痔九味镇痛膏对SD小鼠皮肤毛细血管通透性及小鼠痛觉反应时间的影响

李长寿，刘印明

(1.宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院，宁夏 银川 750021；2.宁夏医科大学，宁夏 银川 750021)

随着人们生活水平的提高及生活方式的转变，肛肠疾病在逐步增多。肛肠疾病常导致患者疼痛难忍，严重影响人们的生活质量。痔九味镇痛膏是我院肛肠科李长寿主任医师经多年研究，利用经典方剂并结合现代临床实际研制的肛肠疾病外用药膏。经临床应用，在镇痛及抗炎方面效果显著。为了进一步研究其镇痛作用和抗炎作用，本研究以SD小鼠模型为研究对象，观察痔九味镇痛膏对实验小鼠的抗炎和镇痛效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物

清洁级SD小鼠80只，雄性，体质量(300±50)g，由宁夏医科大学动物中心提供，动物合格证号：SCXK(宁)2015-0001。在宁夏医科大学动物中心动物房适应性饲养1周后用于实验。

1.2 药物与试剂

实验用药剂采用经验方，由苏木、乳香、没药、地龙、枯矾、红花、黄柏、苦参、冰片组成，由宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院制剂室按照比例制备成膏方备用。实验药物及试剂：肤轻松(国药准字号H32025258由常熟市星海制药有限公司提供)；0.9%盐水；10%水合氯醛；磷酸组胺；伊文氏兰。

1.3 实验仪器

游标卡尺；恒温水浴锅；722分光光度计；800型离心机；分析天平FA2104；仪器光镜，生产厂家为德国LEICA公司。

1.4 统计学方法

2 实验方法与结果

2.1 抗炎作用比较

2.1.1 痔九味镇痛膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 取雄性小鼠40只，体重28～30 g，随机分为4组：①生理盐水0.05 mL/耳；②肤轻松组：0.05 mL/耳；③痔九味镇痛膏一组：0.025 g/耳；④痔九味镇痛膏二组：0.05 g/耳。0.5 h后除去药物，二甲苯0.05 mL涂于小鼠两侧耳背，30 min后处死小鼠，剪下左右两耳，用打孔器(直径相同)分别在同一部位取下圆耳片，扭力天平称重，计算耳廓重量，并比较各组小鼠耳廓肿胀度。

结果显示，与生理盐水组相比，肤轻松组、痔九味一组、痔九味二组小鼠的耳廓肿胀度显示有抑制作用；痔九味二组的效果显示，高剂量状态下对小鼠的耳廓肿胀度有明显效果(P<0.05)。见表1。

表1 痔九味镇痛膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

2.1.2 痔九味镇痛膏对大鼠皮肤毛细血管通透性的影响 取雄性大鼠20只，体重280～300 g，取其中符合实验用大鼠12只，用8%硫化钠在其背部涂抹脱毛，脱毛面积为1.5 cm。随机分为4组：①生理盐水组：生理盐水0.05 mL/耳；②肤轻松组：0.05 mL/耳；③痔九味镇痛膏组：0.05 g/耳。各组将药物均匀涂于脱毛处，给药0.5 h后除去药物，然后在其给药处皮下注射0.1%组胺0.05 mL/只，立即再次涂抹药物(方法同前)，10 min后尾静脉注射0.5%伊文思蓝50 mg/kg(用水合氯醛轻度麻醉)，30 min后断头处死大鼠，洗去药物后，取蓝斑皮肤，置于7∶3的丙酮生理盐水混合液5 mL中浸泡，并置入65 ℃温箱中孵育48 h，取出于1 500 r /min离心10 min，取上清液，用722分光光度计620 nm处测其滤液的光密度。

结果显示，肤轻松组与痔九味组的数值差异无统计学意义(P>0.05)，但两者OD值均少于生理盐水组(P<0.05)。见表2。

表2 术后各组0.5%伊文氏蓝OD值比较

2.2 镇痛作用比较

2.2.1 热板法 取40只小鼠，体重22～25 g，放入(55±0.5)℃恒温水浴板上，测定其痛觉反应时间(指标为舔后足，以上不超过30 min为合格)。取合格小鼠40只随机分为4组：①生理盐水组：0.05 mL/足；②阿司匹林组：0.05 mL/足；③痔九味镇痛膏一组：0.025 mL/足；④痔九味镇痛膏二组：0.05 mL/足。除②组灌胃给药外，其余各组将药物均匀涂抹于小鼠足底部。测定给药后1 h、2 h各小鼠的痛觉反应时间，并计算痛阈提高百分率。见表3。

表3 痔九味镇痛膏对小鼠镇痛作用的影响 (n=10)

痔九味镇痛膏是经多年研制的针对混合痔各期疼痛的外用膏剂，由本院制剂室按照规范的膏剂临床加工流程完成，临床应用效果明显。为了进一步观察痔九味镇痛膏的抗炎作用和镇痛效果，按照规范的动物实验方法对该药进行了对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响和对大鼠皮肤毛细血管通透性的影响研究，以评价该药膏的抗炎作用。经实验，表1和表2的结果均显示符合预期设计(P<0.05)。采用热板法评价痔九味镇痛膏对小鼠镇痛的作用，经实验，表3的结果也与预期结果一致。

痔九味镇痛膏由冰片[1-3]、醋乳香、醋没药[4]、苏木[5]、黄柏[6]、苦参[7]、红花[8]、枯矾、地龙[9]等九味中药组成，这些药物从不同的侧面对疼痛发生的四个途径产生积极的阻断作用，从而有效达到抗炎镇痛的效果。