维生素D对克隆恩病患者炎症因子及铁调节蛋白的影响

张秋琴，刘懿，钟颖，徐梅琳，左艳

1.上海市宝山区仁和医院消化科，上海 200431；

2.复旦大学附属华山医院消化科，上海 200040

克隆恩病是一种可能由遗传和环境等多因素共同导致的，肠道细菌和免疫系统介导的反复发作的肠道疾病[1]。有研究发现约50%的克隆恩病患者存在维生素D 和铁的缺乏[2]，口服维生素D3可以降低克隆恩病的发生率[3]。WANG 等[4]的动物实验发现，维生素D 缺乏的大鼠结肠炎发病率较高，而及时补充维生素D 可降低大鼠结肠炎发生风险。本研究通过比较克隆恩病患者和健康成年人的25(OH)D3水平，并给予克隆恩病患者口服维生素D 治疗，旨在探讨研究维生素D 对克隆恩病患者炎症因子及铁调节蛋白的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取上海市宝山区仁和医院消化科和复旦大学附属华山北院消化科2015 年7 月至2019年10月门诊治疗的克隆恩病(轻、中度)患者100例(每家医院各50例)。纳入标准：①符合《炎症性肠病的诊断与治疗的共识》中克隆恩病的诊断标准[5]；②初诊初治者。排除标准：①过去1年内使用过维生素D、钙或存在其他肠道疾病者；②存在严重的心肝肾等并发症者。③重度CD患者及对水杨酸过敏者。按照随机数表法分为治疗组和常规组，每组50例。治疗组患者中男性28 例，女性 22 例；年龄 33～52 岁，平均(42.61±4.14)岁；疾病分型中回结肠型22 例，结肠型18 例，回肠末端型10例。常规组患者中男性26例，女性24例；年龄32～50岁，平均(42.05±4.19)岁；疾病分型中，回结肠型21例，结肠型19例，回肠末端型10例。选取同期健康成年人100 例作为正常对照，其中男性50 例，女性 50 例；年龄32～52 岁，平均(42.15±4.79)岁。三组受检者的性别和年龄比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.2 治疗方法 常规组给予常规的水杨酸制剂抗炎及对症治疗，治疗组在常规治疗基础上给予维生素D 治疗，即维生素D(国药准字：H35021450，规格：400 U，国药控股星鲨制药(厦门)有限公司)每天一次，每次400 U，碳酸钙D3片(国药准字：H20093675，规格：0.5∶200 U，北京康远制药有限公司)每次1片，2次/d。两组患者均接受门诊治疗90 d。治疗90 d后复查肠镜评估疗效。

1.3 观察指标与检测方法 比较两组患者治疗前后的转铁蛋白、铁蛋白、肠黏膜屏障、血清铁的含量、氧化应激水平及白介素6(IL-6)、白介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及C反应蛋白(CRP)水平。清晨抽取两组患者治疗前(健康对照者为体检时)空腹12 h 的肘中静脉血，治疗90 d 次日清晨再次抽取两组患者空腹12 h的肘中静脉血，采用免疫比浊法测定两组患者治疗前后 IL-6、TNF-α、CRP 及IL-1 等炎症因子的含量。采用ELISA 的方法检测两组患者治疗前后的铁蛋白、血清铁、转铁蛋白等铁调节蛋白含量。运用全自动免疫生化分析仪测定克隆恩病患者和健康成年人25(OH)D3的含量。记录两组患者治疗前后血清丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平。

1.4 疗效评价标准 采用克罗恩病活动指数(Crohn’s disease activity index，CDAI)进行疗效评价[5]。采用 BEST 等[6]的 CDAI 计算法：临床缓解，CDAI＜150分；显效，CDAI下降≥100分；无效，CDAI评分无明显改善。总有效率=(临床缓解+显效)/总例数×100%。

1.5 统计学方法 应用SPSS22.0 统计学软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验；计量资料符合正态分布，以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的临床治疗效果比较 治疗组患者的治疗总有效率80.0%，明显高于常规组的48.0%，差异具有统计学意义(χ2=9.77，P＜0.05)，见表1。

表1 两组患者的治疗效果比较(例)

2.2 两组患者治疗前后的铁调节蛋白含量比较 治疗前，两组患者的转铁蛋白、铁蛋白、血清铁比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，两组患者的转铁蛋白、铁蛋白明显低于治疗前，血清铁明显高于治疗前，且治疗组患者的转铁蛋白、铁蛋白、血清铁明显低于常规组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前后的铁调节蛋白含量比较(±s)

表2 两组患者治疗前后的铁调节蛋白含量比较(±s)

注：与本组治疗前比较，aP＜0.05。

组别常规组治疗组t值P值例数50 50治疗前2.83±0.65 2.72±0.74 0.79 0.43治疗后2.11±0.60a 1.63±0.58a 4.07＜0.05治疗前30.28±4.24 29.50±4.37 0.91 0.37治疗后35.19±4.08a 37.77±3.26a 3.49＜0.05治疗前27.84±5.38 27.16±5.26 0.64 0.52治疗后21.67±4.78a 16.75±4.18a 5.48＜0.05转铁蛋白(g/L) 血清铁(μmol/L) 铁蛋白(μg/L)

2.3 克隆恩病患者和健康成年人血25(OH)D3水平比较 健康成年人血25(OH)D3为(42.52±9.35) ng/mL，明显高于克隆恩病患者的(16.12±3.38)ng/mL，差异具有统计学意义(t=18.78，P＜0.05)。

