自体富血小板血浆注射联合光疗治疗雄激素性脱发临床观察

刘文丽，王莉，高田原，田琼，张子茜，穆欣，张键

（西安交通大学第一附属医院，陕西西安710061）

雄激素性脱发（AGA）是以头顶部毛囊进行性微型化为特征的男性型脱发[1-2]。临床以颞叶和顶叶区域毛发密度下降、毛发纤细、稀疏，毛囊萎缩，逐渐微型化，为主要表现，而枕骨区保留完好，呈特征性的“马蹄铁”型[3]，可伴有头皮油腻、头屑增多、瘙痒为主要表现，不仅影响美观，还会影响其心理健康和社交生活[4]。目前多采用非那雄胺、外用米诺地尔酊和毛发移植等措施来治疗AGA，但由于毛发整体生长周期的改变，治疗效果欠佳[5]。富血小板血浆（PRP）是通过离心的方法从自体血中分离提取血小板浓缩物，储存于血小板α颗粒中的多种炎性调节因子和生长因子有调节细胞的增殖、分化和血管生成[6]，且临床报道中未见免疫排斥反应，操作制备相对简单、对机体损伤小等优点，是近年来在脱发领域新兴的治疗方法[7]，引起了学者们的研究热潮，有广泛的应用前景。研究证实，激光治疗通过局部皮肤刺激，改善毛发生长达到自我修复[8]。本研究采用局部注射PRP联合光疗治疗AGA取得满意疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 诊断标准 参照《中国人雄激素性脱发诊疗指南》[9]：①双侧对称，呈缓慢进展的模式化脱发，男性以额颞部发际线逐渐后退，大部分从前额两侧鬓角开始，呈M型逐渐向头顶延伸。最终头顶部头发可完全脱落，或仅遗留少量毳毛，部分患者耳后发际头发也可出现逐渐脱落。女性以头顶部毛发进行性减少和变细，少部分表现为弥漫性头发变稀，发际线不后移为主要表现；②AGA患者拉发试验通常为阴性，而斑秃、休止期脱发或生长期脱发的活动期拉发试验可为阳性；③皮肤镜下检查为毛发干粗细不均，直径异质性大于20%，可见毳毛增多（毳毛与终毛比例失调，终毛：毳毛≤2：1）；④三代直系亲属中有AGA症状。

1.1.2 病例选择 纳入标准：①符合诊断标准；②在近6个月内未使用口服及外用药物治疗；③同意参与本项研究，并签署知情同意书。排除标准：①合并严重内科疾病，或伴有严重的自身免疫性疾病或感染性疾病患者；②因内分泌功能障碍性疾病，皮肤病如麻风、梅毒等以及因药物、外伤等所致脱发者；③脱发区域破溃；④拒绝接受该治疗方案者。

1.1.3 临床资料 选取2018年6月—2019年10月西安交通大学第一附属医院皮肤科门诊60例AGA患者随机分为治疗组（32例）和对照组（28例）。治疗组男20例，女12例，年龄18～55岁，平均（35.26±8.17）岁；病程 1～10 年，平均（6.41±2.37）年；基本型和特定型分级法（Basic and specific classification system，BASP）分类[10]中轻度 15 例，中度 17 例；对照组男 16例，女12例，年龄18～55岁，平均（36.45±8.12）岁；病程 1～10 年，平均（6.18±2.24）年；BASP 分类中轻度11例，中度17例；2组患者性别、年龄、病程、BASP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性见表1。所有患者治疗前血小板计数均正常，本项目经我院伦理委员会审核通过，且所有患者治疗前被告知治疗详情，并签署知情同意书。

表1 2组患者一般资料比较 （±s）

表1 2组患者一般资料比较 （±s）

平均病程男 女 轻度 中度治疗组 2 0 1 2 3 5.2 6±8.1 7 6.4 1±2.3 7 1 5 1 7对照组 1 6 1 2 3 6.4 5±8.1 2 6.1 8±2.2 4 1 1 1 7 χ 2/t 0.7 9 3 0.7 2 6 0.5 5 4 0.6 0 9 P 0.4 3 7 0.4 3 1 0.6 4 1 0.3 7 1组别 性别（例） 平均年龄（岁）平均病程（年）

