元艺,单晓伟,李博,何汇
血吸虫病是严重危害人民身体健康,阻碍流行区经济发展和社会稳定的寄生虫病。钉螺是日本血吸虫唯一中间宿主,在血吸虫病传播中起着十分重要的作用。实践证明,化学药物灭螺是阻断血吸虫病流行的重要措施,也一直是国内外研究的热点[1-6]。氯硝柳胺因其杀螺效果好,对哺乳动物毒性低,是世界卫生组织(WHO)唯一推荐的杀螺药物[7],多年来在我国现场被广泛使用[8]。氯硝柳胺难溶于水,现场使用困难,将其制成乙醇胺盐,可在一定程度上增加其溶解性,但使用过程中对环境污染较大,使用者易受药物扬尘危害,灭螺效果不够理想[9]。60%四聚乙醛水分散粒剂采用物理包裹和缓释技术,在水体中的分散性好,药效发挥迅速,且对鱼虾等水生动物毒性低。本试验就其实验室和现场杀螺效果进行了观察,进一步验证其灭螺效果,为其产品登记提供依据。
1.1 实验药物 60%四聚乙醛水分散粒剂(60% Metaldehyde water dispersible granule,以下简称MWG)为细粒状粒剂、袋装,粒径在5 μm以下,四聚乙醛含量为60%,由广东农密生物科技有限公司提供,批号粤20170183;50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂(50%Wettable powder of niclosamide ethano-lamine salt,以下简称WPN),购自四川省化学工业研究设计院,批号2017034。
1.2 空白对照 为脱氯水。
肋壳钉螺采自湖北省江陵县有螺江滩和岳阳市南湖新区外洲洲滩,以群体逸蚴法剔除感染性钉螺,经室内饲养24 h后选取活力强、螺龄7~8旋的成螺用于试验。
按中华人民共和国农业行业标准《农药登记用杀钉螺剂药效试验方法和评价》(NY/T 1617-2008) 进行试验研究[10]。
3.1 室内喷洒试验 取无污染泥土,晒干敲碎,过60目筛,称取细土1 000 g倒入30 cm×40 cm的搪瓷盘中,制成1~2 cm厚的泥盘,铺平后加入200~300 mL脱氯水,保持含水量20%~30%,每只瓷盘放入钉螺100只。实验组为MWG组,有效施药剂量分别1.800、0.900、0.450、0.225、0.113 g/m2,同时设WPN对照组(1.000 g/m2)和空白对照组。喷药后1、3和7 d分别从各组内随机取出1个泥盘,捡出所有钉螺,用脱氯水冲洗3次,置于铺有滤纸的培养皿中恢复饲养72 h,采用水养法和敲击法鉴定钉螺死活。试验重复3次。室内试验温度为26℃±1℃,相对湿度为60%±5%。
3.2 现场喷洒试验 2018年4月选取岳阳市南湖新区外洲钉螺密度>10只/0.1 m2的的草滩为试验区。清除高于5 cm的杂草,分割成5个小区,每小区面积约100 m2。其中MWG组3块,有效施药剂量分别为1.800、0.900和0.450 g/m2,WPN对照区和清水对照区各1块,块区间隔1~2 m。现场地表温度17℃~28℃,相对湿度55%~76%。每100 m2用红色绳将其分隔为10个10 m2的小块,分别人工均匀喷洒施药,药液用量不少于1 L/m2。WPN对照区为50%氯硝柳胺乙醇胺盐有效量为1.000 g/ m2常规施药,空白对照用清水1.0 L/m2。
2018年5月选取江陵县熊河镇南桥村西干渠河滩为试验区。现场温度为19℃~34℃、相对湿度为71%~83%,试验期间天气状况相对稳定,后期有降水。试验方法同湖南岳阳现场。施药后1、3和7 d,采用系统抽样法采集钉螺,分别在每个试验区和对照区抽取10框,捕捉框内全部钉螺,以框为单位用纸袋包好,记录编号、捕获螺数等,回室内清水冲洗,恢复饲养72 h后,用敲击法鉴定钉螺死亡情况并计数。
