血清VILIP-1、尿酸、CRP及NSE水平对进展性卒中患者预后的预测价值*

郑守冰， 林振中， 叶小香

汕尾市第二人民医院(汕尾逸挥基金医院)检验科(广东汕尾 516600)

缺血性脑卒中患者由于脑动脉狭窄、闭塞而导致脑部供血障碍，使脑组织缺血坏死，具有较高的发病率、复发率、致残率、致死率，且预后较差[1]。进展性卒中(stroke in progressive，SIP)是缺血性脑卒中的一种，神经功能障碍呈阶梯性加重，病情需要6 h以上达到高峰，是缺血性脑卒中致死和致残的主因。因此，早期诊断SIP预后并给予针对性的治疗，在临床上具有重要意义。目前临床上采用影像学检查等相对比较滞后，可能会延误治疗，若能够从血清中寻求敏感度和特异度均较好的指标，对早期诊断SIP预后具有重要价值。视锥蛋白样蛋白-1(visinin-like protein-1，VILIP-1)在部分神经退行性疾病的发病、脑部损伤中起到重要作用，与脑梗死患者的认知损害有明显关系[2]。多数研究表明，尿酸(uric acid，UA)与脑血管疾病密切相关[3]。C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是机体非特异性炎症反应的敏感标志，是评估颅脑损伤预后的重要指标。神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)与脑损伤严重程度有关，是多种肿瘤疾病的诊断标志物。但VILIP-1、UA、CRP、NSE预测SIP患者预后的价值目前还尚不明确。本研究以SIP患者为对象，分析血清VILIP-1、UA、CRP、NSE对SIP患者预后的预测价值。现将研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年7月至2019年12月在我院治疗的60例SIP作为观察组，3个月后按照改良Rankin量表(Modified Rankin Scale，mRS)评分将患者分为预后良好组(mRS≤2)39例和预后不良组(mRS>2)21例，并选取同期60例健康体检者作为对照组。

纳入标准：(1)经CT、MRI、临床体征及症状确诊为SIP；(2)发病7 d内入院诊治；(3)预后生存时间>6个月；(4)本研究经医院医学伦理委员会批准；(5)患者签署知情同意书。

排除标准：(1)严重肝肾功能障碍者；(2)既往有心肌梗死、脑梗死病史者；(3)蛛网膜下腔出血、脑出血等其他脑部疾病者；(4)中途退出本研究者。

观察组中，男36例，女24例；年龄54～76岁，平均(62.85±6.54)岁；按照美国国立研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS评分对SIP进行分型，其中轻度22例，中度21例，重度17例。对照组中，男33例，女27例；年龄49～80岁，平均(63.57±9.58)岁。

1.2 方法 收集SIP患者入院时、健康体检者体检当天的空腹肘静脉血3 mL，并于3 000 r/min的离心机进行5 min的离心处理，收集上清液置于-80℃环境下保存，留待检测。采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定血清VILIP-1、UA水平，试剂盒源自广州科方生物实力企业；采用电化学发光法测定血清NSE水平，仪器源自罗氏全自动电化学发光免疫分析系统COBAS E602；采用微粒子增强透射免疫法测定CRP水平，试剂盒源自广州科方生物科技有限公司。

1.3 观察指标 (1)比较观察组和对照组、预后良好组和预后不良组的血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平；(2)分析血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平对SIP患者预后的预测价值。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件，患者的性别等计数资料用例数(n)表示，行独立样本2检验；血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平等计量资料采用表达，组间比较行独立样本t检验。诊断价值通过受试者工作特征(receiver operator characteristic curve，ROC)曲线评估，曲线下面积(area under curve，AUC)0.5～0.7时诊断准确性低，>0.7～0.9时有一定准确性，>0.9时准确性较高。将VILIP-1、UA、CRP、NSE纳入logistic回归分析，根据回归结果中的回归系数值拟合4项联合诊断的数值计算公式：4项联合=VILIP-1+[1.103/(-3.91)]×UA+[-0.496/(-3.91)]×CRP+[0.045/(-3.91)]×NSE。依据AUC及标准误，采用Z检验不同诊断因子AUC之间的差异。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平比较 观察组的血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平与对照组比较明显较高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。预后不良组的血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平与预后良好组比较明显较高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 观察组与对照组血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平比较

表2 不同预后患者血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平比较

2.2 血清VILIP-1、UA、CRP、NSE诊断SIP预后的价值分析 ROC曲线分析显示，VILIP-1、UA、CRP、NSE预测SIP预后的AUC分别为0.994、0.947、0.928、0.920，见表3、图1。进一步分析显示，4项联合预测SIP预后的AUC为0.996，预测患者预后准确性高。

图1 血清VILIP-1、UA、CRP、NSE诊断SIP预后的ROC曲线分析

Z检验显示：VILIP-1诊断的AUC明显高于UA、CRP、NSE诊断(Z=2.392、2.589、2.795，P=0.017、0.010、0.005)，联合诊断的AUC明显高于UA、CRP、NSE单项诊断(Z=2.494、2.667、2.870，P=0.013、0.008 0、0.004)。见表4。

表4 各因子单独诊断与联合诊断的AUC比较

根据最佳临界值，当VILIP-1高于9.460 μg/L时，其敏感度为95.2%，特异度为97.0%；当UA高于4.650 mg/dL时，其敏感度为100.0%，特异度为83.8%；当CRP高于3.545 mg/L时，其敏感度为100.0%，特异度为80.8%；当NSE为10.135 ng/mL时，其敏感度为100.0%，特异度为74.7%；四项指标联合诊断SIP的ROC曲线显示，其AUC、特异度均有所提高，分别为0.996、100.0%，见表3。

