周 蜜,黄 洁,雷红梅
(九江市第三人民医院检验科,江西 九江 332000)
分枝杆菌感染引起的结核病和非结核病是严重危害人类健康的慢性呼吸道传染病,在全球范围内流行。结核病是全世界十大死因之一,也是我国重点控制的乙类传染病之一[1]。2017年,估计有1000万人新感染结核:580万男性,320万女性,100万儿童,中国估计有88.9万人新感染结核,仅次于印度,为世界第二大结核病高发国家[2]。近年来,非结核分枝杆菌(NTM)感染呈快速增长趋势,并已成为威胁人类健康的重要公共卫生问题[3]。非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌同属抗酸杆菌,临床特征相似,故极易出现误诊,且NTM对常规抗结核药具有较高的耐药性,因此准确快速检测分枝杆菌菌种类型对于分枝杆菌感染类疾病的诊治具有重大意义[4]。本研究应用PCR-反向点杂交法对九江市第三人民医院收治的464例疑似分枝杆菌感染患者的4种不同类型标本进行菌种检测,旨在分析九江地区分枝杆菌流行状况,为临床诊治及制订相关防控措施提供实验室依据。
收集2016年6月至2019年10月在本院就诊的疑似分枝杆菌感染的门诊及住院患者464例,男292例,女172例;年龄1~87岁,平均年龄45.53岁;其中标本类型:灌洗液标本240例、痰液209例、分泌物11例、胸腹水4例。
仪器与试剂:ETC811 PCR扩增仪、电水浴箱、分子杂交仪及分枝杆菌菌种鉴定基因检测试剂(亚能生物技术有限公司原装试剂)等。
应用PCR-反向点杂交法检测22个分枝杆菌,包括耻垢分枝杆菌(MSM)、胞内分枝杆菌(MIN)、堪萨斯分枝杆菌(MKA)、龟分枝杆菌龟亚种(MCH)、海/溃疡分枝杆菌(MMA)、偶发/猪分枝杆菌(MFO)、土分枝杆菌(MTE)、不产色分枝杆菌(MNO)、结核分枝杆菌复合群(MTC)、鸟分枝杆菌(MAV)、瘰疬分枝杆菌(MSC)、龟分枝杆菌脓肿亚肿(MAB)、蟾蜍分枝杆菌(MXE)、浅黄分枝杆菌(MGI)、草分枝杆菌(MPH)、戈登分枝杆菌(MGO)、次要分枝杆菌(MTR)、胃分枝杆菌(MGA)、母牛分枝杆菌(MUA)、苏尔加分枝杆菌(MDI)、迪氏分枝杆菌(MDI)、猿猴分枝杆菌(MSI)。
采用SPSS17.0软件进行统计处理,分类计数资料用率来进行描述。
464例标本,共检出分枝杆菌阳性216例(阳性率为46.5%),均为单一感染。其中MTC 195例(占90.3%),NTM 21例(占9.7%)。NTM感染21例中MIN感染11例、MGO感染6例、MAB感染2例、MXE感染2例。见表1。
表1 216例分枝杆菌核酸检测阳性菌种分布构成比
痰液标本209例,分枝杆菌核酸检测阳性130例,阳性率为62.2%;灌洗液标本240例,分枝杆菌核酸检测阳性82例,阳性率为34.2%;分泌物标本11例,分枝杆菌核酸检测阳性4例,阳性率为36.4%。胸腹水标本4例,分枝杆菌核酸检测阳性0例,阳性率为0.0%。
分枝杆菌分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌及麻风杆菌三大类,目前以结核分枝杆菌复合群及非结核分枝杆菌感染为主。分枝杆菌感染是全球关注的公共卫生和社会问题之一。我国更是结核病高负担、高危险性国家[5]。NTM系指分枝杆菌属中,除结核分枝杆菌复合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型结核分枝杆菌)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。NTM可侵犯全身许多脏器和组织,其中以肺部最为常见。肺外病变包括淋巴结、皮肤、软组织、骨骼等。由于NTM肺病的临床表现与影像学表现酷似肺结核,而且痰涂片找抗酸杆菌检查也可呈阳性,导致误诊误治的问题十分严重。且大多数NTM对常用的抗结核药物耐药,所以需要根据特异性菌种鉴定及药敏情况制订出治疗方案[6]。因此菌种鉴定对分枝杆菌感染诊治极其重要。
据报道[7],NTM感染的患病率由1971年的0.82/10万上升到1997年的3.52/10万,是25年前的3.8倍。艾滋病的出现更是加剧了NTM病的流行,据研究[8]表明,HIV阳性者是NTM感染的高危人群,尤以MAC为甚,其感染所占比例可高达95%以上。2010年我国第五次全国结核病流行病学调查[9]显示,我国现有结核病患者700万,其中非结核分枝杆菌的感染率为22.9%,明显高于2000年全国第四次结核病流行病调查的11.1%[10]。本研究分析的464例疑似分枝杆菌感染患者,结果为216例阳性(占46.5%),其中MTC占90.3%,NTM占9.7%,NTM感染率低于第五次全国调查水平。NTM中以MIN为主,与张洁等[11]研究的北京地区NTM菌种分布结果相似。本研究检出NTM菌种为MIN、MGO、MAB、MXE,共4种。张洁等[11]研究的北京地区检出NTM菌种为胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、鸟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、偶然分枝杆菌、戈登分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、草分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、母牛分枝杆菌、新金色分枝杆菌及熊本分枝杆菌共13种。由此可见九江地区的NTM菌种类型少于北京地区。
综上所述,由于非结核分枝杆菌感染呈现上升趋势,因此对分枝杆菌进行分析可以帮助临床更快速有效的对疑似分枝杆菌感染的疾病实施针对性治疗。可以给当地疾病控制机构制订相应的呼吸道传染性疾病防治措施提供依据。