血困难、血液输注无效等[2-4],故对住院患者开展红细胞血型不规则抗体检测分析具有重要的临床意义。为了解住院患者的红细胞血型不规则抗体的表现特点,对其阳性率、分布特点、特异性及其免疫球蛋白类型等进行综合调查分析。

1 对象和方法

1.1 对象 收集温州医科大学附属第一医院2017年11月至2019年10月期间所有住院患者共287 030例,其中男138 723,女148 307例,筛选到不规则抗体阳性患者共834例,其中男276例,女558例,年龄(54.0±28.5)岁;女性中仅妊娠史而无输血史有403例,既有输血史又有妊娠史有108例,仅有输血史 而无妊娠史有30例,既无输血史又无妊娠史有17例。

1.2 仪器与试剂 IH-1000全自动血型鉴定仪、IDIncubator恒温孵育箱、ID-Centrifuge 12 S II凝胶卡专用离心机(美国BIO-RAD公司);专用离心机(上海寰熙医疗器械有限公司);Olympus普通光学显微镜(日本欧林巴斯公司)。微柱凝胶卡(瑞士DiaMed公司)、不规则抗体筛选试剂(江苏力博医药生物技术股份有限公司)、不规则抗体特异性鉴定谱细胞(匈牙利REAGENS Kft公司)、两种抗-D试剂(IgG+IgM分别来自英国Millipore公司、加拿大 Dominion Biologicals Limited公司),抗-D(IgG)试剂(北京金豪制药股份有限公司)、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-M、抗-N、抗-P试剂、抗-S(上海血液生物医药有限责任公司);抗-H试剂(德国GmbH公司);2-me试剂(中国医药集团上海化学试剂公司)。

1.3 方法

1.3.1 红细胞血型不规则抗体筛查:检测方法选用微柱凝胶抗人球蛋白法,检测手段采用全自动血型分析仪。所有患者血标本均采用EDTA-K2抗凝,检测前离心条件均为1 000×g离心3 min,所有检测均在收到标本后3 h内完成,具体操作严格按照全自动仪器使用说明和本室操作规程执行。判断标准:若I、II、III筛选细胞结果全阴性,判为未检到红细胞血型不规则抗体;若I、II、III筛选细胞中有1种以上细胞出现阳性结果且自身对照试验阴性,判为检到红细胞血型不规则抗体。

1.3.2 红细胞血型不规则抗体免疫球蛋白类型的确定:上述红细胞血型不规则抗体阳性的标本分别采用室温盐水介质试管法、2-me裂解-室温盐水介质试管法确定其抗体免疫球蛋白类型,具体操作严格按照本室操作规程。纳入标准:①若自身对照阴性,而室温盐水介质试管法抗体筛查试验出现阳性格局,且血浆经0.2 mL 2-me裂解处理后室温盐水试管法抗体筛查试验不再出现阳性格局,则判阳性抗体为IgM类红细胞血型不规则抗体;②若自身对照阴性,室温盐水介质试管法抗体筛查结果阴性,则判阳性抗体为IgG类红细胞血型不规则抗体;③若自身对照阴性,而室温盐水介质试管法出现阳性格局,且血浆经0.2 mL 2-me处理后室温盐水介质试管法仍出现阳性格局,则判阳性抗体为红细胞血型IgM类合并IgG类不规则抗体。

1.3.3 红细胞血型不规则抗体阳性标本的抗体特异性鉴定:①IgM类不规则抗体特异性鉴定:采用室温盐水介质试管法;②IgG类不规则抗体特异性鉴定:采用微柱凝胶抗人球蛋白法。判断标准:①若抗体反应格局符合谱细胞其中一种或几种抗原组合格局时,则判为检到有明确抗体特异性的不规则抗体;②若反应格局不符合谱细胞其中一种或所有抗原组合格局或所有谱细胞均出现阳性或阴性结果时,则判为检到无法确定特异性的不规则抗体。

1.4 统计学处理方法 采用SPSS22.0软件对数据进行统计分析。计数资料用例数或百分率表述,计量资料正态分布用±s表示,偏态分布采用M(P25,P75)表示,2组间率的比较用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 红细胞血型不规则抗体阳性率 287 030例住院患者中共有834例患者检测到红细胞血型不规则抗体,总阳性率为0.29%,其中男性患者抗体阳性率为0.20%;女性患者为0.38%,2组间比较差异有统计学意义(χ2=77.763,P<0.05)。

2.2 红细胞血型不规则抗体阳性标本的性别构成比 834例红细胞血型不规则抗体阳性标本中女性患者抗体阳性构成比为66.99%(558/834),男性患者为33.01%(276/834)。

