■张 鑫 封伟杰 王玉璘 丁 毅 郭耀棋
(辽宁禾丰牧业股份有限公司,辽宁沈阳110866)
近年来,抗生素的过量使用和滥用,导致抗生素在动物体内、畜产品中残留,产生抗药性,对动物和人类健康造成危害。2020 年饲料中将全面禁止抗生素的使用,寻找抗生素替代物迫在眉睫。并且我国蛋白资源短缺,充分利用工业废弃物的饲用价值,能缓解环境污染和饲料资源紧缺,对畜牧业的可持续发展起到重要的作用。近年来研究表明,酵母培养物在猪、家禽和反刍动物都有积极的效果[1-3]。酿酒酵母发酵白酒糟是以鲜白酒糟为基质,经酿酒酵母固态发酵、培养增殖并自溶后,经低温干燥、粉碎、包装等工序制成的一种新型的酵母培养物,在蛋鸡上的应用研究少有报道。本试验旨在研究不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对蛋鸡生产性能、蛋品质、粪便菌群微生物的影响,确定最适添加量,为酿酒酵母发酵白酒糟在蛋鸡上的应用提供理论基础。
试验用酿酒酵母发酵白酒糟由路德生物环保技术(古蔺)有限公司提供,主要是酵母胞外代谢产物、酵母自溶破壁的内容物、有益菌、酵母细胞壁多糖、发酵培养基等,实测值容重717 g/l,水分9.70%,粗蛋白23.03%,粗脂肪7.30%,粗灰分8.90%,粗纤维13.30%。
选取体重接近,健康状态良好的419日龄海兰褐蛋鸡864 只,随机分成3 组,每组6 个重复,每个重复48只。对照组饲喂基础饲粮,其参照海兰褐蛋鸡产蛋期营养需要配制配合饲料,2个试验组分别添加1%和2%酿酒酵母发酵白酒糟,试验饲粮组成及营养水平见表1。试验前预饲期2周,正式试验期8周,试验鸡自由采食,自由饮水,试验期间按照常规操作进行管理。
表1 饲粮组成及营养水平(风干基础)
1.3.1 生产性能指标
每天记录产蛋枚数、破蛋数、鸡只数,以重复为单位称量鸡蛋重量。
产蛋率(%)=产蛋数/鸡只数×100
平均蛋重(g)=总蛋重/产蛋数
产蛋量[g/(只·d)]=每天每个重复总蛋重/鸡只数
每个重复选择12只鸡,每组84只鸡称重,称量初始体重和结束体重,在试验开始前1 d 和试验结束当天16:00~17:00 进行,初始重保证试验鸡体重在平均值的±10%以内。
1.3.2 蛋壳颜色评分
在试验15、30、50 d 每个重复评定20 枚鸡蛋,每组120 枚鸡蛋。采用海兰褐手册蛋壳颜色评分标准110、100、90、80 分和70 分,颜色从深到浅5 个等级。
1.3.3 蛋品质检测
在试验50 d 每个重复随机取20 枚鸡蛋,进行蛋品质检测。ETG-1061 蛋壳厚度检测仪检测蛋壳厚度,FESTV2.0 蛋壳强度计检测蛋壳强度,EMT-7300多功能蛋品分析仪检测哈夫单位、卵白高度、卵黄颜色,随后分离卵黄并称重。
卵黄比例(%)=卵黄重/蛋重×100
1.3.4 粪便状态评价
试验第7、14、21、28、45 d 观察粪便成型状态,每个重复用接粪板收集粪便,观察5 个点,四个角和中间,每个观察点界定20 cm×20 cm 的区域,对新鲜粪便进行评分。对小肠粪便评分,盲肠粪便不评分,评分标准采用4 分制。1 分为硬质粪便,粪便可以拿起在手中滚动;2分为粪便成型,但粪便里面是潮湿状;3分为稀粪;4分为水样便。
1.3.5 粪便菌群微生物
在试验58 d放置收粪板,每个重复随机收集新鲜粪便,装入无菌自封袋密封,立即放入冷藏箱运送到实验室-40 ℃保存,并尽快检测。每个样品取3 个平行样,各3 g,混匀悬浮于无菌稀释液中,10 倍梯度稀释至适宜浓度后,取0.1 ml稀释样液和培养基加入平板,37 ℃培养后计数。活菌计数方法参考GB/T 13093、GB/T 18869、Q/FMSW.006-2016 执行。用LB琼脂培养基检测芽孢杆菌,用MRS 培养基检测乳酸菌,用伊红美蓝(EMB)琼脂培养基检大肠杆菌测,用DHL琼脂培养基检测沙门氏菌。
试验数据先通过Excel 进行统计整理后,使用SPSS19.0 统计软件进行单因子方差分析(one-way ANOVA),显著性检验采用Duncan's 法多重比较,试验数据用“平均值±标准差”表示,P<0.05 表示差异显著,P>0.05表示差异不显著。
表2 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对蛋鸡生产性能的影响
