痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血单核细胞Toll样受体及下游细胞因子的影响

冯海先，张玉凤，王承楠

(1 呼和浩特市蒙医中医医院药剂科，呼和浩特 010010；2 呼和浩特市蒙医中医医院内科，呼和浩特 010010)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)属于一类常见的呼吸系统疾病，其病程较长，且易反复发作[1]。吸烟是发病的主要原因，烟龄较长者支气管的上皮纤毛会缩短，且形态会变得无规则，进而使纤毛运动出现障碍，局部抵抗能力下降，肺泡吞噬细胞功能与灭菌效果削弱，部分患者可出现支气管痉挛，气道阻力大幅度增加[2]。尤其是慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)，在此期间，COPD的发作具备气流受限且无法逆转的特性，严重者可危及生命，亟待采取科学有效的治疗[3-4]。临床以往治疗多选择抗生素及止咳化痰药物，但效果欠佳。本研究探讨常规对症治疗联合痰热清注射液对AECOPD的疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年1月～2019年12月本院收治的66例AECOPD患者进行研究，根据分层随机化原则将患者分成对照组和观察组，每组33例。对照组：男性18例，女性15例；年龄42～78岁，平均年龄(52.89±4.51)岁；病程0.1～20年，平均病程(12.58±3.47)年。观察组：男性19例，女性14例；年龄44～79岁，平均年龄(53.50±4.30)岁；病程0.1～19年，平均病程(12.60±3.44)岁。两组一般资料无统计学差异(P>0.05)，组间可以进行分析比较。本研究治疗过程符合医学伦理学标准，并经本院医学伦理委员会批准(审批号：20170212)。

纳入标准：① 均经过临床检查确诊为COPD，且处在急性加重期者[5]。② 年龄20～80岁者。③ 能配合完成研究者。④ 取得患者及其家属知情同意并签署有关书面说明者。

排除标准：① 合并消化道出血、脑出血者。② 急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)Ⅲ期或需要肾脏替代治疗者。③ 严重的胃肠功能障碍者。④ 其他部位存在感染者。⑤ 对本研究所用药物过敏者。⑥ 存在精神类疾病者。⑦ 依从性差或治疗中不能坚持者。

1.2 治疗方法

所有患者入院后均予以止咳、平喘、化痰以及吸氧等常规治疗。

对照组予以2 L/min低流量氧气吸入，给予注射用氨溴索(天津药物研究院药业有限责任公司，国药准字H20041473，规格：15 mg)，将30 mg注射用氨溴索加入100 ml 0.9%氯化钠溶液中静脉滴注，bid；氨茶碱注射液(太极西南药业股份有限公司，国药准字H50021920，规格：0.1 g)，0.1～0.3 g/次。7天为1个疗程，持续治疗2个疗程。用药期间加强观察患者是否出现不良反应。

观察组在对照组基础上加用痰热清注射液(上海凯宝药业股份有限公司，国药准字Z20030054，规格：10 ml/支)，其中药成分包括连翘、金银花、山羊角、熊胆粉、黄芩，取20 ml痰热清注射液加入5%葡萄糖溶液共250 ml中，充分摇匀后静脉滴注，qd，7天为1个疗程，用药期间加强观察患者是否出现不良反应，2个疗程后评价疗效。

1.3 观察指标

1.3.1疗效

依据临床疗效标准，显效：患者咳、喘、痰症状较急性发作期明显改善，实验室指标均明显改善；有效：咳、喘、痰症状减轻，实验室指标改善；无效：咳、喘、痰症状无改善，甚至逐渐加重，实验室指标未改善甚至加重[6]。总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。

1.3.2肺功能指标

由院内专业医师采用峰流速仪[春妙(上海)医疗器械有限公司]测定两组患者呼气流量峰值(PEF)，采用MasterScreen PET肺功能仪(德国Jaerer公司)测量两组患者第1秒用力呼气容积(FEV1)，均重复检测3次，每次检测间隔10 min，保证误差低于5%。

1.3.3外周血单核细胞Toll样受体(TLRs)家族Toll样受体4(TLR4)阳性百分率

对比治疗前和治疗后细胞TLR4阳性百分率。无菌条件下取患者及正常人外周静脉血2 ml立即注入2 ml乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)管中备用。从中取抗凝血50 μl加入流式测定管中，根据试验要求加入抗人Toll样受体4(anti-human TLR4)和抗人白细胞分化抗原14(anti-human CD14)，分别用异硫氰酸荧光素(FITC)和藻红蛋白(PE)染色标记 20 min 后，用溶血素裂解红细胞 10 min，以1500 r/min离心(半径15 cm水平转子)7 min，弃上清，加磷酸盐缓冲液5 ml洗2遍，弃上清，加入磷酸盐缓冲液，采用FACS Aria型流式细胞仪(美国BD公司)检测单参数。