2.3 女性患者红细胞血型不规则抗体阳性构成比 从大到小依次为:仅有妊娠史患者[72.22%(403/ 558)]>既有输血史又有妊娠史患者[19.35%(108/ 558)]>仅输血史患者[5.38%(30/558)]>既无输血史又无妊娠史患者[3.05%(17/558)]。

2.4 红细胞血型不规则抗体阳性标本的抗体特异性 834例不规则抗体中能明确抗体特异性的有457例(占54.80%),其中Rh系统有294例,以抗-E数量最多,共230例;MNS血型系统(主要指M、N、S三种抗 原)99例,其中抗-M 90例;Lewis系统28例;Kell系统5例;Diego系统4例;抗-H或抗-HI 5例;P系统3例;Duffy系统2例;Kidd系统2例;Lutheran系统1例;混合抗体14例;无特异性抗体377例,见表1。

2.5 红细胞血型不规则抗体免疫球蛋白类型 834例抗体中单纯IgG类抗体632例(占72.90%);单纯IgM类100例(占11.75%);IgG类合并IgM类102例(占12.23%)。

3 讨论

本调查研究获得的红细胞血型不规则抗体总阳性率为0.29%,接近或稍低于国内相关报道[5-6]。其中男性患者抗体阳性率为0.20%,女性患者抗体阳性率为0.38%,阳性率接近国内文献报道[7-8],提示女性患者的红细胞血型抗原暴露机会可能高于男性。本研究住院患者中不规则抗体分布特点为:①女性患者抗体阳性构成比为66.99%,男性患者抗体阳性构成比为33.01%;②女性患者抗体阳性构成比从大到小依次为:仅有妊娠史患者>既有输血史又有妊娠史患者>仅输血史患者>既无输血史又无妊娠史患者,提示妊娠与输血是诱导红细胞血型不规则抗体产生的重要因素。

不规则抗体免疫球蛋白类型为:IgG类、IgM类,但以IgG类抗体为主,提示临床实验室交叉配血时不能仅采用盐水介质法以免造成IgG类抗体的漏检。

表1 834例红细胞血型不规则抗体阳性标本的抗体特异性

不规则抗体特异性表现特点为:以Rh血型系统抗体为主,其中抗-E占比最高,接近国内相关文献报道[9-10];抗-D占比次之,比较接近国内相关文献报道[11-12],且绝大多数抗-D患者为妊娠二胎或以上的女性或新生儿,因此建议对尚未产生免疫性抗-D的Rh阴性妊娠女性注射抗-D免疫球蛋白来封闭进入母体的胎儿红细胞上的RhD抗原,以防止后者刺激母体产生免疫性抗-D并导致RhD阳性新生儿溶血病的发生;抗-c占比>抗-e>抗-C,且可表现为单一抗体、混合抗体或复合抗体等诸多形式。另外,本调查研究还发现抗-Cw、抗-Lua、抗-Fyb、抗-Dia、抗-K、 抗-Kpa、抗-Jka、抗H等稀有血型抗体各数例,其中抗-Cw是Rh血型系统Cw抗原的抗体,国外有研究报道认为Cw是RHCE基因单个点突变引起[13],其IgG类抗体是引起新生儿溶血的Rh系统抗体之一[14]。关于抗-Cw,目前国内鲜见报道。需要特别指出的是,本研究中834例红细胞血型不规则抗体中有377例无法确定抗体特异性,占比达到45.20%,略高于文献报道[15-16],推测其原因可能有:①存在联合或复合抗体,从而干扰特异性的最终确定;②存在抗原剂量效应致部分杂合子红细胞出现假阴性结果而干扰抗体特异性的最终确定[1];③不同厂家的谱细胞抗原设计合理性有所差异;④单套谱细胞的鉴定能力有限。

目前国内红细胞血型不规则抗体常规检测方法多为微柱凝胶抗人球蛋白法,但因该法对IgG类温抗体相对敏感,而对IgM类冷抗体不太敏感,容易造成IgM类冷抗体的漏检。本调查研究发现住院患者不规则抗体的免疫球蛋白类型以IgG类温抗体为主,但在37 ℃反应条件下IgM类抗体阳性构成比仍占到23.98%,提示临床实验室有必要采取措施减少IgM类冷抗体的漏检。

综上所述,本研究住院患者中红细胞血型不规则抗体阳性患者以有妊娠史的女性患者为主,且不规则抗体特异性以IgG类Rh血型系统抗体最为常见,故临床有必要考虑对供受者常规开展Rh血型系统D、E、C、c、e五种抗原检测并实行抗原相合性输血。另外,IgM类冷抗体的漏检问题也应引起临床实验室的重视。

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