王东辉,曹丽萍,汤彤国
(1.张掖市甘州区畜牧兽医工作站,甘肃 张掖 734000;2.甘肃省动物疫病预防控制中心,甘肃 兰州 730046;3.张掖市甘州区党寨镇畜牧兽医站,甘肃 张掖 734000)
2019年9月30日-10月22日,选择张掖市甘州区农区某乡镇1户舍饲养羊户饲养的1群绵羊,除去种公羊和出生3月龄以内的羔羊,将剩余的53只母羊作为试验羊只;试验所用3种疫苗均为农业农村部批准的正规企业生产,其中:小反刍兽疫-山羊痘二联活疫苗(Clone9株+AV41株)批号c0919013,山羊痘活疫苗批号19115009,小反刍兽疫疫苗批号2018023-1;试验所用羊痘间接ELISA抗体检测试剂盒由中国农业科学院兰州兽医研究所生产,批号为20190919119,小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒由青岛立见诊断技术发展中心生产,批号020171907;试验所用酶标仪为深圳雷杜公司生产,型号RT6100。
将试验羊只随机分为4组。试验1组(小反刍兽疫-山羊痘二联活疫苗免疫组),分配试验羊20只;对照1组(山羊痘活疫苗免疫组),分配试验羊15只;对照2组(小反刍兽疫疫苗免疫组),分配试验羊15只;试验2组(山羊痘活疫苗与小反刍兽疫疫苗同时分点免疫组),剩余的试验羊3只,用油漆对各组试验羊做了明显的区分标记,对各组分别按照各种疫苗说明书规定剂量和部位进行免疫注射。
表1 小反刍兽疫-山羊痘二联苗免疫效果实验室检测数据统计
按照试验指标设置了试验期羊只采食、精神状态及发病死亡等不良反应记录表,由畜主每天记录,以取得安全性评价数据;免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d分别对各组羊只采血,分离出羊血清后统一编号集中保存,用于实验室抗体检测,以取得免疫性评价数据。
第8 d、第15 d试验1组羊痘和小反刍兽疫抗体转阳羊只增加数量与对照1、对照2组增加数量的差异显著性采用生物统计均数差异性T检验方法进行检验。
根据畜主记录,在整个试验期,试验羊群均未表现出食欲减退、免疫过敏、流产和死亡等不良反应。
在实验室对免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d各组羊只采集的血清,应用酶标仪按照羊痘间接ELISA抗体检测试剂盒和小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒检测方法进行免疫抗体效价检测,并对第8 d、第15 d试验1组羊痘和小反刍兽疫抗体转阳羊只增加量与对照1、对照2组增加量的显著性采用生物统计均数差异性T检验,结果见表1。
在试验过程中,试验羊群未出现过敏、流产和死亡,也没有其他不良反应,表明该二联苗具有较好的安全性。
从实验室抗体检测结果看,该二联苗在注射后第8 d产生免疫抗体,其中:羊痘抗体转阳个体增加数与对照1组相比无显著差异,小反刍兽疫抗体转阳个体增加数与对照2组相比差异极显著;第15 d抗体水平达到高峰,二联苗与单苗比较羊痘抗体转阳个体增加数与对照1组相比差异显著,小反刍兽疫抗体转阳个体增加数与对照2组相比差异极显著,说明该二联苗在抗体产生速度上优于对照组,具有较好的免疫效果。
鉴于试验条件所限,没有做攻毒和抗体消减实验,缺乏对该二联疫苗保护性及免疫抗体维持时间等实验数据,有待进一步验证。
试验2组系附带试验两种疫苗同时免疫之效果,与本试验关系不大,可忽略。
本试验表明,该小反刍兽疫-山羊痘二联活疫苗用于绵羊小反刍兽疫和羊痘两种疫病的预防免疫,具有较好的安全性和较强的免疫效果,仅从免疫安全性、免疫后抗体产生快慢和抗体水平以及疫苗和人工成本等经济性综合考虑,该二联苗对小反刍兽疫疫苗和山羊痘疫苗具有一定的可替代性。