刘海侠 刘森
摘要:传染性法氏囊病也称为“甘保罗病”,是由一种双RNA病毒(传染性法氏囊病病毒,IBDV)感染引起的,是一种高度接触性传染病。从患禽法氏囊中最容易分离到该病毒,但也可从其他器官分离到。感染可呈亚临床型和临床型。通过病史、症状和剖检可初诊,确诊可进行血清学诊断。该病尚无治疗方法,养禽场需做好卫生防疫管理。
关键词:鸡;传染性法氏囊病;临床表现;诊断;预防
中图分类号:$858.31 文献标识码:B 文章编号:2095-9737(2020)06-0127-02
1病原與传播
IBDV随患禽粪便被排出,并通过污染物在舍间传播。该病毒十分稳定,从鸡舍中很难被根除,病毒野毒株的毒力差异较大。在欧洲首次发现了可造成高发病率和高死亡率的超强毒株。在东半球都有这类病毒的传播,1999年在南美检测到该类病毒。美国在2009年检测到该类病毒。在我国,该病仍然是养鸡业的主要传染病之一。近几年来,经过科研部门及广大兽医工作者的共同努力,使该病在一定程度上得到了有效控制。
采集发病早期鸡的样本,接种8~11日龄无抗体鸡胚,可分离到IBDV。绒毛尿囊膜接种比尿囊腔接种更敏感。分离IBDV也可采用源自法氏囊的细胞培养物和已建立的禽源和哺乳动物源细胞系,可在鸡胚成纤维细胞分离到一些毒株。IBDV细胞适应株能够产生细胞病变,可用于血清学定量试验。已确认IBDV有两种血清型,二者之间的抗原差异很大。血清型Ⅱ型能感染鸡和火鸡,但不会造成临床发病或免疫抑制。已经鉴定出IBDV变异株与标准株存在着主要抗原的差异。
2临床表现
传染性法氏囊病是一种高度接触性传染病,感染结果取决于鸡的日龄、品种以及病毒毒力。感染可呈亚临床型和临床型。3周龄之前的感染通常呈亚临床型。临床型感染最常见于3~6周龄鸡,但18周龄的鸡也曾出现过严重感染。早期的亚临床感染可造成严重经济损失,因此也是最重要的疾病表现形式。该病可破坏法氏囊、胸腺和脾脏中的未成熟淋巴细胞,从而出现严重的、长期性免疫抑制。体液免疫(B细胞)应答受到的影响最严重;细胞介导(T细胞)的免疫应答受影响的程度较小。早期感染IBDV引起免疫抑制的鸡,对疫苗接种不能够产生良好的免疫应答,易发生由正常的非致病性的病毒和细菌引起的感染。IBDV感染常可造成常见病加重。变异毒株感染幼禽可引起亚临床感染,而早期感染,可造成严重的长期性免疫抑制和法氏囊萎缩。在临床感染时,常于潜伏期3~4天后突然发病。鸡表现有严重的虚脱、共济失调、水样下痢、羽毛脏乱、肛门周围污秽、啄肛和泄殖腔炎症。死亡率可达20%以上。在1周内即可康复,肉鸡增重延缓3~5天。有母源抗体存在时可改变临床病程。
3病理变化
大体剖检可见法氏囊肿大、水肿,呈淡黄色,偶尔出血。胸部、股部和腿部的肌肉常见充血和出血。IBDV感染后的康复鸡,由于法氏囊滤泡发生破坏且不能再生,而使法氏囊萎缩、变小。
4血清学诊断
血清学诊断方法有琼脂扩散试验(AGP)、荧光抗体技术、酶联免疫吸附测定(ELISA)、中和试验等。现主要介绍应用荧光抗体技术检测IBDV。
(1)材料的准备。载玻片和盖玻片(若干)、冰冻切片机、荧光标记的抗IBDV抗体、丙酮和甘油(足量)。
(2)试验操作。步骤1:制片。检测法氏囊一般采用触片或冰冻切片,触片按常规方法进行。冰冻切片将病鸡的法氏囊切成约3cm×3cm的小块,置冷台上,以6%明胶做支持物,迅速冷冻。立即用冰冻切片机切片,温度在-16~-20℃之间。切片厚约5um,丙酮固定,准备染色。标本如需保存,应在-20℃以下密封保存。步骤2:染色。首先将荧光抗体用0.005M、pH值为7.2的PBS稀释,于标本片上滴加荧光抗体稀释液,然后置湿盒中,37℃感作30min取出。接着先以pH值为7.2的PBS冲洗,继以自来水冲洗5min左右,后以蒸馏水冲洗,自然干燥或风扇吹干。最后滴加缓冲甘油封片(无荧光甘油9份,pH值为7.2的PBS 1份)。步骤3:镜检。以荧光显微镜于暗室中观察。
(3)结果判定。若胞浆内不出现颗粒状或弥散状特异荧光判为阴性,用“一”表示。若胞浆内出现颗粒状或弥散状特异荧光判为阳性:“+”表示1%~25%的细胞出现荧光;“++”表示25%~50%的细胞出现荧光;“+++”表示50%~75%的细胞出现荧光;荧光强度用“++++”表示75%以上的细胞出现荧光。
5预防与控制
该病尚无治疗方法。对污染鸡场在空舍后进行严格的消毒,效果有限。可使用多种不同的低致病性的鸡胚苗或细胞苗,在1~21日龄时进行点眼、饮水或皮下注射。母源抗体对疫苗的免疫应答有干扰,使用毒力稍强的疫苗株可减少较高水平抗体的影响。对于肉鸡群(以及一些商品蛋鸡),将育雏早期阶段的雏鸡母源抗体维持在较高水平,可减少早期感染以及随后出现的免疫抑制。
种鸡群在生长期,应进行一次或多次免疫接种,首次可使用活苗免疫,开产前用油乳剂灭活苗再次免疫。可使用鸡胚、法氏囊组织或细胞培养制成的灭活苗。与活苗相比,灭活苗产生的抗体水平更高、更均匀,免疫期也更长。应使用病毒中和试验或ELISA等血清学定量检测方法,定期监测种鸡的抗体水平。如果母鸡的抗体水平下降,则应再次免疫接种,使其后代维持足够的免疫力。