表2可以看出,各个阶段各组产蛋率差异不显著(P>0.05),1~4周产蛋率试验组分别比对照组高2.17%和2.03%,5~8周产蛋率试验组分别比对照组高0.93%和0.77%,全程试验组比对照组分别高1.55%和0.77%。蛋重、产蛋量各个阶段各组之间差异不显著(P>0.05),但1~8周添加YCDG组产蛋量有提高趋势。1~4周1%和2% YCDG 组采食量显著高于对照组(P<0.05),5~8 周2% YCDG 采食量显著高于1% YCDG 和对照组(P<0.05),全程各组之间采食量均差异显著(P<0.05),试验组采食量高于对照组。料蛋比各组之间差异不显著(P>0.05),5~8周1%和2% YCDG组分别比对照组低1.44%和0.47%,试验全程试验组增均比对照组低0.47%。
表3 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对蛋鸡体重的影响(g)
从表3可以看出,开始体重和试验末体重各组之间差异不显著(P>0.05),对照组体重增重最多,其次是2% YCDG组,1% YCDG组增重最少。
表4 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对蛋品质的影响
表5 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对蛋壳颜色的影响
从表4可以看出,蛋品质检测各组之间差异均不显著(P>0.05),蛋壳厚度、蛋壳强度、哈夫单位、卵白高度、卵黄比例试验组有增高趋势,1%和2% YCDG 组蛋壳强度比对照组高5.56%和5.30%,哈夫单位分别比对照组高0.45%和0.80%。
综合3 次蛋壳颜色评分,2% YCDG 组蛋壳颜色优于其他组,110+100分占比较多,70分占比最少。
从表6可以看出,五次粪便评各组之间差异不显著(P>0.05),综合看1% YCDG组和2% YCDG组粪便状态优于对照组,1% YCDG组粪便状态最佳。
表6 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对粪便状态的影响
表7 不同水平酿酒酵母发酵白酒糟对粪便菌群微生物的影响(log10 CFU/g)
从表7 可以看出,2% YCDG 组乳酸杆菌显著高于对照组和1% YCDG 组(P<0.05),沙门氏菌对照组显著高于两个试验组(P<0.05),2% YCDG 组显著高于1% YCDG组(P<0.05)。粪便中大肠杆菌和芽孢杆菌差异不显著(P>0.05),但试验组粪便中大肠杆菌低于对照组,分别低12.48%和3.72%。
酿酒酵母发酵白酒糟是酵母胞外代谢产物、酵母自溶破壁的内容物、有益菌、酵母细胞壁多糖、发酵培养基等,富含蛋白质、小肽、氨基酸、有机酸、消化酶、酵母细胞壁多糖、寡糖、B族维生素、核酸、核苷酸、微量元素等未知的营养成分,这些营养物质有促进蛋鸡生产性能的作用[4-5]。马友彪等[6]研究添加白酒糟酵母培养物有提高产蛋率和平均日采食量的趋势,添加1%白酒糟酵母培养物组产蛋鸡的生产性能最佳。陈娟等[7]研究发现,饲喂添加2%、4%新型酿酒酵母培养物的日粮,蛋重显著增加,料蛋比显著降低。张嘉琦等[8]也发现饲喂0.6%的酵母培养物显著提高蛋重,有提高产蛋率和降低料蛋比的趋势。林伯全等[9]同时添加酵母细胞壁和益生素饲喂蛋鸡,可显著提高产蛋率和日产蛋量,添加0.8 mg/kg 酵母细胞壁+100 ml/t 益生素效果最佳。
本试验结果,添加酿酒酵母发酵白酒糟产蛋率、产蛋量有提高趋势,料蛋比有降低趋势,添加1%效果最佳,1~4 周、5~8 周和全程产蛋率分别比对照组高2.17%、0.93%、1.55%,5~8周添加1% YCDG料蛋比比对照组低1.44%,添加YCDG 对蛋重基本没有影响。本试验所用YCDG 在1~8 周,随着添加YCDG 水平增加,采食量增加,可能是YCDG 中富含多种芳香物质:脂类、醇类、有机酸和增味物质:鸟苷酸、肌苷酸、谷氨酸、多肽等有刺激诱食的作用。以上试验酵母培养物最优添加量有所差异,使用效果各有不同,可能是使用的原生菌株、采用的生产工艺不同影响产物的营养成分、组成、结构等,但综合看适量添加酿酒酵母培养物能提高生产性能。但避免过量添加酵母培养物,过量饲喂酵母培养物能通过降低肉仔鸡对氮素沉积及肠道的发育,进而抑制仔鸡的生长发育[10]。本试验所采用的YCDG 与马友彪等[6]研究使用的白酒糟酵母培养物是效果相似,1%添加效果最佳,有提高产蛋性能的趋势,试验在天气炎热的夏季进行诱食效果显著。体增重与产蛋率刚好相反,对照组体增重最大,其次是2% YCDG 组,1% YCDG组体增重最少,可能产蛋量高消耗能量多,导致体增重少。
