蛹虫草、白化蛹虫草菌丝硒耐受性比较研究

张园园 王 勇* 张 晶 丁 建 李 悦

（1 安康市农业科学研究院，陕西安康725021；2 陕西省长青林业局，陕西汉中723000）

蛹虫草（Cordyceps militaris）又名北冬虫夏草、北虫草，属于真菌界（Fungi），子囊菌门（Ascomycota），粪 壳 菌 纲 （Sordariomycetes） ，肉 座 菌 目（Hypocreales），虫草科（Cordycipitaceae），虫草属（Cordyceps），是虫草属的模式种［1-3］。研究表明，蛹虫草的药理作用与冬虫夏草极为相似，其药用成分虫草酸、虫草多糖、虫草素含量及SOD 活性等均高于冬虫夏草，具有抗肿瘤、抗疲劳、降血糖、抗衰老、提高免疫力等功效[8-13]。白化蛹虫草是蛹虫草生长过程中发生自然突变，失去原有橙黄或橘红色，呈白色的蛹虫草[14]。据报道，白化蛹虫草虫草素、黄酮等含量高于蛹虫草，抗氧化能力也更强[15-17]。

硒是人体必需的微量元素之一，被誉为“心脏守护神”“天然解毒剂”“生命的火种”“抗癌之王”[18-19]。我国是世界主要的硒资源国之一，居世界第四位。但我国仍是一个缺硒大国，三分之二的地区为缺硒区和低硒区[20]。人体长期缺硒或低硒易发癌症、糖尿病、心血管病等40余种疾病。据报道，食用菌是富硒的优良载体，能将无机硒转化为硒蛋白和硒多糖等有机形态的硒[21]。食用菌是获得安全、高效有机硒产品的重要载体[22]。杜双田等[23]研究表明，当培养基中亚硒酸钠质量浓度为450 mg/L时，蛹虫草菌丝仍能缓慢生长，但未找到其耐硒极值。目前，未见有关白化蛹虫草菌丝硒耐受性研究报道。试验较为系统地研究了亚硒酸钠对蛹虫草及白化蛹虫草菌丝生长影响，以期找到其硒耐受性极值，为富硒蛹虫草和富硒白化蛹虫草的开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）蛹虫草菌株：蛹虫草CM-1518，白化蛹虫草CM-Y1518（蛹虫草菌株CM-1518 的一株白色的变异株），由陕西省安康市农业科学研究院食用菌研究所分离获得。

（2）培养基：马铃薯 200 g，葡萄糖 10 g，蔗糖10 g，蛋白胨 2 g，磷酸二氢钾 1 g，硫酸镁0.5 g，琼脂12 g。加水1 000 mL。

1.2 试验方法

在培养基中添加一定浓度的亚硒酸钠制成平板培养基，使培养基中亚硒酸钠质量浓度（mg/L）分别为0（对照）、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700，共15个处理。每个平皿中央定量接种直径5 mm的蛹虫草菌饼一块。试验采用直径90 mm的培养皿，培养基用量20 mL/皿。接种后置黑暗，温度（23±1）℃，培养8 d。每个处理重复3次。

观察菌落长势、菌落形态，采用十字划线法[24]测定菌丝平均长速：

菌丝平均生长速度（mm/d）=[菌落平均直径（mm）/培养天数（d）]/2

1.3 数据统计与分析

用DPS（Version 7.05）数据统计分析软件对数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 亚硒酸钠对蛹虫草菌丝生长的影响

试验结果见表1、图1。由表1和图1可知，随着培养基中亚硒酸钠质量浓度的上升，蛹虫草菌丝平均长速逐渐下降。试验条件下，培养基亚硒酸钠质量浓度不超过650 mg/L 时蛹虫草菌丝均能生长，表明该菌株耐硒能力强，但各处理菌丝长势及菌落形态等有明显的差异。亚硒酸钠质量浓度小于50 mg/L时，蛹虫草菌丝长势浓密、气生菌丝旺盛，无同心圆，菌落边缘整齐；亚硒酸钠质量浓度小于100 mg/L 时，菌丝长势浓密、气生菌丝较浓密，菌落边缘整齐，有同心圆，说明蛹虫草菌丝生长基本正常；亚硒酸钠质量浓度为150～650 mg/L 时，气生菌丝较稀疏，菌落边缘不整齐，有少量同心圆，蛹虫草菌丝生长受到了影响；亚硒酸钠质量浓度为700 mg/L时，蛹虫草菌丝不生长，表明菌丝生长已受到抑制。

表1 不同处理蛹虫草菌丝生长情况

图1 不同处理蛹虫草菌丝长势及菌落形态（数字为亚硒酸钠质量浓度，mg/L）

2.2 亚硒酸钠对白化蛹虫草菌丝生长影响

试验结果见表2、图2。由表2和图2可以看出，随着培养基中亚硒酸钠质量浓度的上升，白化蛹虫草菌丝平均长速逐渐下降。试验条件下，培养基亚硒酸钠质量浓度不超过400 mg/L 时白化蛹虫草菌丝均能生长，但菌丝长势及菌落形态间差异明显。亚硒酸钠质量浓度不超过100 mg/L 时，白化蛹虫草菌丝浓密、旺盛，菌落边缘整齐，同心圆模糊，表明白化蛹虫草菌丝生长基本正常；亚硒酸钠质量浓度为150 mg/L、200 mg/L 时，菌丝长势较浓密、气生菌稀疏，菌落呈锯齿状，有同心圆，表明上述浓度的亚硒酸钠对白化蛹虫草菌丝生长有抑制作用；当亚硒酸钠质量浓度高于350 mg/L 时，白化蛹虫草菌丝基本停止生长。

表2 不同处理白化蛹虫草菌丝生长情况

图2 不同处理白化蛹虫草菌丝长势及菌落形态（数字为亚硒酸钠质量浓度，mg/L）

3 小 结

试验结果表明，蛹虫草CM-1518 菌株硒耐受极值为700 mg/L。培养基亚硒酸钠质量浓度为不高于100 mg/L 时，对其菌丝平均长速、菌落形态影响较小，但对气生菌丝影响较大，气生菌丝较对照稀疏，这与杜双田等研究结果一致[23]；当亚硒酸钠浓度为650 mg/L时，蛹虫草菌丝仍能缓慢生长。因此，在实际生产中，建议培养基中亚硒酸钠添加量不超过100 mg/L。

白化蛹虫草CM-Y1518 菌株硒耐受性相对较强，培养基中亚硒酸钠浓度不高于100 mg/L，其菌丝生长基本正常，浓度在350 mg/L 或超过此值，菌丝基本已停止生长。因此，在实际生产中，建议培养基中亚硒酸钠添加量不超过100 mg/L。