蔡言妮, 刘忠军, 鞠贵春, 卫功庆, 张爱武, 关轩承, 云祥鸿, 吴 旻
(吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春 130118)
水貂作为一种经济价值极高的毛皮动物,以其毛绒丰富、保暖效果好等优点深受人们喜爱。貂皮是世界裘皮业支柱之一,被美誉为“软黄金”(高秀华,2014)。与其他单胃动物相比,水貂胃容积较小,消化道较短,没有盲肠,食物在消化道中停留的时间较短(黄永凯,2005)。丁酸梭菌能够在动物肠道内产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等多种物质,具有促进消化、改善动物肠道菌群平衡等多种生物学功能(赵敏孟,2018)。本研究以水貂作为试验动物,研究丁酸梭菌对其生长性能及免疫机能的影响,以期为研究丁酸梭菌的作用机制提供理论基础,并为丁酸梭菌在水貂养殖中的应用提供实践依据。
1.1 试验动物及日粮 将40只(60±5)日龄,体重相近[(1.08±0.05)kg]的健康雄性红眼白貂,随机分为4组,每组水貂数为10只。其中I组为对照组,饲喂水貂基础日粮,II、III、IV组为试验组,分别饲喂添加 0.5×108、1×108、2×108cfu/g 丁酸梭菌的水貂基础日粮。各组水貂均单笼单只饲养,试验期为35 d,试验期间定时等量饲喂,自由饮水。
1.2 试验材料 丁酸梭菌购自河南金百合生物科技有限公司 (1×1010cfu/g),T-SOD、CAT、MDA检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,IgA检测试剂盒购自上海朗顿生物技术有限公司。
1.3 测定指标及方法
1.3.1 生长性能 试验开始时称取每只水貂初始体重,试验结束后称取每只水貂末重,计算每组水貂体重变化及平均日增重。
1.3.2 营养物质消化吸收水平 试验开始第31天开始,采用全收粪法收集5 d的粪便,并每天收集剩余料量,将每只水貂收集的全部粪样和剩料混匀后,各取20 g经10%的硫酸处理后,在65℃下烘干,粉碎过40目筛后测定各组水貂粗蛋白质和粗脂肪的消化率。
1.3.3 血清样本采集 试验结束后对水貂进行空腹采血,采血方法为使用戊巴比妥钠麻醉后断趾采血,血液收集完毕后止血,消毒伤口避免感染。所得血液使用3000 r/min离心10 min,收集血清进行抗氧化及免疫水平指标的测定。
1.3.4 血清抗氧化水平检测 各组水貂血清抗氧化水平均使用试剂盒法测定,其中丙二醛(MDA)的含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定,总超氧化物歧化酶 (T-SOD)活性采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定,过氧化氢酶(CAT)活性采用钼酸铵法测定。
1.3.5 血清IgA含量的测定 水貂血液IgA含量使用ELISA方法进行测定。
1.4 数据统计 所有试验数据均在Excel进行初步处理,采用统计学软件SPSS 17.0中的one-way ANOVA过程进行单因素方差分析,并使用GraphPad prism 6制图。所有数据均以“平均值±标准差”表示,其中P<0.05表示具有差异显著性。
2.1 丁酸梭菌对水貂生长性能的影响 丁酸梭菌对雄性红眼白貂生长性能的影响见表1。III、IV组水貂平均日增重较I组相比分别提高了22.4%、28.4%(P < 0.05),II组与 I组相比差异不显著(P>0.05)。说明饲料中添加丁酸梭菌能够提高水貂生长性能。
表1 丁酸梭菌对水貂生长性能的影响
2.2 丁酸梭菌对水貂营养物质表观消化率的影响 丁酸梭菌对水貂饲粮中粗蛋白质、粗脂肪消化率的影响见表 2。与 I组相比,II、III、IV 水貂粗脂肪消化率分别提高了17.2%、17.3%、15.4%(P<0.05)。各组粗蛋白质消化率与I组相比差异不显著。说明饲料中添加丁酸梭菌能够提高水貂脂肪消化率,对蛋白质消化率无显著影响。
