2型糖尿病患者口服葡萄糖后胆囊收缩素及生长激素释放肽分泌规律分析

李宁 刘毅 杜雪芹 魏立民

2型糖尿病(T2DM)是一种长期代谢紊乱的内分泌疾病，其特征为高血糖、胰岛素抵抗和胰岛素相对缺乏[1-2]。研究显示，肠促胰岛素在T2DM中起关键作用且具有改变疾病进展的潜力[3]，包括胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、葡萄糖依赖性促胰岛素多肽或抑胃肽(GIP)及胆囊收缩素(CCK)等，其功能障碍是T2DM的早期特征。CCK是一类具有多种分子形式和多种生物学活性的脑肠肽，有研究显示其在导致T2DM代谢紊乱中起一定作用[4]。生长激素释放肽(ghrelin)是一种来自胃的肽类激素，具有生长激素释放活性，能在实验条件下改变葡萄糖和胰岛素代谢、血压水平、脂肪生成和炎症等过程[5]。本研究所涉及的CCK与ghrelin均属于能够影响葡萄糖和胰岛素代谢过程的激素，但目前其分泌规律尚未清楚。本文旨在比较T2DM患者和正常受试者在口服葡萄糖后不同时间点血清CCK及ghrelin水平的差异，分析两种激素的分泌规律及与胰岛素和C肽之间的关系。

对象与方法

1.对象：纳入2014年3月～11月于河北省人民医院内分泌科门诊就诊及住院的T2DM患者82例作为T2DM组。所有患者均符合WHO 1999年T2DM的诊断标准。排除标准：(1)1型糖尿病、妊娠糖尿病及其他特殊类型糖尿病患者；(2)妊娠期或哺乳期患者；(3)合并非糖尿病性慢性肾病、感染及结石等泌尿系统疾病的患者；(4)合并糖尿病急性并发症的患者；(5)合并重度感染的患者；(6)严重心、肝功能损害等患者。纳入同期于河北省人民医院体检的健康体检者34例作为对照组。本研究经过河北省人民医院伦理委员会审核通过，所有受试者均知情同意。

2.方法：收集所有受试者一般临床资料(性别、年龄、身高、体重及糖尿病病史)，计算BMI。所有受试者禁食8 h，口服降糖药物者于试验前48 h停药，空腹状态下抽取静脉血4 ml，将75g无水葡萄糖溶于250 ml清水中，在5min内饮完。从饮第一口开始计时，分别在30、60、120和180 min采集静脉血，以测定血糖、胰岛素、C肽、CCK及ghrelin水平。采血过程中所有受试者均禁食、禁水，不进行剧烈运动。采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，采用高压液相色谱法检测糖化血红蛋白(HbA1c)浓度，采用电化学发光法检测胰岛素、C肽水平，应用酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒(武汉优尔生科技股份有限公司)按其说明书检测血清CCK及ghrelin水平。

结果

1.两组受试者一般临床资料比较：T2DM组患者HbA1c水平较对照组明显升高(P<0.05)，两组间其余指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组受试者一般临床资料比较

2.两组受试者不同时间点血糖、胰岛素和C肽水平比较：T2DM组患者服糖后0、30、60、120和180 min血糖水平均明显高于对照组(P<0.05)。T2DM组患者服糖后30、60和120 min胰岛素和C肽水平均明显低于对照组(P<0.05)，见表2、3。

表2 两组受试者不同时间点血糖和胰岛素水平比较

表3 两组受试者不同时间点C肽水平比较

3.两组受试者不同时间点CCK及ghrelin比较：服糖后，对照组和T2DM组受试者的血清CCK水平均逐渐升高，而血清ghrelin水平逐渐降低。T2DM组患者服糖后60 min和120 min CCK水平均低于对照组，T2DM组患者空腹、服糖后30、60和120min ghrelin水平均低于对照组(P<0.05)，见表4。

表4 两组受试者不同时间点CCK及ghrelin比较

4.T2DM患者空腹血清CCK、ghrelin与其他因素的相关性分析结果：Pearson相关分析结果显示，T2DM患者血清ghrelin水平与BMI呈负相关(r=-0.282，P=0.047)，其他指标间均无相关性(P>0.05)。见表5。