1.2 方法

1.2.1 治疗组 给予自体PRP注射联合光子治疗仪，治疗后进行6个月随访，对患者效果进行评估。

1.2.1.1 自体PRP制备 研究发现，低温能延长凝血时间便于PRP操控[11]，因此，本研究团队选取-20℃左右制备室严格无菌操作。取患者肘静脉血30 mL，注入枸橼酸钠抗凝剂的离心管中，摇匀后以离心半径15 cm，3 000转/min离心10 min后，全血分为3层，最上层为上清液，底层为红细胞，中间浅黄色层即PRP层，抽取最上层上清液至分界面下3～5 mm及下层红细胞至分界面上3～5 mm并弃之，可获得交界层约3 mL PRP血浆备用。经检测，制备的PRP血小板计数为全血的（6.3±0.4）倍。加入10%氯化钙溶液约0.5 mL做为激活剂，摇匀后采用2 mL一次性针管将其直接注入头皮真皮层，选取35个注射点，每个注射点约0.1 mL。每个月注射1次，4次为1个疗程。

1.2.1.2 光子治疗仪 使用Carnation-26型光子治疗仪（深圳普门科技有限公司，批号：粤食药监械（准）字2013第2260118号）照射1次/d，10 min/次，连续治疗4个月。

1.2.2 对照组 给予传统米诺地尔酊治疗，治疗后进行6个月随访，对患者效果进行评估。每次1 mL米诺地尔酊（规格：5%，浙江万晟药业有限公司生产，批号：国药准字H20010714），均匀喷涂在患处，2次/d，连续涂抹4个月。

1.3 疗效评价标准

1.3.1 主观指标 分别于治疗前、治疗后、治疗后6个月采用标准7分制[12]对头皮症状毛囊炎、油脂分泌、头屑、瘙痒改善程度进行评分。

1.3.2 客观指标

1.3.2.1 照片评价 分别于治疗前、治疗后、治疗后6个月由我科专人、专业拍摄设备在患者头顶斜上方45°角，头顶正上方，分別拍摄正面观、斜面观、垂直面观3个角度的照片，在盲态下比较头发生长或脱落情况，并进行综合评价。

1.3.2.2 毛发镜评价 患者取坐位，使用毛发镜采集患者70倍放大的鬓角、前额、顶部3个区域内毛囊密度、被毛密度、顺发速率。

1.3.2.3 患者自我主观评价 分别于治疗后、治疗后6个月对患者秃发、头屑、油脂分泌等情况进行问卷调查，分为 4级[13]：①非常满意（+2）；②基本满意（+1）；③不满意（-1）；④症状较前明显加重（-2）。并详细记录发生的不良反应及起止时间、严重程度。

1.4 不良反应 在12个月随访期间，记录注射部位反应（如发红、压痛、肿块和疼痛）及全身症状。

1.5 统计学分析 采用SPSS 20.0进行数据分析，定量资料以均数±标准差（±s）表示，2 组间年龄、病程、主观指标、客观指等计量资料采用独立样本t检验；性别、BASP分级及并发症发生率采用卡方检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 2组患者治疗前后头皮症状评分比较 2组治疗前头皮症状评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。2组治疗后、治疗后6个月毛囊炎、油脂分泌、头屑、瘙痒评分较治疗前显著提高（P＜0.05）；且治疗组毛囊炎、油脂分泌、头屑、瘙痒评分优于对照组（P＜0.05）。见表 2。

2.2 2组患者治疗前后毛发镜指标对比 2组治疗前毛发镜指标比较差异无统计学意义（P＞0.05）。2组治疗后、治疗后6个月毛囊密度、被毛密度较治疗前显著提高（P＜0.05）、顺发速率较治疗前显著降低（P＜0.05）；且治疗组毛囊密度、被毛密度、顺发速率优于对照组（P＜0.05）。见表3。

2.3 2组治疗后满意度比较 治疗组治疗后、治疗后6个月满意度为93.7%和96.9%；对照组治疗后、治疗后6个月满意度为71.4%和85.7%；治疗后2组满意度经秩和检验，Z=-2.434，P=0.015＜0.05；治疗后6个月2组满意度经秩和检验，Z=-1.983，P=0.047＜0.05。见表 4。

2.4 不良反应 60例患者均随访，其中治疗组4例患者在注射过程中出现轻微疼痛感，注射后自行缓解。

3 讨论

研究表明，AGA脱发的进展速度及病情因人而异，后期严重影响患者形象及美观[14]。发病机制复杂，与雄激素依赖的多基因遗传密切相关[15]；同时相关研究发现，该病患者血液黏稠度增高、红细胞变形能力下降，与血液流变学变化有相关性[16]。口服非那雄胺能够促进毛发生长、减轻患者头皮瘙痒、油腻自觉症状，有控制病情发展优势。但长期随访发现，该药不良反应较大，且患者依从性低[17]；单纯外用药物疗效欠佳，毛发移植存在一定手术风险及术后恢复差等问题。近年来，随着人们生活习惯及生活方式改变，AGA发病率持续增高，且呈年轻化趋势，因此，为了解决人们对美的要求，寻求一种操作简便、疗效确切的治疗方案尤为迫切。