表3 血清VILIP-1、UA、CRP、NSE诊断SIP预后的AUC、敏感度、特异度比较

3 讨论

缺血性脑卒中是因脑部血液循环障碍而导致的局部神经功能缺失的心脑管疾病，每年约有200万人发病，50%～70%的患者会留下残疾，给患者带来沉重的经济负担[4-5]。数据资料显示，约有16%～43%的缺血性脑卒中是SIP[6]。对缺血性脑卒中的诊断，主要以影像学手段为主，但约有40%的患者无法采用影像学方法进行快速有效诊断和治疗[7]。有研究认为，脑部缺血后，炎性因子和白细胞的浸润会使脑组织受损更为严重，一些神经元细胞在血清中高表达与缺血性脑卒中的发生发展有关[8]。因此，本研究探讨血清VILIP-1、UA、CRP、NSE水平预测SIP患者预后的价值。

VILIP-1可进行细胞信号传导，其含有4个EF-臂保守结构域，与Ca2+结合后可发生不同的结构变化，从而传导不同的下游信号[9]。在脑组织中VILIP-1表达较高，尤其是皮层锥体细胞、室间隔、下丘脑和海马神经元(CA1区和CA4区锥体细胞)、小脑高尔基氏细胞和颗粒细胞、星状和齿状核神经元中呈高表达。VILIP-1参与了神经元细胞的信号调节系统，有研究认为，VILIP-1与神经细胞的凋亡、p38、JNK/MAPK 等信号传导、细胞骨架的形成、突触可塑性、胰岛素分泌、调控乙酞胆碱受体、颅脑肿瘤的发生等相关[10]。本研究显示，预后不良组血清VILIP-1水平[(12.43±1.37)μg/L]显著高于预后良好组[(7.38±1.62)μg/L]和对照组[(1.06±0.27)μg/L]；ROC曲线显示，血清VILIP-1诊断SIP预后的AUC为0.994，敏感度、特异度分别为95.2%、97.0%。提示VILIP-1在SIP呈高表达，且对SIP预后有一定诊断价值。

UA是机体内嘌呤类化合物代谢的终产物，在黄嘌呤氧化酶的作用下，黄嘌呤与次黄嘌呤可合成UA，但在此过程中会产生氧自由基，对内皮造成一定的损伤。UA水平的增高影响缺血性脑卒中的机制包括如下[11-13]：(1)高尿酸血症与脑血管危险因素存在相互作用，如高脂血症、高血压等与血管危险因素并存。(2)可使动脉粥样硬化形成及发展加快，从而对缺血性脑卒中造成严重影响。(3)血尿酸可降低血浆中抗氧化物浓度，使自由基清除能力逐渐被削弱。(4)血尿酸具有激活血小板的作用，从而引起凝血级联反应，导致形成血栓。(5)血尿酸可导致血管内皮功能出现紊乱，使内皮素分泌量增加，一氧化氮减少。本研究显示，预后不良组血清UA水平[(7.96±2.48)mg/dL]显著高于预后良好组[(4.52±1.79)mg/dL]和对照组[(1.29±0.37)mg/dL]；ROC曲线显示，血清UA诊断SIP预后的AUC为0.947，敏感度、特异度分别为100.0%，83.8%。提示UA在SIP呈高表达，且对SIP预后有一定诊断价值。

CRP是参与动脉粥样硬化形成的重要炎性因子，有关研究表明，缺血性脑卒中患者的炎症反应在继发性神经元损伤方面具有重要作用，可扩大缺血区梗死的范围，使继发性脑损害进一步加重[14-15]。缺血性脑卒中患者若CRP呈现出不断上升趋势，则易引发新的血管事件，甚至造成患者死亡。本研究显示，预后不良组血清CRP水平[(5.95±1.79)mg/L]显著高于预后良好组[(3.55±1.03)mg/L]和对照组[(1.87±0.52)mg/L]；ROC曲线显示，血清CRP诊断SIP预后的AUC为0.928，敏感度、特异度分别为100.0%、80.8%。提示CRP在SIP呈高表达，且对SIP预后有一定诊断价值。

NSE是一种糖酵解特异性蛋白，存在于神经内分泌系统及神经组织中，参与神经细胞成熟及分化过程，在缺氧的情况下NSE可保护神经细胞，使其免受损害[16-17]。本研究显示，预后不良组血清NSE水平[(16.37±4.21)ng/mL]高于预后良好组[(10.28±3.31)ng/mL]和对照组[(6.81±2.27)ng/mL]；ROC曲线显示，血清NSE诊断SIP预后的AUC为0.920，敏感度为100.0%，特异度为74.7%。提示NSE在SIP呈高表达，且对SIP预后有一定诊断价值。此外，本研究联合诊断数据显示，VILIP-1、UA、CRP、NSE这4项联合诊断SIP预后的AUC为0.996，明显高于单项检测，诊断准确性较高，且敏感度、特异度分别为95.2%、100.0%，可对单项检测中敏感度或特异度低的问题进行弥补。因此，临床上可加强血清VILIP-1、UA、CRP、NSE的监测，提高综合诊断效能，从而改善SIP患者的预后。

综上所述，血清VILIP-1、UA、CRP、NSE在SIP呈高表达，对其预后均具有诊断价值，4项联合的诊断准确性最高。