表5 T2DM患者空腹血清CCK、ghrelin与其他因素的相关性分析结果

讨论

目前CCK在糖尿病发生发展过程中的作用机制尚未清楚，但可以明确的是CCK具有刺激胰腺细胞分泌胰岛素的作用。动物实验表明，CCK可促进大鼠分泌胰岛素，而且对其在体及离体的胰岛细胞分泌胰岛素均有明显刺激作用[6]。有关研究结果显示，给予高脂血糖大鼠注射CCK类似物，可显著降低其体重及增加胰岛素分泌[7-8]，提示CCK在减轻肥胖和改善胰岛

素抵抗方面具有潜力，此外，CCK同时具有保护胰岛β细胞不受凋亡影响的作用。一些研究已经证明了CCK与肠促胰岛素激素GIP和GLP-1在代谢与相关治疗过程中存在着互补的生物学作用，进一步提出稳定的CCK衍生物有望成为肥胖症和T2DM患者独立减重降糖药物[9]。Rehfeld等[10]研究表明无论是在1型还是2型糖尿病患者中，空腹血清CCK的分泌水平均正常，这与本研究结果相似。

ghrelin可自由通过血脑屏障，通过与其受体结合发挥类似胃动素的加速胃排空作用，ghrelin是唯一可以在外周刺激食欲的激素，在禁食时分泌增加，而进餐后下降。低水平ghrelin可作为预测肥胖和T2DM的一项危险因子[11]。有研究发现，在T2DM形成过程中，会出现机体能量的正平衡状态，为了调节机体的能量平衡，胃组织中ghrelin的含量及其免疫阳性细胞、血浆浓度均明显减少，以降低食欲、减少摄食和阻止体重增加[12]。研究报道妊娠期和产后的空腹血糖及产后ghrelin水平是既往妊娠期糖尿病患者发生T2DM的重要危险因素[13]。杨新玲等[14]通过观察T2DM大鼠模型建立过程中ghrelin和下丘脑神经肽Y的变化，发现在此过程中大鼠血清和胃组织的ghrelin水平明显降低，神经肽Y mRNA表达明显增加，证实ghrelin可能通过刺激下丘脑神经肽Y的合成和分泌，共同参与T2DM的发生。本研究结果发现，T2DM患者的血清ghrelin水平较对照组明显减低，与既往研究结果一致[15]，提示ghrelin分泌的变化可能在糖尿病的发生中起重要作用。

本研究结果显示T2DM组及对照组受试者CCK水平在服糖后有升高趋势。T2DM组患者血清CCK水平在服糖后60 min和120 min时明显低于对照组。在服糖后180 min达到峰值，而对照组在120 min时达到峰值，T2DM组中CCK达峰时间明显推迟，其中的具体机制尚未明确。无论是在T2DM组还是对照组，服糖后血清ghrelin均表现出下降趋势。值得关注的是，T2DM组患者血清ghrelin水平在空腹及服糖后均明显低于对照组，可能与前面讨论的ghrelin在T2DM形成中所起的作用有一定相关性。

本研究并未发现T2DM患者血清CCK与血糖、胰岛素等明显相关，而血清ghrelin水平与BMI呈负相关，与既往研究报道类似[16]。廖丽萍等[17]关于ghrelin与胰岛素抵抗关系的研究发现，肥胖大鼠的空腹血清ghrelin水平较对照组下降，同时发现空腹ghrelin水平与BMI呈负相关，而餐后2 h血清ghrelin水平与餐后2 h胰岛素、血糖等无明显相关性，与本研究结果类似。Papandreou等[18]研究正常和肥胖受试者中ghrelin水平与肥胖、胰岛素抵抗和葡萄糖的关系时，发现空腹血浆ghrelin水平与BMI呈明显负相关(r=-0.77，P<0.001)，与本研究结果一致。以上结果均提示BMI是糖尿病患者ghrelin水平的可靠预测因子。

综上所述，本研究结果发现T2DM患者口服葡萄糖刺激CCK及ghrelin分泌较正常人群减少，T2DM患者口服葡萄糖后CCK分泌高峰较正常人群明显迟缓，空腹血清ghrelin水平与BMI呈负相关。本研究也存在一定局限性，如样本量较小，研究过程中未考虑受试者正在接受的治疗方案对研究结果的影响等，将来有待进一步研究深入探讨。