降脂胶囊的质量标准提升研究

曾芳俐 张 磊* 冯 华

遵义市产品质量检验检测院，贵州 遵义 563000

降脂胶囊主要由葛根、何首乌、银杏叶、山楂、水蛭、海藻六味中药材组成[1]，具有消食除痰，活血祛瘀功效。用于脾运失常所致的头晕、头痛、胸闷、四肢沉重及高血脂等症。目前，该制剂已应用于临床治疗中，由于该中药复方制剂具有药味较多，成分复杂等特点，现行标准难以保证降脂胶囊质量。为有效控制降脂胶囊的生产质量，本文对其质量标准进行了系统的研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器 岛津 LC-20AD高效液相色谱议(包括二元泵，紫外检测器，柱温箱，自动进样器，Shimadzu分析仪器工作站和处理软件)，Diamosil®C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)为色谱柱；AB265-S型梅特勒电子天平(北京中恒日鑫科技有限公司)，KQ-300DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 材料 葛根对照药材、葛根素对照品(购于中国食品药品检定研究院，批号分别：121551-201103，110752-201806)，甲醇为色谱纯(天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20180409)，水为娃娃哈纯净水，其他试剂均为分析纯，3批降脂胶囊(批号分别为：161201、180309、180901)遵义市中医院购买，阴性样品自制。

2 方法与结果

2.1 薄层鉴别[2-6]取样品约2.0 g，加甲醇10 mL,放置2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取葛根对照药材1 g，同法制成对照药材溶液，再取葛根素对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液，同样品制法制成阴性样品溶液。吸取上述4种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10∶3∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。结果表明，分离度好，斑点显色清晰，而阴性无干扰，见图1。

1-3.样品 4.对照药材 5.阴性样品 S.葛根素对照

2.2 含量测定[2-9]

2.2.1 色谱条件 Diamosil®C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)为色谱柱，甲醇-水(30∶70)为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长为250 nm，柱温35 ℃。进样量10 μL，相连两峰分离度应符合规定，理论塔板数按葛根素峰计，应不低于4000。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取葛根素照品适量，加甲醇溶解制成含葛根素16.16 μg/mL的对照品溶液，摇匀，用0.45 μm 的微孔滤膜滤过，即得。

2.2.3 供试品溶液制备 取内容物约1.0 g(批号：180901),精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25 mL，超声处理30 min，取出，放冷至室温，用甲醇补足损失的重量，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 阴性溶液制备 取缺葛根药材处方下自制阴性样品，按“2.2.3”项下供试品溶液制备方法制备成阴性对照溶液。精密吸取10 μL注入高效液相色谱仪，按照色谱条件下测定，结果表明阴性对照的色谱图在葛根素相应的保留时间无干扰峰，详见色谱图2。

图2 HPLC图谱

2.2.5 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液2 μL、6 μL、10 μL、14 μL、18 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，分别以葛根素浓度(μg)为横坐标，峰面积积分值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，计算，回归方程为：Y=63415X-301.5，R= 0.9999；在32.32～290.88 μg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.2.6 精密度试验 精密吸对照品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪中，连续测定6次，记录峰面积，结果葛根素峰面积的RSD为1.33%%，结果表明仪器精密度良好。

2.2.7 稳定性试验 分别吸取(批号180901)同一供试品溶液于0、4、8、12、16、20、24 h，精密吸(批号180901)样品制备的供试品溶液10 μL进样，测得峰面积，RSD均值为0.12%，表明在24 h内稳定。

2.2.8 重复性试验 取同一批样品(批号180901)6份，精密称定，按照“2.2.3”项下方法制备成供试品溶液。测定峰面积，计算葛根素平均含量为0.36 mg/g，RSD为0.13%，结果表明重复性好。

2.2.9 加样回收试验取(已知含量含葛根素0.36 mg/g)的样品6份，每份约0.5 g，精密称定，精密称取葛根素对照品适量，按“2.2.3”项下的方法操作，计算回收率,葛根素平均回收率为99.15%、RSD为0.66%，见表1。

表1 葛根素加样回收试验结果

2.2.10 3批样品含量测 结果详见表2。

表2 3批样品含量测定结果 (n=3)

3 讨论

葛根和葛根素的薄层鉴别研究中分别比较了含4%醋酸钠的硅胶G薄层板、聚酰胺薄层板、硅胶G薄层板和硅胶 GF254 薄层板的效果，结果发现硅胶G薄层板清晰圆整和，硅胶GF254薄层板展开的斑点次之，Rf值到不到要求，而聚酰胺层析板和4%醋酸钠的硅胶 G 薄层板的斑点分离不理想，所以鉴别过程中选择硅胶G板用。试验过程中，对不同的展开剂进行了对比研究，分别尝试了以二氯甲烷-甲 醇-水(7∶2.5∶0.25)、三氯甲烷-甲醇(8∶2)、三氯甲烷-甲醇-水(10∶2.5∶0.25)、三氯甲烷-甲醇-水(10∶3∶0.1)4 种展开剂。结果表明，以三氯甲烷-甲醇-水(10∶3∶0.1)为展开剂的斑点与周围杂质斑点分离较好。

降脂胶囊为复方制剂，为了制定出一种适合降脂胶囊的科学、合理、可行的质量控制分析方法,本论文作了如下研究工作:本实验使用甲醇-水(15∶85)、甲醇-0.1%磷酸溶液(10∶90)、乙睛-水(15∶85)作为流动相，但是葛根素分离效果不好，并且样品峰不能回到基线上，所以最后确定以甲醇-水(30∶70)为流动相，不但分离效果最好，并且样品峰能回到基线。

综上所述，本试验对降脂胶囊中的葛根分别进行了薄层鉴别和含量测定研究，所建立的方法稳定可靠、重复性好、专属性强，阴性无干扰，可以有效控制降脂胶囊中葛根药材的质量，适用于降脂胶囊的质量控制。