急性心肌梗死患者PCI术后血浆组织蛋白酶S和血小板反应蛋白-1与心功能的关系研究

张丽丽 张娜

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是持久心肌缺血而导致的心肌坏死疾病，主要特点是起病急、病死率高，特别对老年患者危害严重，目前首选治疗方法是皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention，PCI)[1]。PCI是目前临床上公认可有效降低AMI患者病死率、改善心功能的方法，但部分患者术后会出现不同程度的心力衰竭等术后不良症状，影响PCI治疗效果[2]，因此寻找易检测的血清指标，以预测PCI术后患者心功能恢复情况具有必要。组织蛋白酶S(cathepsin S，catS)是动物组织细胞内一类维持细胞内环境稳定的蛋白酶，在AMI血清中表达上调[3]；血小板反应蛋白1(thrombospondin-1，TSP-1)是一类细胞外机制蛋白，在AMI血清中表达升高[4]。目前笔者所见鲜有AMI患者血浆catS、TSP-1和心功能关系的研究。因此本研究通过检测AMI患者血浆中catS、TSP-1表达情况，探讨其与PCI术后心功能恢复的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年1月至2019年2月我院收治的87例AMI患者为研究对象，男51例,女36例；年龄36～73岁，平均年龄(56.52±6.19)岁；同期90例健康体检者为对照组，男50例,女40例；年龄35～76岁，平均年龄(55.43±7.66)岁，2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有研究对象签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 诊断标准：AMI符合世界卫生组织关于AMI的诊断标准[5]：有持续胸前痛15 min临床病史，心电图符合AMI演变过程，血清酶增高，符合其中2条即为AMI。

1.2.2 纳入标准：①符合AMI诊断标准；②不伴其他影响AMI疾病患者。

1.2.3 排除标准：①先天性心脏类疾病患者；②恶性肿瘤患者；③AMI病史患者。

1.3 主要试剂与仪器 人酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)catS、TSP-1试剂盒(中国abcam，货号分别为：ab155427、ab193716)，B型利尿钠肽试剂盒(北京玛诺生物制药有限公司)，心脏超声诊断仪(南京科进实业有限公司，型号：KJ-2V2M)。

1.4 方法

1.4.1 样品采集及后期实验:健康体检者于体检当日采用肝素钠抗凝管采集静脉血5 ml，AMI患者PCI术前、术后1 d、1周、4周用肝素钠抗凝管采集静脉血5 ml，3 000 r/min离心10 min，吸出上清液即为血浆。放-20℃冰箱备用。

1.4.2 临床资料:收集纳入者临床资料，包括年龄、性别、高血压史、糖尿病史、吸烟史、脑卒中史。采用拜访询问的方式收集资料。高血压：未使用降压药，随机3 d 测量收缩压≥140 mm Hg或舒张压≥90 mm Hg或正在使用降压药，血压已降至正常。糖尿病：空腹血糖≥7.0 mmol/L或餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L或已确诊为糖尿病。吸烟史：检测前任何时间吸烟。脑卒中史：确诊出现过脑卒中现象。

1.4.3 ELISA法检测血浆中catS、TSP-1表达水平:ELISA法检测对照组、AMI患者PCI术前、术后1 d、1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平。-20℃取出部分血浆，操作步骤严格按照ELISA试剂盒说明书进行。

1.4.4 检测心功能指标:按照B型利尿钠肽试剂盒步骤用全自动生化分析仪检测对照组、AMI患者PCI术前、术后1 d、1周、4周血浆中B型利尿钠肽表达水平，心脏超声诊断仪检测对照组、AMI患者PCI术前、术后1 d、1周、4周舒张压、收缩压、左心室射血分数，6 min 步行试验观察AMI患者PCI术前、术后4周6 min 步行距离。

2 结果

2.1 2组临床指标比较 AMI组年龄、性别比、糖尿病史、吸烟史与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，高血压史、脑卒中史比例高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 2组临床指标比较

2.2 2组患者PCI术前、术后1 d、1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平比较 与对照组相比，AMI患者PCI术前、术后1 d、1周血浆中catS、TSP-1，PCI术后4周TSP-1表达水平升高(P<0.05)。与PCI术前相比，AMI患者PCI术后1 d 血浆中catS、TSP-1表达水平升高(P<0.05)，术后1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平降低(P<0.05)。与PCI术后1 d相比，AMI患者术后1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平降低(P<0.05)。与PCI术后1周比较，术后4周血浆中catS、TSP-1表达水平降低(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者PCI术前、术后1 d、1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平比较

2.3 2组患者PCI术前、术后1 d、1周、4周心功能指标比较 与对照组相比，AMI患者PCI术前、术后1 d、1周血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压升高，左心室射血分数降低(P<0.05)；PCI术后4周血浆中B型利尿钠肽、舒张压升高，左心室射血分数降低(P<0.05)。与PCI术前相比，AMI患者术后1 d 血浆中B型利尿钠肽、左心室射血分数升高，舒张压、收缩压降低(P<0.05)；术后1周、4周血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压降低，左心室射血分数升高，术后4周6 min步行距离升高(P<0.05)。与PCI术后1 d相比，AMI患者术后1周、4周血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压降低，左心室射血分数升高(P<0.05)。与PCI术后1周相比，AMI患者术后4周血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者PCI术前、术后1 d、1周、4周血浆中心功能指标比较

