抚州市CoxA6 的流行特征及病原核酸检测结果分析

朱智龙，黄凡卿，刘华振

（1.抚州市疾病预防控制中心，江西 抚州344000；2.乐安县疾病预防控制中心，江西 抚州344300）

手足口病 （hand,foot,mouth disease, HFMD）是肠道病毒属A 组肠道病毒引起的发热出疹综合征,主要感染病原体是肠道病毒71 型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A16 型(Coxsackie virus A16,CoxA16), 近年来CoxA6 和CoxA10 感染也呈现上升趋势。 如继续仅开展手足口病的肠道病毒通用型、EV71 型、CoxA16 型常规核酸检测难以达到预期效果。 我市对非EV71、非CoxA16 型肠道病毒阳性标本进一步开展CoxA6 和CoxA10 型核酸检测，完善手足口病病原谱,掌握其流行规律。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2018 年7 月至2019 年6 月, 抚州市以县（区）为单位,采集初次就诊手足口病病例咽拭子样本696 例。 其中男性435 例，女性261 例，年龄7 个月~5 岁。所有标本均按要求运送和保存。

1.2 主要试剂及器材 RNA 提取采用Promega 核酸自动纯化仪及配套试剂盒；荧光定量EV、EV7l、CoxAl6、COXA6 和COXA10 型核酸检测试剂盒由深圳生科原生物股份有限公司提供； 扩增仪为BIO-RAD CFX96 Real-Time System。

1.3 病毒核酸检测 核酸提取按照Promega 公司的提取试剂盒说明书提取病毒RNA。EV、Ev7l、CoxA l6、COXA6 和COXA10 型核酸检测反应体系和条件按照深圳生科原公司HFMD 病毒荧光定量RTPCR 检测试剂盒说明书操作， 扩增条件为反转录和预变性：50℃,10min,95℃,3min; 扩增：95℃，5s,55℃，60s, 循环数45 次， 检测通道有明显扩增曲线， 检测结果Ct≤35.5， 有明显指数增长为阳性，35.538.5 或无Ct 为阴性。

1.4 统计学处理 使用Excel 2007 及SPSS l7.0 软件进行统计分析。

2 结果

2.1 核酸检测结果 2018 年7 月－2019 年6 月共采集的696 例HFMD 试子样本进行Real-time PCR 检测。 检出肠道病毒阳性样本396 例, 其中EV71 阳性19 例，CoxA16 阳性157 例，非EV71、非CoxA16 型阳性220 例，占总阳性的55.56%。 进一步分型,检出CoxA6 阳性138 例,CoxA10 阳性4 例,其它未分型肠道病毒阳性78 例，见表1。CoxA6 阳性病例中,男性97 例，女性41 例(χ2=4.46，P<0.05)；9-11 月和4 月发病数最多,分别占全年的12.32%、15.94%、25.36%和12.32%。

2.2 不同年龄CoxA6 阳性HFMD 分布 <1 岁、1岁、2 岁、3 岁、4 岁、5 岁CoxA6 阳性HFMD 占发病总数的比例分别为13.04%(18/138)、44.93%(62/138)、28.26%(39/138)、6.52%(9/138)、5.80%(8/138)、1.45%(2/138)；年龄最小的7 个月,最大的5 岁。1 岁的发病人数最多，2 岁的次之，见图1。

2.3 不同县区CoxA6 阳性HFMD 分布 全市各县(区)均有CoxA6 阳性的HFMD 患者，发病数水平差别较大，从高到低依次为崇仁县、临川区、乐安县、南丰县、金溪县、资溪县、广昌县、黎川县、宜黄县、东乡区和南城县，见图2。

表1 2018.7-2019.6 抚州市HFMD 病毒核酸检出情况的比较

图1 CoxA6 阳性HFMD 不同年龄分布情况

3 讨论

图2 CoxA6 阳性HFMD 县（区）分布情况

引起手足口病的肠道病毒有20 多种，其中以CoxA16 型和EV71 型最为常见[1,2]。近年来，CoxA16和EV71 型肠道病毒流行在减弱，未分型肠道病毒呈不断增长趋势[3,4]；各地未分型肠道病毒中又以C oxA6 型居多,也存在CoxA10 型[5,6]。 通过此次研究发现，非EV71、非CoxA16 型阳性已经占到总阳性的55.56%，而CoxA6 是非EV71、非CoxA16 型阳性的主要致病毒株,占62.73%(138/220)，CoxA10 型检出4 例。 CoxA6 型阳性患者全年除了2 月份外，均有发病，高峰期在9-11 月份[7]，4 月份有个小高峰。 可能与抚州市的空气潮湿，气候温暖等自然因素有关，适于病毒繁殖，九月份又是大批新生入学的开学期，加之室内空气流通性较差，均易于疾病传播。

此次年龄组研究发现，CoxA6 阳性HFMD 的儿童年龄集中在1 岁和2 岁组,发病的平均年龄比较小,与黄浩等人的报导相似[8,9]。 提示我们幼儿应是预防CoxA6 阳性HFMD 的重点人群。 其原因为此阶段儿童对病毒的防御能力相对较差, 喜欢触摸、抓握和舔食东西等因素有关,导致发病率高。随着年龄增长，好的卫生习惯增强,患病率逐渐下降，所以散居儿童明显高于托幼儿童。 这也与幼儿园加强防控措施，群众就诊意识增强密切相关。 在性别分布上，男性多于女性，差异有统计学意义(χ2=4.46，P<0.05)，与张颖等人的报导相似[10]男孩更加好动，更容易通过消化道感染病毒。

抚州市CoxA6 阳性HFMD 呈现明显区域性分布，2018 年9 月－2019 年6 月,崇仁县阳性率最高，其次为临川区和乐安县，与崇仁县均为相邻，城乡结合部，流动人口和非法个体诊所较多，因此较易造成流行。

总之，HFMD 的传染源是病人和健康带毒者，随着未分型肠道病毒不断增长,分析手足口病新的病原谱及其流行规律，为我市形成比较实用，有效的手足口病防控体系提供科学依据,对疾病的早期防控和治疗有重要意义。