基于外周血免疫分子参数建立的Fisher判别模型对进展性脑梗死的诊断价值

黄杰,万金丽,谢伟贤

1南方医科大学附属佛山医院，广东佛山 528000;2海南医学院

急性脑梗死又称缺血性脑卒中，是由于颅内供血缺乏，颈动脉和椎动脉狭小或阻塞导致脑组织缺血缺氧，从而引发脑实质病变梗死，继而造成神经功能缺失等系列的临床症状[1]。进展性脑梗死(SIP)是急性脑梗死的常见临床亚型，占急性脑梗死的26%～43%，且残障率和病死率高[2]。SIP发病机制复杂，临床症状表现不够典型，这导致无法及时对SIP进行诊断评估以及病程干预。病程进展会在一定程度上破坏免疫内环境而使得免疫系统功能发生改变，这也是致残的原因之一[3]。本研究回顾性分析SIP患者外周血免疫分子参数指标水平变化，从而建立Fisher判别模型来对SIP的病程干预提供客观的诊疗判断依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取南方医科大学附属佛山医院2018年1月～2019年10月神经内科收治的120例急性脑梗死患者作为研究对象。所有研究入组对象符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010版的相关诊断标准[4]：①临床症状表现为头晕、偏瘫、失语、意识障碍等。②神经专科检查包含阳性体征。③颅脑CTA、MRI影像结果提示相关脑梗死责任病灶信息。CTA明确有关血管闭塞或狭窄信息；DWI发现缺血灶，确定病灶大小、部位，PWI显示脑血流动力学改变。排除标准：①不愿意配合医学观察研究；②心、肝、肾功能异常；③血液感染、中枢神经系统感染、脑出血、脑肿瘤疾病等。根据入院期间病程是否进行性加重[以美国国立卫生院神经功能缺损评分(NIHSS评分)增加>2分作为量化指标][5]，将患者分为非进展组(42例)、进展组(78例)。非进展组男18例、女24例，年龄(65.17±16.63)岁；进展组男38例、女40例，年龄(69.03±11.65)岁。两组年龄、性别资料比较，差异无统计学意义。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者知情同意。

1.2 外周血淋巴细胞亚群及免疫球蛋白水平检测 外周血细胞亚群检测样本为2 mL全血(空腹采集，并置于EDTA-K2紫色管中)，采用BD FACSCanto流式仪进行检测。BD流式淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+CD56+)检测试剂由美国BD公司提供。免疫球蛋白检测样本为3 mL血清(空腹采集，置于分离胶管中，3 000 r/min离心5 min,分离血清)，采用贝克曼Au5400生化仪进行检测。IgG、IgA、IgM免疫球蛋白检测试剂由波音特生物提供。检验过程严格遵守SOP文件进行，对仪器试剂进行定标，并做好室内质控。

2 结果

2.1 两组外周血淋巴细胞亚群及免疫球蛋白水平比较 进展组外周血CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA水平均低于非进展组(P均<0.05)。见表1、2。

表1 两组外周血淋巴细胞亚群水平比较

表2 两组外周血免疫球蛋白水平比较

2.2 外周血免疫分子参数对SIP的诊断价值 见表3。

表3 外周血免疫分子参数对SIP的诊断价值

2.3 基于外周血免疫分子参数建立的Fisher判别模型对SIP的诊断价值 运用Fisher判别分析法，拟合CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA四个参数水平构建Fisher评估函数模型。F非进展组=0.75X1+0.37X2+6.03X3+7.46X4-50.17，F进展组=0.71X1+0.22X2+5.75X3+6.07X4-37.03。公式中X1代表CD3+%、X2代表CD4+%、X3代表CD4+%/CD8+%、X4代表IgA。相较于单一指标(CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA)，Fisher判别模型提高了诊断SIP的灵敏度、特异度及准确率，并且降低了诊断SIP漏诊率及误诊率。见表4。

3 讨论

SIP病程进展会在一定程度上破坏免疫内环境，改变免疫系统功能，这也是SIP致残的原因之一[3]。CD3+%、CD4+%水平代表机体细胞免疫功能水平，外周血CD3+%、CD4+%水平持续降低，说明机体可能存在一定程度的免疫功能抑制。罗焕等[6]认为脑梗死发生后机体的应激性反应导致CD3+%、CD4+%水平降低。T淋巴细胞发生功能性紊乱时，T细胞亚群各细胞总数会发生改变，同时免疫功能也会发生异常，最终T淋巴细胞调节功能发生失衡，导致机体发病[7]。Barclay等[7]研究表明，SIP的患者机体免疫平衡受损严重且淋巴细胞急剧凋亡，不仅导致机体免疫抑制，也使淋巴细胞增殖显著减少。本研究发现，进展组患者外周血CD3+%、CD4+%水平低于非进展组，也进一步证实SIP患者机体的细胞免疫功能受到抑制。

CD4+%/CD8+%是评估免疫状态的指标之一，比值越低表明免疫抑制越严重。本研究发现进展组CD4+%/CD8+%低于非进展组，表明SIP患者免疫功能受到抑制，这与聂静等[8]研究结果一致。本研究非进展组与进展组CD8+%比较差异无统计学意义，这与陈慰峰等[9]研究结果不同。其研究表明脑梗死导致机体CD8+%水平降低，CD8+%在机体中起到负向调控作用，能够抑制抗体与其他细胞发挥作用。这可能与实验对照组的研究对象选取有关。因为本研究的非进展组也是脑梗死患者而不是正常人群，也可能与本研究对象数量不足有关。

表4 Fisher判别模型对SIP的诊断价值

此外，本研究进展组外周血IgA水平较非进展组降低，提示SIP形成过程可能存在体液免疫功能下降。这与钱小燕等[10]报道一致。但两组外周血IgG与IgM水平比较差异无统计学意义，这与刘卫红等[11]认为的进展组外周血IgG水平低于非进展组的结论存在差异。这可能是因为本研究对照也属于脑梗死患者而不是正常人群，导致统计学上的差异。在评估疾病、干预病程时，对照组选取诊断为非进展性的急性脑梗死患者要比健康人群更具有临床参考价值。

单一的免疫分子指标对SIP的鉴别诊断较局限，也有许多有关多指标联合的研究报道。多指标联合诊断效能虽有所提高，但实用性不强。本研究以临床实用性为出发点，通过建立Fisher判别模型，拟合免疫分子参数指标，对SIP患者进行患病风险评估。将免疫分子水平代入Fisher判别模型进行比较，如果F进展组>F非进展组，则患者归属于SIP患者，反之则属于非进展组，即非SIP患者。将疾病诊断指标转变为量化及客观化的公式，具有可操作性以及临床实用性，而且具备较高的准确率以及特异性。随着研究数据的不断增加完善，判别公式可进一步修正，以便切合临床实际应用。

综上可见，基于外周血免疫分子参数建立的Fisher判别模型对评估SIP具有较高的诊断特异性及临床实用性。通过监测急性脑梗死患者免疫参数指标并代入Fisher判别模型进行评估，可为SIP的病程干预提供客观的诊疗判断依据。