研究证实，正常生物组织的自身修复能力是通过调动生长因子得以实现[18]。既然生物组织具备自身修复的潜能，是否有办法将组织自身修复能力调动出来，而为生物体自身修复所用呢？PRP是Whitman等[19]1997年为促进创后愈合修复而提出来的一种新型治疗方案，正是这一类技术在动物实验及临床领域已广泛应，且疗效确切。PRP有以下优势：①PRP是通过离心自体全血而得到的含高浓度血小板的血浆，富含有大量的血小板源性生长因子、转化生长因子、表皮生长因子及血管内皮细胞生长因子能够，促进组织修复细胞的增殖分化；含大量纤维蛋白为修复细胞提供良好支架，刺激组织再生；含有少量白细胞可预防感染，清除坏死细胞，减轻头皮的炎性反应；②多数生长因子是从动物身上提取，用于人体治疗存在一定的排异反应和疾病传播，而PRP是自源性的，无免疫排异反应，安全性高，伦理学争议小；③纯化的生长因子多为液态存在，易流失和挥发，且价格昂贵，限制了大量临床使用；而自体PRP含高浓度的生长因，制作简单，价格低廉，大量临床应用可行性高；④PRP所含的多种生长因子与正常生理浓度比例相近，符合人体天然修复需求；⑤PRP通过调动机体自身修复能力和启动免疫防御系统，预防和治疗感染。Gentie等[20]对23例AGA患者进行随机对照试验研究，在患者一侧头皮皮内注射PRP，1个月1次，连续注射3个月，另一侧应用安慰剂，结果发现治疗侧平均毛发数量、毛发密度、终毛密度增长明显优于对照组（P＜0.05）。

表2 2组患者治疗前后头皮症状评分比较 （分，±s）

表2 2组患者治疗前后头皮症状评分比较 （分，±s）

注：与治疗组治疗前比较 *F=15.426，P＜0.05；**F=12.443，P＜0.05；#t=0.741，P＞0.05；与对照组治疗前比较，##F=18.721，P＜0.05；△F=13.569，P＜0.05；与治疗组治疗后比较，△△t=7.264，P=0.027＜0.05；与治疗组治疗后 6 个月比较，▲t=6.846，P=0.035＜0.05.

治疗后 治疗后6个月毛囊炎 油脂分泌 头屑 瘙痒 总分 毛囊炎 油脂分泌 头屑 瘙痒 总分 毛囊炎 油脂分泌 头屑 瘙痒 总分治疗组 0.3 8±0.2 9 0.6 1±0.3 7 0.6 5±0.2 4 0.3 7±0.1 8 1.8 5±0.9 2 1.9 6±0.5 2 1.9 3±0.4 9 2.0 5±0.5 4 2.1 4±0.3 5 6.4 9±1.2 4* 2.8 4±0.1 5 2.7 2±0.1 6 2.8 6±0.1 9 2.7 2±0.2 1 9.1 5±0.6 7**对照组 0.3 7±0.2 5 0.6 4±0.3 3 0.6 3±0.2 7 0.3 8±0.1 7 1.8 4±0.8 7#1.6 5±0.3 1 1.6 3±0.2 7 1.7 1±0.3 5 1.5 8±0.2 6 4.5 6±1.0 7##△△ 2.3 2±0.1 1 2.4 7±0.1 4 2.2 8±0.1 3 2.4 1±0.1 5 8.1 6±0.4 4△▲组别 治疗前