良好的蛋壳厚度一般在0.33~0.35 mm,近500 日龄的蛋鸡蛋壳厚度能达到0.35~0.36 mm,说明本试验鸡场饲养水平较高。蛋壳强度能反映蛋壳承重能力,对运输具有重要意义。哈弗单位和卵白高度直接反应蛋白品质和蛋新鲜程度的重要指标,新鲜鸡蛋的哈夫单位在80 以上,它是现在国际上对蛋品质评价的重要指标和常用方法。本试验添加YCDG 组蛋壳厚度比对照组高2.86%,蛋壳强度、哈夫单位、卵白高度有升高趋势,2% YCDG添加效果最佳,对蛋黄颜色没有改善,可能是因为良好的饲养环境和营养均衡的饲料掩盖了YCDG对蛋品质的改善作用。武书庚等[11]研究添加酵母培养物显著改善蛋黄颜色,对哈夫单位、蛋壳厚度、蛋壳强度的改善作用不明显。张嘉琦等[8]发现添加0.4%酵母培养物蛋壳厚度显著增加,有提高蛋壳强度、蛋黄比例、哈夫单位的趋势。晏家友等[12]也发现添加1、2、3 kg/t酵母培养物对四川农凤鸡蛋壳强度、蛋壳厚度和哈夫单位没有显著影响,但随着饲喂量增加有提高趋势。以上研究与本研究基本一致,YCDG对蛋品质具有改善作用。
蛋壳颜色是消费者直观感受的蛋壳品质的重要指标,参考海兰褐蛋鸡手册将蛋壳颜色从深到浅分成110、100、90、80、70五个等级,一般认为蛋壳颜色越深越好。蛋鸡日龄逐渐增大,蛋壳颜色越来越浅,试验鸡日龄500 日龄左右,平均80 分左右,本试验综合3 次蛋壳颜色评分,发现对照组110+100 分和70 分的占比均多于添加YCDG 组,2% YCDG 组110+100 分占比相对较多,70 分占比最少,蛋壳颜色总分也高于其他组。影响褐壳蛋鸡蛋壳颜色的因素很多有遗传、日龄、疾病、应激、营养等[13],可能2% YCDG 能减少热应激损害、改善肠道菌群平衡,对蛋壳颜色有改善作用。
现场养殖户经常以粪便状态判断鸡群状态,评价饲料产品的优劣,的确粪便是反映机体健康状态的因素之一。很少有研究判断直观的粪便状态,我们通过大量的实践和参考《蛋鸡的信号》制定粪便评价标准:1 分为硬质粪便,粪便可以拿起在手中滚动;2 分为粪便成型,但粪便里面是潮湿状;3 分为稀粪;4 分为水样便。试验期间粪便基本处于2~3 分之间,粪便基本成型偏潮湿,伴有少量稀便。添加YCDG 有改善粪便状态的作用,1%的添加效果最佳,可减少稀粪。由此可见,YCDG 可作为缓解蛋鸡腹泻的有效途径之一。
本试验同时检测粪便中乳酸杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、芽孢杆菌菌群数量,发现添加2% YCDG可显著提高粪便中乳酸杆菌、减少沙门氏菌数量。乳酸菌可产生有机酸—乳酸,是一种重要的抗菌物质,可抑制病原菌的生长,另一方面,乳酸菌定植在肠上皮细胞,竞争性排斥肠道内潜在致病菌对肠上皮细胞的黏附、定植[14]。沙门氏菌所有血清型都有潜在致病性,可激发肠道和循环系统的急性炎症反应,大部分沙门氏菌是人畜共患病的病原,食用被污染的蛋制品可引起人类沙门氏菌感染[15]。张嘉琦等[8]研究添加0.4%酵母培养物可显著降低蛋壳表面大肠菌群、细菌总数。严一铭[16]和郭小华等[17]研究表明酿酒酵母培养物可显著降低盲肠重大肠杆菌数量,但乳酸杆菌数量差异不显著。Jensen等[18]发现酵母培养物可显著降低蛋雏鸡肠道大肠杆菌数量,提高酵母杆菌和双歧杆菌数量。安胜英等[19]研究表明添加适当的酵母培养物可降低蛋雏鸡腹泻频次,降低肠道内大肠杆菌和沙门氏菌的数量,添加0.3%的酵母培养物可替代抗生素改善肠道微生态效果。周建民等[20]研究发现添加1%的白酒糟酵母培养物可显著提高肉仔鸡21日龄空肠绒毛高度和42日龄绒毛高度/隐窝深度。以上结果均表明酵母培养物有提高有益菌,降低有害菌的作用,优化肠道菌群,有助于肠道健康生长,可能是生产性能和蛋品质改善的原因。
①添加酿酒酵母发酵白酒糟有提高蛋鸡产蛋率、蛋品质和降低料蛋比的趋势,显著提高采食量,添加1% YCDG 生产性能最佳,添加2% YCDG 蛋品质最佳。
②添加酿酒酵母发酵白酒糟可显著提高粪便中乳酸杆菌数量和降低沙门氏菌数量,可改善粪便状态。
③推荐在蛋鸡饲粮中适宜添加1%~2%酿酒酵母发酵白酒糟。