儿童地中海贫血红细胞相关参数特征及其筛查意义

程昭科，王敏洁，陈丹虹

肇庆市广宁县人民医院检验科，广东 肇庆 526300

地中海贫血是由珠蛋白链合成不足或缺失导致的遗传性溶血性贫血，轻型地中海贫血无明显症状，无需特殊治疗，而中重型地中海贫血患儿可于出生后3～6个月出现肝脾肿大、黄疸以及发育异常、预后不良[1-2]。因此早期筛查地中海贫血有助于早期干预和治疗，改善患儿预后。聚合链反应(PCR)技术可检测地中海贫血基因，是诊断地中海贫血的可靠方法，但是价格昂贵、操作复杂，不适合基层医院筛查。地中海贫血患者红细胞参数可出现一定程度异常[3]，且红细胞参数检测方便、迅速、经济实惠。本研究通过检测红细胞参数，分析儿童地中海贫血红细胞相关参数的特征及其筛查意义，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017 年2 月至2019 年2 月肇庆市广宁县人民医院儿科收治的340例地中海贫血患儿为观察组，另选择同期在我院体检的200 例健康儿童为对照组。观察组患儿均经PCR 基因检测证实携带α或β地贫基因，并排除其他疾病导致的贫血以及巨幼红细胞贫血、缺铁性贫血、再生障碍性贫血等其他贫血类型。其中男性212例，女128例；年龄3～6岁，平均(4.25±0.36)岁。对照组儿童均排除血液疾病、免疫疾病、先天性疾病，其中男性126 例，女性74 例；年龄2～7岁，平均(4.06±0.31)岁。两组儿童的年龄、性别比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准，患儿家属均知情并签署同意书。

1.2 检测方法 采集两组儿童的静脉血2 mL于EDKA 抗凝试管，30 min 内采用日本希森美康Sys-5000mex 全自动血细胞分析仪进行血常规检测，流式细胞学检测红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血红蛋白A2(HbA2)参数。

1.3 诊断标准 MCV＜82 fL为阳性，MCH＜27 pg为阳性，RDW＞14.5%为阳性[4]，HbA2＜2.5%为α地中海贫血，HbA2＞3.5%为β地中海贫血[5]。联合诊断以其中一项阳性为阳性。以a表示真地中海贫血例数，b表示假地中海贫血例数，c 表示假非地中海贫血例数，d 表示真非地中海贫血例数，计算敏感度[a/(a+c)×100%]、特异度[d/(b+d)×100%]、阳性预测值[a/(a+b)×100%]、阴性预测值[d/(c+d)×100%]。约登指数=a/(a+c)+d/(b+d)-1。

1.4 统计学方法 应用SPSS 25.0统计软件进行数据分析，红细胞参数经Kolmogorov-Smirnov检验符合正态分布，以均数±标准差(x-±s)表示，组间比较采用独立样本t检验。计数资料比较采用χ2检验。采用受试者工作特征曲线(ROC)绘制红细胞参数诊断地中海贫血曲线。所有统计均采用双侧检验，检验水准α=0.05。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组儿童的红细胞参数比较 观察组患儿的HGB、MCV、MCH明显低于对照组，RDW、HbA2明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，但两组RBC比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 两组儿童的红细胞参数比较(±s)

表1 两组儿童的红细胞参数比较(±s)

组别观察组对照组t值P值例数340 200 RBC(×1012/L)5.06±0.51 5.02±0.26 0.236 0.815 HGB(g/L)103.26±5.26 121.26±3.65 6.352＜0.05 MCV(fL)68.25±6.35 85.25±3.68 9.562＜0.05 MCH(pg)21.03±3.19 28.51±5.56 5.261＜0.05 RDW(%)15.45±3.29 12.35±2.65 4.316＜0.05 HbA2(%)3.62±0.67 2.31±0.36 5.032＜0.05