表3 2组患者治疗前后毛发镜指标对比 （±s）

表3 2组患者治疗前后毛发镜指标对比 （±s）

注：毛囊密度：与治疗组治疗前比较 *F=21.587，P＜0.05；**F=19.684，P＜0.05；#t=0.882，P＞0.05；与对照组治疗前比较，##F=29.576，P＜0.05；△F=21.433，P＜0.05；与治疗组治疗后比较，△△t=8.967，P=0.013＜0.05；与治疗组治疗后 6 个月比较，▲t=6.532，P=0.041＜0.05；被毛密度：与治疗组治疗前比较 *F=32.497，P＜0.05；**F=28.061，P＜0.05；#t=0.761，P＞0.05；与对照组治疗前比较，##F=44.835，P＜0.05；△F=32.695，P＜0.05；与治疗组治疗后比较，△△t=8.942，P=0.015＜0.05；与治疗组治疗后 6 个月比较，▲t=5.213，P=0.045＜0.05；顺发速率：与治疗组治疗前比较 *F=15.243，P＜0.05；**F=9.426，P＜0.05；#t=0.961，P＞0.05；与对照组治疗前比较，##F=19.321，P＜0.05；△F=13.532，P＜0.05；与治疗组治疗后比较，△△t=6.732，P=0.038＜0.05；与治疗组治疗后 6 个月比较，▲t=5.072，P=0.048＜0.05。

顺发速率（%）治疗组 7 4.3 8±6.4 2 1 0 1.5 3±5.3 9 2 2.2 8±3.1 4 9 1.2 5±7.6 5* 1 2 4.7 2±7.6 3* 8.3 6±1.7 5* 9 8.3 7±8.6 3**1 2 9.5 7±9.1 3** 6.2 5±1.3 4**对照组 7 4.2 1±6.8 4#1 0 2.5 8±7.6 4#2 2.5 4±3.0 7#8 3.2 1±7.5 3##△△ 1 1 4.6 3±8.0 5##△△ 1 0.2 5±2.1 8##△△ 8 7.1 6±7.8 4△▲ 1 2 3.5 1±9.2 4△▲ 8.6 5±2.0 2△▲组别治疗前 治疗后 治疗后6个月毛囊密度（c m 2）被毛密度（c m 2）顺发速率（%）毛囊密度（c m 2）被毛密度（c m 2）顺发速率（%）毛囊密度（c m 2）被毛密度（c m 2）

表4 2组治疗后、治疗后6个月满意度比较 例（%）

低能量激光作为一种常用的光疗手段，在治疗AGA中逐渐得到临床认可[21]。临床常用低功率红光（600～700 nm）波段照射局部组织，使局部产生热效应，继而引起一连串的皮肤生化反应，刺激皮肤进行自我修复。可能的机制为直接刺激角质形成真皮乳头细胞、诱导细胞产生生长因子、减轻炎反应，从而活化休止期毛囊重新进入生长期，使生长期延长，加快毛发生长速率[22]。Meephansan等[23]在一项队列研究中对23例AGA患者给予LT治疗，最终经组织学评估表明治疗后生长期毛囊计数、生长期/休止期比值明显增加，可能的机制为局部红外光照射激活胰岛素样生长因子（IGF）-1，调控 Wnt/β-catanin信号轴使毛囊由休止期向生长期转变，启动毛囊形成和刺激新发再生。

本研究中阳性对照药物米诺地尔酊作为治疗AGA的一线外用药，有疗效确切、安全性高优势[24]。可能机制为[25]：①促进血管新生和毛细血管窗开放增加局部血供；②降低细胞内钙离子的浓度、延长毛囊生长期和刺激毛囊上皮细胞的增殖开放ATP敏感的钾通道；③抑制雄激素受体（AR）应答活性并降低人毛发真皮乳头细胞中的AR蛋白稳定性来抗雄激素作用；④激活前列腺素H合成酶（PGHS），延长毛囊的生长期，影响前列腺素（PGs）的代谢对毛囊起保护作用；⑤通过激活人毛乳头细胞中Wnt/β-链蛋白信号通路维持毛乳头邻近细胞的增殖及毛干的形成。以此作为阳性对照药物更能说明PRP治疗AGA优势，为临床治疗提供更有力数据支持。

研究结果表明2种联合方法治疗AGA在改善临床毛囊炎、油脂分泌、头屑、瘙痒改善及毛囊密度、被毛密度、顺发速率等方面疗效满意，且自体PRP注射联合光子治疗优于传统米诺地尔酊联合低能量激光治疗。在本临床研究中未发现头皮真皮注射PRP出现过敏、发热、血肿和异常组织增生等不良反应，初步提示了本研究中自体PRP治疗的安全性。联合头皮外光疗起到“内外合治”之效果，从根本上解决AGA患者毛发稀疏、头皮瘙痒、油脂分泌等临床表现。且治疗中PRP制备简便、未发现排异反应及感染，安全可靠有效，为临床治疗AGA提供新思路和循证医学依据，值得推广。