MTHFR C677T基因多态性与高血压病患者颈动脉斑块及内膜厚度的关联性研究

鲁大胜，章宏祥,吴小雷，汪 娟，贺常萍，杨凌飞

(1.皖南医学院第二附属医院 心内科，安徽 芜湖 241000；2.皖南医学院 血管性疾病研究中心，安徽 芜湖 241000)

高血压病是常见的心血管疾病，随着生活节奏及人口老年化的加快，高血压病的发病率、患病率呈逐年上涨的趋势，在全球的发病率达10%[1]。有报道指出到2025年全球将有16亿高血压病患者[2]。高血压刺激血管壁且损伤血管内皮，引起动脉粥样硬化，最终可导致严重心脑血管并发症。对于早期动脉粥样硬化的防治是减少高血压病靶器官损害的关键环节。目前已有多项研究证实患者血清同型半胱氨酸水平(homocysteine，Hcy)与颈动脉粥样硬化、高血压病及脑梗死发生呈正相关[3-4]。N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)是Hcy在体内代谢转化的关键酶之一，MTHFR C677T 基因突变，即胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)置换，CT或TT基因型频率增加可导致体内叶酸代谢异常，引起高同型半胱氨酸血症[5]。而高血压病与高Hcy共同作用可加剧血管病变。本研究通过检测高血压病患者MTHFR C677T 基因多态性及颈动脉超声，探讨MTHFR C677T 基因突变与高血压病患者颈动脉硬化的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2019年12月～2020年2月在皖南医学院第二附属医院就诊的高血压病患者86例，平均年龄(65.1±11.5)岁，其中男性49例(57.0%)，女性37例(43.0%)。纳入标准:符合原发性高血压病诊断，排除既往有颈动脉内膜剥脱术或支架安装术者，以及近期服用叶酸制剂者。本研究经医院伦理委员会批准,并征得患者知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 一般临床资料采集 住院期间通过病史采集患者的基本信息，包括糖尿病病史、吸烟史、性别及年龄等。

1.2.2 标本采集及基因测定 住院期间采集患者外周静脉血，送至我院药剂科，然后运用荧光染色原位杂交分析技术对样本进行MTHFR C677T 基因多态性检测，具体操作依照试剂说明书逐项进行。

1.2.3 颈动脉超声检查 所有患者均接受颈动脉超声检测，由两名高年资超声科医师采用GE彩色多普勒超声诊断仪完成检查。分别测量双侧颈总动脉近端至远端、颈内外动脉分叉处，颈内动脉及颈外动脉近端至远端内-中膜厚度，检查指标包括颈动脉内-中膜厚度(intima media thickness，IMT)以及是否有斑块形成，测量3次，取平均值[6]。以双侧IMT平均值作为该样本最终值纳入统计。

1.2.4 血液生化检查 入院第2天采集患者外周静脉血送至检验科，检测患者血脂、肾功能、血糖等生化指标。

2 结果

2.1 颈动脉斑块组与对照组的基线资料比较 将86例患者按照颈动脉超声检查结果分为斑块组及正常对照组。斑块组患者平均年龄大于对照组患者(P<0.05)，两组在性别、糖尿病病史、吸烟史及载脂蛋白a1/b上差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 对照组与斑块组的基线资料比较

2.2 颈动脉斑块组与对照组MTHFR C677T CC、CT、TT基因型频率比较 MTHFR C677T CC、CT、TT基因型在对照组的分布频率分别为50.0%、40.0%及10.0%；在斑块组的分布频率为19.6%、64.3%及16.1%。结果显示，将携带缺陷基因T的CT及TT合并为基因突变型，而CC基因型作为野生纯合子型，则对照组野生纯合子型、基因突变型各占50.0%；斑块组野生纯合子型占19.6%，基因突变型占80.4%，两者在两组分布差异有统计学意义(χ2=8.535，P=0.003)。校正了年龄混杂因素后，Logistic回归显示基因突变型(OR=5.171,95%CI：1.717～15.572)是发生斑块的独立危险因素。

2.3 MTHFR C677T基因突变与颈动脉IMT及Hcy关系 基因突变组(CT/TT)的平均IMT大于野生纯合子组(CC)，差异有统计学意义(P<0.05)；而基因突变组与野生纯合子组的性别组成、年龄、吸烟史、糖尿病史以及载脂蛋白a1/b差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。相关性分析显示，IMT与MTHFR C667T的基因型呈正相关(rs=0.266，P=0.013)。

本研究共有52名患者同时完成叶酸MTHFR C677T基因及血Hcy检测。携带T基因的基因突变组(n=37)平均Hcy水平(18.80±15.81)μmol/L高于未携带T基因的野生纯合子组[n=15，(12.37±4.17)μmol/L]，但差异无统计学意义(t=1.543，P=0.129)。

表2 基因突变组与野生纯合子组的临床资料比较

3 讨论

Hcy水平与高血压病、冠心病、缺血性脑卒中等心脑血管病变密切相关。高血压合并高同型半胱氨酸的患者更易出现早期颈部动脉粥样硬化[7]。因此，对高同型半胱氨酸的预防至关重要。Hcy在体内的代谢受到叶酸代谢的影响，而MTHFR C677T 基因突变会导致叶酸代谢异常，进而可增加血Hcy水平，引发心脑血管事件[8]。本研究把颈部动脉粥样硬化与MTHFR C677T基因突变相关联，探讨MTHFR C677T基因突变与颈部动脉粥样硬化以及颈动脉IMT的关系。本研究中颈动脉斑块组的患者年龄高于正常组，这符合动脉硬化发展的自身规律。但两组间在其他高危因素方面，如糖尿病病史、吸烟史以及载脂蛋白水平等差异无统计学意义。组间卡方分析显示斑块组的患者携带MTHFR C677T缺陷基因T的比例更高，多因素分析在校正了年龄等混杂因素后，仍显示MTHFR C677T基因突变是发生颈动脉粥样斑块的独立危险因素。

本研究的结果与既往研究基本一致。邹宏丽等[9]研究显示MTHFR C677T基因多态性，特别是TT基因型与高血压病患者颈动脉粥样斑块形成有关,且MTHFR C677T基因突变是通过高Hcy发挥其促动脉硬化作用。 本研究不仅说明了MTHFR C677T基因多态性与颈动脉斑块形成的关系，同时也评估了颈动脉IMT与MTHFR C677T基因突变的相关性。与之前研究不同的是，在本研究中，尽管有升高趋势，但未观测到MTHFR C677T基因突变与Hcy水平的显著相关性。造成这一结果的原因可能为：①最终纳入分析的样本量较少，因此未能得到统计学显著性；②人体内Hcy的水平受到叶酸摄入的影响[10-11]。虽然本研究未纳入近期服用叶酸制剂的患者，但并不能排除食物中叶酸摄入的差异。因此，即使携带T缺陷基因，但如果患者近期饮食结构富含叶酸，则即时Hcy水平可能并不升高。因此Hcy的水平具有一定的波动性，而MTHFR C677T基因突变则相对来说可更稳定地预测患者的疾病风险。

综上所述，高血压病患者的MTHFR C677T基因突变与其颈动脉粥样硬化斑块形成及颈动脉IMT增加相关。MTHFR C677T基因突变是颈动脉斑块形成的独立危险因素之一。