串联质谱技术在新生儿遗传代谢性疾病筛查中的应用及对筛查效率的影响分析

广东省吴川市妇幼保健计划生育服务中心（524500）康健泉 吕川

遗传代谢性疾病又称为先天代谢异常或者遗传代谢异常，主要是机体正常代谢的某种受体、酶、膜以及载体蛋白的基因编码突变并且产物发生改变现象，血液中的表现主要为相应代谢物含量增高、代谢物不断蓄积，进而出现相应病理症状。我国每年出生的缺陷儿较多，其中在出生缺陷疾病中遗传代谢病所占比例较大，在临床具有严重危害，甚至会加重家庭以及社会的经济负担，当前进行预防的有效措施为新生儿疾病筛查[1]。在进行筛查的过程中，最主要的筛查内容就是遗传代谢性疾病，在新生儿出生之后进行早期筛查并给予有效治疗可促进其健康成长，当前进行新生儿遗传代谢性疾病筛查所选用的方式为串联质谱技术，通过筛查可有效明确脂肪酸、有机酸以及氨基酸代谢异常等疾病[2]。本次研究对新生儿遗传代谢性疾病筛查中应用串联质谱技术，总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2018年6月～2019年6月期间的新生儿360例进行研究，其中男新生儿190例，女新生儿170例，出生时间为70h～6d，平均时间（5.23±1.04）d；其中正常出生体重儿240例，低体重儿50例，巨大儿70例；早产儿60例，足月儿300例。家属均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 新生儿出生3d之后采集足跟血，充分哺乳之后采用浓度为75%的乙醇对其足跟外侧以及足跟内侧进行充分消毒，然后分别穿刺采血3滴，将所采集的足跟血放置于滤纸片上，保证每张滤纸片至少有2个血斑，每个血斑直径要大于8mm，血斑的浓度要均匀一致并且要充分渗透滤纸片双面，将标本晾干之后统一进行收集，然后密封后送检，对于检查结果为阳性的标本要进一步予以复查或者进行基因诊断[3]。

1.2.2 串联质谱技术检测 实施串联质谱技术检测所选用的仪器为美国生物应用系统公司生产的型号为API4000 型串联质谱仪以及Perkin Elmer公司提供的试剂盒、美国疾病控制与预防中心提供的质控品，测定滤纸片中的有机酸、多项氨基酸以及脂肪酸指标以及比值[4]。该项检测主要通过电离学原理将被检测的物质分子电离成为质荷比m/s的带电粒子，并且保证以上带电粒子的质荷比大小可在空间或者时间上生成分离排列的图谱。对离子峰的强度进行测定，以此来确定待测化合物的分子式以及相对分子质量。将测得的两个质谱串联通过质谱仪的不同扫描方式获取串联质谱图[5]。

1.3 观察指标 分析筛查结果以及不同胎龄新生儿的氨基酸浓度。氨基酸类型主要包括ALA（新生儿丙氨酸）、MET（甲硫氨酸）、ARG（精氨酸）、GLY（甘氨酸）、PHE（苯丙氨酸）、CIT（瓜氨酸）、ORN（鸟氨酸）、PRO（脯氨酸）、TYR（酪氨酸）、VAL（缬氨酸）。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0分析处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用X2检验，P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 筛查结果 研究中的360例新生儿中，筛查结果为可疑阳性的有8例，占比2.22%（6/360），确诊3例，确诊率为0.83%，其中包括1例氨基酸代谢障碍类，1例有机酸代谢障碍类，1例脂肪酸代谢障碍类，各项占比均为33.33%；假阳性的352例新生儿中，氨基酸代谢异常228例，占比64.77%，有机酸代谢障碍类75例，占比21.31%，脂肪酸代谢障碍类49例，占比13.92%。

2.2 不同胎龄新生儿的氨基酸浓度 早产儿ALA与MET浓度与足月儿之间无显著差异，P＞0.05；早产儿ARG、GLY、PHE浓度高于足月儿，CIT、ORN、PRO、TYR、VAL浓度低于足月儿，P＜0.05。详见附表。

附表 不同胎龄新生儿的氨基酸浓度比较(±s)

附表 不同胎龄新生儿的氨基酸浓度比较(±s)

氨基酸种类 早产儿（n=60） 足月儿（n=300） t P ALA 426.85±89.75 425.19±88.25 0.132 0.894 ARG 18.78±6.73 16.14±5.28 3.366 0.000 CIT 13.93±4.36 15.39±4.53 2.292 0.022 GLY 464.18±132.74 428.48±115.35 2.132 0.033 MET 24.58±6.72 24.33±6.66 0.265 0.791 ORN 151.66±44.72 164.34±41.83 2.118 0.034 PHE 56.16±7.91 51.79±7.17 4.234 0.000 PRO 184.35±41.66 211.66±43.31 4.486 0.000 TYR 106.78±33.27 116.18±31.47 2.091 0.037 VAL 119.84±34.62 139.73±37.54 4.004 0.000

3 讨论

遗传代谢性疾病主要是遗传代谢出现异常所导致的疾病，会导致重要生理活性物质缺失，甚至会引起机体代谢物沉积，进而诱发较多临床症状，本病在新生儿中的发病率较高，病情呈进行性发展，会诱发不可逆性神经系统损害，进而导致患儿死亡，所以早期筛查以及及时有效的治疗至关重要。

遗传代谢在与机体部分受体、酶以及膜生物合成的过程中出现遗传缺陷，进而导致体液以及细胞中的大量毒性中间代谢产物聚集于体内，血液中的氨基酸以及乙酰肉碱等相应代谢产物的含量会不断升高，进而引起遗传代谢性疾病。串联质谱技术是对多种指标进行检测、对多种疾病进行筛查的技术，可在2min内快速检测出同一血斑上的氨基酸、酰基肉碱以及游离肉碱，然后根据相关疾病指标可快速筛查脂肪酸、氨基酸以及有机酸的氧化代谢病。串联质谱技术主要是在干血滤纸片上分析氨基酸以及卡尼汀的过程，可对脂肪酸代谢紊乱、有机酸代谢紊乱以及氨基酸代谢紊乱等40余种遗传代谢性疾病进行筛查。多项研究表明[6]，遗传代谢性疾病的出现会严重影响到新生儿的生长发育，就苯丙酮尿症新生儿来说，其在出生时无明显临床表现，在3个月之后主要表现为生长发育落后以及智力落后现象，并且在年龄不断增长的情况下，所表现出的症状会越来越严重，病情严重的患儿智商在50以下，并且多数患儿会出现脑电图异常现象，采用串联质谱技术进行早期诊断可有效避免患儿出现智力障碍。研究中采用该种技术诊断效果较好，可快速诊断出新生儿所患有的疾病，这与刘桂红等[7]的研究结果基本一致。

综上所述，在新生儿遗传代谢性疾病筛查中应用串联质谱技术效果较好，可有效提高筛查率，有助于遗传代谢性疾病的早期筛查与诊断。