2.4 AMI患者PCI术后4周血浆中catS、TSP-1表达水平与心功能指标关系 Pearson法分析结果显示，AMI患者PCI术后4周血浆中catS表达水平与B型利尿钠肽、收缩压呈正相关(r分别为0.458、0.459，P均<0.05)，与左心室射血分数、6 min步行距离呈负相关(r分别为-0.621、-0.469，P均<0.05)。AMI患者PCI术后4周血浆中TSP-1表达水平与B型利尿钠肽、舒张压呈正相关(r分别为0.512、0.431，P均<0.05)，与左心室射血分数、6 min步行距离呈负相关(r分别为-0.510、-0.538，P均<0.05)。见表4。

表4 AMI患者PCI术后4周血浆中catS、TSP-1表达水平与心功能指标相关性分析

3 讨论

AMI是心血管管腔闭塞造成持续性缺血缺氧引起心肌坏死疾病，近年来在中国呈明显上升趋势，现患病人数至少有350万人[6]。过度疲劳、情绪激动、暴饮暴食、寒冷刺激、吸烟饮酒等多种不健康生活习惯均有可能成为AMI诱因；并且随着年龄的增长，身体各项机能下降也会形成AMI[7]，因此值得注意。目前PCI是临床上公认的AMI治疗方法，但存在术后不良症状，严重影响PCI治疗效果。因此提早预测PCI术后效果在临床上意义重大。

catS是在动脉粥样硬化斑块中最早发现的组织蛋白酶，可维持淋巴结、脾脏、肺、心脏等细胞内环境稳定，其表达水平升高会影响动脉粥样硬化斑块稳定性从而加速AMI进程[8]。TSP-1是一种广泛存在于人体组织的结构复杂的多功能细胞外机制蛋白，首次在凝血酶刺激的血小板细胞膜中分离出来，是血小板特异性生物标志物[9]，具有促进动脉粥样硬化作用、也可影响血管再生影响心肌供血[10,11]。本研究发现AMI组高血压史、脑卒中史比例高于对照组，提示高血压史、脑卒中史可能加快AMI发病进程。与对照组相比，AMI患者PCI术前血浆中catS、TSP-1表达水平均升高，提示AMI患者中catS、TSP-1表达水平升高，与Befekadu等[12]的catS、TSP-1在AMI患者血浆中表达升高一致，catS表达水平升高可能影响动脉粥样硬化斑块进而加速AMI进程、TSP-1表达水平升高可能抑制血管新生加重AMI进程。与PCI术前相比，AMI患者PCI术后1 d血浆中catS、TSP-1表达水平升高，术后1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平降低；PCI术后随着时间的延长血浆中catS、TSP-1表达水平逐渐降低；提示术后1 d可能受手术创伤等的影响，水平尚未恢复，随着时间推移，术后1周、4周血浆中catS、TSP-1表达水平降低、逐渐向健康指标接近。说明AMI患者通过PCI手术降低catS、TSP-1表达水平进而减缓这两种基因对AMI的危害。

心脏是脊椎动物重要器官之一，主要为血流提供压力。心功能异常会引发心悸、心绞痛、心衰等多种疾病[13-15]。B型利尿钠肽由心肌细胞合成，当心功能异常时心肌细胞受到刺激裂解B型利尿钠肽并使其释放进入血液循环，正常参考值<100 ng/L，表达水平升高时表明心力衰竭[16]。舒张压、收缩压分别是心脏舒张末期、收缩中期血液对血管内壁的压力，舒张压正常值为60～90 mm Hg，收缩压为90～140 mm Hg，随着年龄的增高舒张压、收缩压整体呈上升趋势，舒张压、收缩压升高分别提示机体心脏、血管病病变[17]。左心室射血分数是心室每搏输出量占心室舒张末容积的比例，反应左心室收缩功能，正常范围为50%～70%，<40%可诊断收缩性心力衰竭[18]。6 min步行试验可判断AMI患者的运动耐力试验，是对AMI患者各系统的综合评价，在临床上急性心梗患者早期进行心脏康复运动可提高患者预后和生活质量，患者在术后半个月可行6 min步行试验[19]。本研究发现与对照组相比，AMI患者PCI术前血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压升高，左心室射血分数降低；与谢倩等[20]AMI患者1 d B型利尿钠肽、舒张压、收缩压升高、左心室射血分数降低结果类似。说明AMI患者B型利尿钠肽、舒张压、收缩压升高都已超出正常范围，左心室射血分数降低<40%，提示AMI患者心脏、心血管病变严重。与PCI术前相比，AMI患者术后1 d 血浆中B型利尿钠肽、左心室射血分数升高，舒张压、收缩压降低；术后1周、4周血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压降低，左心室射血分数升高；术后4周6 min步行距离升高。随着术后时间的延长，患者血浆中B型利尿钠肽、舒张压、收缩压逐渐降低，左心室射血分数逐渐升高，并趋向正常值。提示AMI患者PCI术后检测上述指标向正常范围恢复，说明AMI患者通过PCI手术可减缓AMI。

进一步研究发现AMI患者PCI术后1 d血浆中catS、TSP-1表达水平与B型利尿钠肽、catS表达水平与收缩压、TSP-1表达水平与舒张压呈正相关，catS、TSP-1表达水平与左心室射血分数、6 min步行试验呈负相关。说明血浆中catS、TSP-1水平与AMI患者心功能指标关系密切，提示catS、TSP-1水平可能影响相应心功能指标进而影响PCI术后恢复状况。

综上所述，AMI患者血浆中catS、TSP-1表达水平升高，经PCI术后逐渐下降，可反映AMI患者心功能。血浆中catS、TSP-1表达水平在检测时操作方便，AMI患者PCI术后检查时可根据血浆中catS、TSP-1表达水平推测术后恢复状况。