2.2 观察组不同性别地中海贫血儿童红细胞参数比较 不同性别地中海贫血患儿间的RBC、HGB、MCV、MCH、RDW、HbA2 比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 观察组不同性别地中海贫血儿童的红细胞参数比较(±s)

表2 观察组不同性别地中海贫血儿童的红细胞参数比较(±s)

性别男性女性t值P值例数212 128 RBC(×109/L)5.03±0.51 4.98±0.26 0.956 0.103 HGB(g/L)103.73±5.42 102.35±5.09 0.356 0.536 MCV(fL)68.25±6.35 67.25±6.08 0.429 0.425 MCH(pg)21.49±3.42 22.42±5.30 0.065 0.953 RDW(%)15.61±3.35 16.85±3.95 0.719 0.361 HbA2(%)3.31±0.36 3.62±0.67 0.326 0.725

2.3 观察组不同基因分型地中海贫血儿童红细胞参数比较β型地中海贫血患儿的MCH、RDW、HbA2 明显高于α型地中海贫血儿童，差异均有统计学意义(P＜0.05)，但RBC、HGB、MCV 在不同基因分型地中海贫血患儿间比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表3。

表3 观察组不同基因分型地中海贫血儿童的红细胞参数比较(±s)

表3 观察组不同基因分型地中海贫血儿童的红细胞参数比较(±s)

基因型α型β型t值P值RBC(×1012/L)5.15±0.51 5.03±0.49 0.346 0.623 HGB(g/L)102.39±5.66 102.45±5.63 0.095 0.902 MCV(fL)68.15±6.49 68.03±6.42 0.009 0.993 MCH(pg)21.49±3.42 26.42±5.30 12.351＜0.05 RDW(%)14.52±3.02 17.42±3.66 6.592＜0.05 HbA2(%)3.01±0.43 4.56±0.87 5.492＜0.05

2.4 红细胞参数对地中海贫血的筛查价值 单独MCV 正确筛查地中海贫血患儿312 例，其中α型地中海贫血208 例，β型地中海贫血104 例，漏检28 例，MCV 诊断地中海贫血的灵敏度为91.76%，特异度为92.00%，阳性预测值为95.12%，阴性预测值为86.79%，约登指数为0.83。单独MCH 正确筛查地中海贫血患儿320例，其中α型地中海贫血224例，β型地中海贫血96例，漏检20例，MCH诊断地中海贫血的灵敏度为94.12%，特异度为96.00%，阳性预测值为97.56%，阴性预测值为90.57%，约登指数为0.90。单独RDW 正确筛查地中海贫血患儿248 例，其中α型地中海贫血164 例，β型地中海贫血84 例，漏检92 例，RDW 诊断地中海贫血的灵敏度为72.94%，特异度为72.00%，阳性预测值为81.58%，阴性预测值为61.02%，约登指数为0.45。单独HbA2 正确筛查地中海贫血患儿264 例，其中α型地中海贫血140 例(66.04%)，β型地中海贫血128 例(96.88%)，漏检76 例，HbA2 诊断地中海贫血的灵敏度为77.65%，特异度为84.00%，阳性预测值为89.19%，阴性预测值为68.85%，约登指数为0.62。联合MCV、MCH、RDW、HbA2 诊断地中海贫血332 例，漏诊8 例，联合诊断地中海贫血的灵敏度为97.65%，特异度为98.00%，阳性预测值为98.81%，阴性预测值为96.08%，约登指数为0.96，见表4。

表4 红细胞参数对地中海贫血的筛查效能

2.5 MCV、MCH、RDW、HbA2 诊断地中海贫血的ROC 分析 MCV、MCH 诊断地中海贫血的曲线下面 积(AUC)分 别 为0.788 (95%CI：0.701～0.876，P=0.000)、0.733 (95%CI：0.685～0.860，P=0.000)；RDW、HbA2 诊断地中海贫血的AUC 为0.686 (95%CI：0.595～0.777，P=0.006)、0.705(95%CI：0.610～0.799，P=0.000)，见图1、2。