表2 丁酸梭菌对水貂粗蛋白质、粗脂肪消化率的影响%
2.3 丁酸梭菌对水貂血清抗氧化性指标的影响由图 1可知,与 I组相比,II、III、IV水貂血清MDA含量分别降低了40.2%、49.4%、51.7%,均显著低于对照组(P<0.05)。由图2可知,与对照组相比,Ⅱ组水貂血清中T-SOD活性显著升高(P<0.05),提高了25.3%。Ⅲ、Ⅳ组与对照组相比无明显差异(P > 0.05)。 与 I组相比,II、III、IV 水貂血清中CAT活性分别提高86.9%、36.6%、36.9%(P<0.05)。说明饲料中添加丁酸梭菌能够增强水貂的抗氧化性能。
2.4 丁酸梭菌对水貂血清免疫指标的影响 由图 3可知,与 I组相比,II、III、IV 水貂血清 IgA 含量分别提高了 136.1%、383.3%、125.0%(P<0.05),其中Ⅲ组血清中IgA含量最高。说明日粮中添加丁酸梭菌后可以提高水貂血清IgA的含量。
3.1 丁酸梭菌对水貂生长性能的影响 丁酸梭菌能够提高多种家畜家禽以及水产动物的生长性能。杨玲(2018)等研究表明,断奶仔猪饲粮中添加含有丁酸梭菌的复合益生菌能够显著提高仔猪的生长性能。刘亭婷(2012)等研究表明,蛋用仔公鸡饲料中添加1000 mg/kg的丁酸梭菌能够显著提高平均体重和平均日增重。贾志新(2014)研究表明,樱桃谷肉鸭饲料中添加丁酸梭菌能够促进其前期生长,提高平均日增重。动物饲料中添加适量的丁酸梭菌能促进其生长,原因可能是丁酸梭菌在胃肠道内分泌的一些丁酸代谢产物能够使胃肠道的一些消化酶活性增强,从而促进动物对营养物质的消化利用,对家畜生长起促进作用。本研究结果显示,丁酸梭菌能够提高水貂平均日增重,与杨玲(2018)等研究结果相似。
3.2 丁酸梭菌对水貂营养物质消化率的影响丁酸梭菌能够分泌多种酶类,对动物胃肠道内源性消化系统起辅助作用,能够提高多种动物肠道消化机能。袁文华(2018)等研究表明,肉鸽饲料中添加 5×109cfu/kg乳酸菌和 1×108cfu/kg丁酸梭菌能够显著提高其十二指肠内蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性,促进肉鸽对蛋白质、脂肪和淀粉的消化吸收。史焕(2016)研究表明,育成猪饲料中添加丁酸梭菌能够提高饲料消化性能,降低料重比,提高经济效益。本研究结果表明,丁酸梭菌能够提高水貂脂肪消化率,与袁文华(2018)等研究结果相似。
3.3 丁酸梭菌对水貂血清抗氧化性指标的影响丁酸梭菌具有提高动物抗氧化能力的作用。黄灵(2017)研究表明,虎龙斑幼鱼饲料中添加含有丁酸梭菌的复合益生菌能够提高其血清SOD活性。耿正颖(2018)等研究表明,断奶仔猪饲料中添加丁酸梭菌能够显著增加血清T-SOD含量,说明日粮中添加丁酸梭菌可以提高断奶仔猪抗氧化能力。李文茜等研究表明断奶期犊牛饲粮中添加2.0×108cfu/kg丁酸梭菌能够降低血清 MDA的含量,有效缓解犊牛的断奶应激。本试验在水貂日粮中添加丁酸梭菌能够显著提高水貂血清SOD及CAT活性,显著降低血清MDA含量,与黄灵(2017)等研究结果相似。
3.4 丁酸梭菌对水貂血清免疫指标的影响 丁酸梭菌能够通过改善肠道结构和屏障功能,提升动物机体免疫能力(林华林,2019)。刘磊(2018)等研究表明,獭兔日粮中添加丁酸梭菌能够调节肠道微生态平衡,促进紧密连接蛋白表达,从而增强其机体免疫力。郑有秀(2018)等研究表明,饲料中添加丁酸梭菌能够改善断奶仔猪肠道形态,显著提高其血清中IgA、IgG浓度,从而减轻仔猪的断奶应激反应。本研究结果表明,丁酸梭菌能够显著提高水貂血清IgA含量,提高水貂的免疫力。
本试验结果表明,日粮中添加不同水平丁酸梭菌均能提高水貂平均日增重、脂肪消化率、血清中IgA的含量及抗氧化酶活性,均能显著降低水貂血清MDA水平。说明饲料中添加丁酸梭菌能够提高水貂生长性能、抗氧化及免疫功能。本试验条件下,以0.5×108cfu/g丁酸梭菌添加剂量效果最佳。