2.4 两组患者治疗前后肠黏膜屏障和氧化应激水平比较 治疗前，两组患者的SOD、MAD、DAO 及D-乳酸等水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，两组患者的SOD 明显高于治疗前，MAD、DAO 及D-乳酸明显低于治疗前，且治疗组患者的SOD 明显高于常规组，MAD、DAO 及 D-乳酸明显低于常规组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

2.5 两组患者治疗前后的炎症因子比较 治疗前，两组患者的TNF-α、IL-6、IL-1及CRP等炎症因子水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，两组患者的TNF-α、IL-6、IL-1 及CRP 等炎症因子水平明显低于治疗前，且治疗组明显低于常规组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表4。

表3 两组患者治疗前后的肠黏膜屏障和氧化应激水平比较(±s)

表3 两组患者治疗前后的肠黏膜屏障和氧化应激水平比较(±s)

注：与本组治疗前比较，aP＜0.05。

组别常规组治疗组t值P值例数50 50治疗前6.26±1.39 6.37±1.40 0.39 0.69治疗后4.84±0.92a 3.67±0.83a 6.68＜0.05治疗前73.22±11.36 71.82±12.48 0.59 0.56治疗后87.66±13.45a 98.19±14.25a 3.80＜0.05治疗前8.02±1.60 7.94±1.58 0.25 0.80治疗后6.14±1.18a 4.78±0.95a 6.35＜0.05 D-乳酸(mmol/mL) SOD(U/mL)DAO(U/mL)治疗前3.92±0.88 3.82±0.79 0.60 0.55治疗后2.12±0.68a 1.35±0.52a 6.36＜0.05 MAD(nmol/mL)

表4 两组患者治疗前后的炎症因子比较(±s)

表4 两组患者治疗前后的炎症因子比较(±s)

注：与本组治疗前比较，aP＜0.05。

组别 例数治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后CRP(mg/L) TNF-α(ng/L)IL-1(ng/L)治疗前 治疗后MAD(nmol/mL)常规组治疗组t值P值50 50 7.99±1.03 7.96±1.03 0.15 0.86 7.02±0.95a 5.55±1.11a 7.11＜0.05 36.49±5.35 36.53±5.35 0.04 0.97 31.27±7.41a 23.51±6.88a 5.43＜0.05 22.01±2.01 22.33±2.02 0.79 0.43 19.89±2.41a 15.33±2.27a 9.74＜0.05 16.03±1.16 15.93±1.59 0.36 0.72 14.73±1.12a 9.77±0.94a 23.99＜0.05

3 讨论

相关研究表明，炎症性肠病在我国的发病率逐年上升[7]。肠道慢性炎症降低患者肠道的吸收功能，影响患者的免疫力，增加患者感染和骨质疏松发生风险，降低患者的生活质量。研究表明，克隆恩病患者缺乏维生素D 的程度与疾病的严重程度存在正相关[8-9]。近年研究发现，维生素D既可以调节机体的钙磷代谢，又可调节铁调节蛋白和炎症因子[10-11]。

通常利用25(OH)D3来反映其体内维生素D 的水平。本研究发现，健康成年人体内25(OH)D3水平显著高于克隆恩病的患者，说明克隆恩病患者体内维生素D含量较低，经过维生素D治疗后，治疗组的总有效率显著升高，提示维生素D对于缓解克隆恩病患者临床症状及改善肠黏膜具有积极作用。ANANTHAKRISHNAN等[12]研究发现，高水平的25(OH)D3可有效降低炎症性肠病的发生风险，印证了本研究结果。克隆恩病患者大多伴有缺铁性贫血，随着治疗的进展，患者的肠道吸收功能逐渐恢复，缺铁性贫血得到改善，血中转铁蛋白、铁蛋白下降，血清铁升高。本研究中，治疗前，两组患者的铁蛋白、血清铁及转铁蛋白、比较无统计学意义，治疗组患者经过系统治疗后，转铁蛋白、转铁蛋白等显著低于常规组，血清铁高于常规组，说明维生素D可有效调节体内转铁蛋白、血清铁、转铁蛋白的水平。正常情况下，机体可清除体内多余的自由基，保持氧化应激反应处于动态平衡中。SOD是清除自由基的氧化酶，MAD是脂质的过氧化代谢产物，可反应体内氧化应激程度。克隆恩病患者SOD水平较低，而MAD水平较高，导致大量的自由基蓄积，损伤肠黏膜屏障，激活核因子-κB通路，增加肠道炎症的发生[13]风险。本研究中治疗组患者体内高水平的SOD，可清除体内过多的自由基，减轻炎症反应。D-乳酸和DAO是评价肠道黏膜屏障的间接指标，肠道受损时，肠黏膜的通透性增加，绒毛细胞中的D-乳酸和DAO进入血液，导致其含量增加。本研究中，治疗组患者D-乳酸和DAO含量明显降低，表明维生素D可修复肠道黏膜屏障，减轻肠道炎症。本研究中治疗组患者IL-6、IL-1炎症因子水平显著降低，维生素D可通过影响树突细胞和T细胞降低炎症因子水平，避免过度免疫应答。这与ZHU等[14]研究结果具有一致性。TNF-α参与克隆恩病的发生发展，巨噬细胞在受到抗原的刺激后，产生丝裂原活化激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPKs)，而 这 是TNF-α等炎症因子产生的关键。本研究中，治疗组患者CRP和TNF-α明显降低，说明维生素D可减轻克隆恩病患者炎症反应。

综上所述，克隆恩病的患者较健康成年人缺乏维生素D，及时的补充维生素D 可以降低患者的铁调节蛋白和炎症因子的水平，有助于缓解克隆恩病患者临床症状及改善肠黏膜的屏障功能，值得推广应用。