图1 MCV、MCH诊断地中海贫血的ROC图

图2 RDW、HbA2诊断地中海贫血的ROC图

3 讨论

地中海贫血多见于我国南方地区，对儿童进行地中海贫血筛查有助于早期发现，规范治疗，有利于其生长发育，并可为成年后合理婚配进行指导，防止重症地中海贫血发生。地中海贫血在血液学方面表现与缺铁性贫血相似，均表现为小细胞低色素性贫血，且轻型地中海贫血症状较轻与临床其他贫血类型易混淆，因此有必要探索一种更为合理、简单、经济的筛查方法。

本研究观察组患者MCV、MCH、RDW、HbA2 与对照组存在明显差异，表现为MCV、MCH 降低和RDW、HbA2升高，与梅双等[6]、李莉艳等[7]报道结果一致。MCV 指单个红细胞平均体积，MCV 降低见于缺铁性贫血和地中海贫血，MCV升高则见于B族维生素及叶酸缺乏的大细胞性贫血。本研究MCV在性别之间和地中海基因分型之间均无明显差异性，说明MCV不受性别影响，对地中海贫血具有较高敏感性。诊断效能分析结果显示MCV诊断地中海贫血的灵敏度达90.00%以上，吴学东等[4]在报道中同样指出MCV诊断地中海贫血的灵敏度为95.1%，准确率达83.9%。MCH 代表每个红细胞HGB 含量，同MCV 一样MCH降低预示着小细胞低色素性贫血，血红蛋白疾病指南中推荐将MCH 作为地中海贫血筛查的主要指标，指出MCH 可筛查几乎所有地中海贫血基因携带者[8-9]。本研究MCH 诊断地中海贫血的灵敏度为94.12%，但是同MCV 一样诊断地中海贫血特异度较低，提示MCV、MCH诊断地中海贫血假阳性率偏高，分析原因为缺铁性贫血等低色素贫血MCV、MCH 同样表现出水平低下，导致鉴别难度增加。其次MCV、MCH在地中海贫血筛查中均存在漏检情况，因此单独以MCV、MCH筛查地中海贫血存在一定局限性[10]。

RDW 是反映红细胞体积异质性的定量指标，临床用于贫血的辅助诊断。骨髓造血功能障碍或贫血时，促红细胞生长素合成减少，铁代谢紊乱，骨髓生成大量幼稚红细胞，导致外周血RDW 增高，RDW 升高可引起红细胞变形性降低，进而引起微循环障碍，导致机体缺氧[11-12]。本研究观察组RDW高于对照组，且β型地中海贫血RDW高于α型地中海贫血，提示RDW对于地中海贫血基因分型有鉴别价值。诊断效能分析RDW 对地中海贫血筛查灵敏度为72.94%，尚不十分理想，特异度偏低，说明RDW在地中海贫血筛查中敏感度较低，且存在一定假阳性率。HbA2 是地中海贫血表型筛查重要指标[13-14]，HbA2 升高见于β型地中海贫血，降低见于α型地中海贫血，原因与α型地中海贫血α链合成减少、缺失有关[15]。但是单独将HbA2用于筛查地中海贫血存在敏感度、特异度低的问题，本研究HbA2 诊断地中海贫血的AUC 仅0.705，说明HbA2筛查地中海贫血效能尚待提高。为提高地中海贫血筛查准确率，本研究将MCV、MCH、RDW、HbA2联合筛查，一项阳性视为地中海贫血可能，结果将灵敏度和特异度均提高至95.00%以上，提示联合多项红细胞参数进行地中海贫血筛查是值得推荐和临床推广的筛查手段。

综上所述，地中海贫血患儿MCV、MCH、RDW、HbA2 参数存在明显异常，β型地中海贫血患儿MCH、RDW、HbA2改变更显著。