所有数据应用Microsoft Excel 2007建立数据库,采用SPSS 16.0软件进行统计分析,计算LC50。率间差异采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
MWG室内喷洒灭螺1、3、7 d,LC50分别为0.312(0.271~0.360)、0.216(0.190~0.245)、0.177(0.160~0.196)g/m2。0.900 g/m2浓度组喷洒后7 d钉螺的死亡率为97.67%(表1),达到登记标准。
表1 60%四聚乙醛水分散粒剂实验室喷洒杀螺效果
表2 60%四聚乙醛水分散粒剂岳阳现场喷洒杀螺效果
表3 60%四聚乙醛水分散粒剂江陵现场喷洒杀螺效果
岳阳草洲现场喷洒试验,0.450、0.900和1.800 g/m2MWG喷洒7 d后钉螺死亡率分别为82.35%、90.91%和100.00%(表2)。与WPN对照组相比,0.450 g/m2MWG组钉螺死亡率差异有统计学意义(χ2=10.703,P<0.05),0.900和1.800 g/m2MWG组钉螺死亡率差异均无统计学意义(χ2=2.555、3.340,P均>0.05)。
江陵现场,0.450、0.900和1.800 g/m2MWG喷洒7 d后钉螺死亡率分别为67.42%、85.12%和96.21%(表3),与WPN对照组比较,0.450 g/m2和0.900 g/m2MWG组钉螺死亡率差异有统计学意义(χ2=47.676、9.024,P均<0.05),1.800 g/m2MWG组钉螺死亡率差异无统计学意义(χ2=0.989,P>0.05)。
控制钉螺是控制和阻断血吸虫病传播的有效措施之一。灭螺的主要方法有环境改造灭螺、生物灭螺、物理灭螺和化学药物灭螺等。化学药物灭螺见效快,省工省时,是目前最常用的灭螺方法[11]。氯硝柳胺是世界卫生组织唯一推荐的杀螺药物,在我国被大规模广泛应用[12-15],但其存在难溶于水、周期长、费用高等缺点。因此,新型灭螺药一直是国内外研究的热点[16-21],而通过改造剂型研发出的氯硝柳胺悬浮剂,提高了药物的分散性及杀螺效果[17-20]。四聚乙醛(Metaldehyde )是世界卫生组织(WHO)评定的低毒农药,主要用于杀灭蜗牛、蛞蝓、福寿螺等软体动物。结合氯硝柳胺与四聚乙醛的优点与不足,采用复配技术研发的26%四聚·杀螺胺悬浮剂具有较好的杀螺效果,具有抑制钉螺上爬作用[22,23]。40%四聚乙醛的水乳剂——密达利对我国主要淡水养殖品种均为低毒(LC50> 10.00 mg/L)[23],对水生生物比较安全,尤其是在水产养殖地区的灭螺工作中能弥补氯硝柳胺对水生生物毒性大的不足[24,25],是一种低毒环保型杀螺剂,但杀灭钉螺药性温和,使用前的工作量较大[26],杀螺有效性受环境温度、湿度的影响较大[27]。
本研究使用的60%四聚乙醛水分散粒剂有效成分更高,水分散粒剂药物粒径小(5 μm以下,悬浮剂和可湿性粉剂一般在10 μm以上)。该水分散粒剂采用物理包裹和缓释技术,质量保证期超过3年,药效更稳定。该分散粒剂在水体中的分散性好,兑水能迅速均匀地分散,比一般的悬浮剂和可湿性粉剂分散性能提高30%以上,有利于药效发挥。本研究所用药物的室内和现场喷洒(0.900 g/m2)药效均符合中华人民共和国农业行业标准,达到化学合成杀钉螺剂室内和现场药效评价指标要求[10]。实验室和现场杀螺效果均显示该药对于钉螺具有很好的杀灭作用,使用方便,对水生生物低毒[25],是一种低毒高效环保型杀螺剂,可为现场灭螺提供更多的应用选择。