1.3.4下游细胞因子水平

采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)水平，收集患者空腹晨血，血液在室温下自然凝固10～20 min，离心20 min左右(2000～3000 r/min)。收集上清，使用相应的检测试剂盒(DPC公司)进行检测。

1.3.5安全性评价

所有患者接受血常规、肝肾功能、心电图等检查，统计两组用药期间不良反应发生率。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 疗效

治疗2个疗程后，观察组治疗总有效率(87.88%)高于对照组(63.64%)，有统计学差异(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者治疗后的临床疗效比较n=33，n(%)

2.2 TLRs家族TLR4阳性百分率和下游细胞因子水平

治疗前，两组TLR4、TNF-α、IL-8、IL-17水平无统计学差异(P>0.05)。疗程结束后，两组患者各项指标均较治疗前有所降低，且观察组各项指标下降幅度大于对照组，有统计学差异(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者治疗前和治疗后外周血单核细胞TLR4阳性百分率及下游细胞因子水平比较

2.3 肺功能指标

治疗前，组间对比无统计学差异(P>0.05)。治疗后，观察组PEF和FEV1两项指标较治疗前有所好转，且优于对照组，有统计学差异(P<0.05)。见表3。

表3 两组患者治疗前和治疗后肺功能指标变化比较

2.4 不良反应发生率

用药期间，两组不良反应发生率无统计学差异(P=0.817)。见表4。

表4 两组患者治疗期间不良反应发生率比较 n=33，n(%)

3 讨论

COPD的发病率日渐攀升，尤其AECOPD出现反复急性发作和病情加重，其痰液会呈现脓性状态，部分患者可伴随发热等炎症反应，严重者可导致呼吸衰竭甚至死亡等，治疗时具有一定难度，对患者生命安全产生严重威胁[7]。

中医认为COPD属“痰饮”“喘证”“咳嗽”等范畴，治疗需遵循温补阳气为原则[8]。本研究采用痰热清注射液进行治疗，结果显示：观察组的治疗效果更佳，且观察组TLR4、TNF-α、IL-8、IL-17治疗前和治疗后各项指标差值更大，改善程度大于对照组。TLR4是TLRs家族成员之一，也是脂多糖重要的模式识别受体，存在于单核吞噬细胞表面，在介导脂多糖引起的单核-吞噬细胞活化和释放多种前炎症因子中起重要作用，也是目前研究较热的天然免疫因子[9]。TNF-α是巨噬细胞释放的炎症因子，在参与阻止病原菌早期炎症反应过程中，发挥灭菌、消炎的作用；在控制体内结核分枝杆菌过程中，TNF-α可能参与结核分枝杆菌的免疫病理过程，造成机体相关组织的损害[10]。IL-17、IL-8是一组重要的免疫活性因子，参与机体的免疫调节，可以引起一连串的炎症介质，对身体产生炎性损伤，还可以反映体内细胞免疫的不平衡[11]。

联用痰热清注射液能够改善AECOPD的炎症反应，主要是由于痰热清注射液包含较多抑菌抗菌以及解毒清热的中药组方，并利用现代中药提取技术加工而成，有着疗效稳定和质量均一等优点，其中黄芩、连翘及金银花是抑菌抗菌和清热解毒之良药；山羊角、熊胆粉起着抗惊厥与降热等效果[12]。且该方具有较多抗生素不具备的抑制病毒作用，可增强机体防御功能，使血氧饱和度升高，不仅能缓解 AECOPD 患者憋喘症状，同时对炎症吸收和白细胞吞噬功能具有促进作用[13]。另外，肺功能是监测COPD患者病情发展的重要指标。

AECOPD患者通常伴随着FEV1/FVC及PEF水平下降，呼吸功能减弱[14]。本研究采用不同药物治疗后，观察组PEF和FEV1两项指标较治疗前有所好转，且优于对照组(P<0.05)，提示在常规对症治疗基础上加用痰热清注射液有助于改善患者的整体肺功能，可能是与痰热清注射液能降低血清炎症因子，改善血气分析指标有关。痰热清注射液由黄芩、熊胆粉、山羊角、金银花和连翘组成，黄芩味苦、性寒，具有清热燥湿、泻火解毒之功效；熊胆粉药性与熊胆相似，味苦、性寒，药理试验证明熊胆有解惊、解毒、抑菌、镇咳、祛痰、平喘等作用[15-16]。两者共为君药。山羊角药性与羚羊角相似，味苦咸、性寒，具有平肝息风、清热解毒等作用；金银花味甘、性寒，有清热解毒、宣肺化痰之功。两药合用可加强本方清热解毒化痰之功，共为臣药。连翘味苦、性微寒，本方取其清热宣透作用，又可引诸药入肺经而为佐使药。全方共奏清热解毒、化痰之功效。同时痰热清注射液还具有良好的安全性。

综上，在AECOPD的常规对症治疗基础上加用痰热清注射液效果更佳，主要通过抑制下游细胞因子的释放来发挥药效，值得在临床推广。