宫颈高级别病变HPV感染型别分析

吴德群，刘 艳，陈 剑

(扬州大学医学院附属扬州市妇幼保健院，江苏 扬州225000)

宫颈癌是一类常见的发生于女性生殖道的恶性肿瘤，在全球的女性恶性肿瘤中发病率较高，仅次于乳腺癌，严重威胁着广大女性的健康和生命。宫颈癌的发生过程是多种因素，以及多种基因长期持续作用的结果，而HPV的持续性感染是导致发生宫颈病变及癌变的重要原因[1-3]，也是目前唯一可以预防的一种癌症疾病[4]，目前已经知道的HPV型别有120多余种，本文对近年来在江苏省扬州市妇幼保健院就诊的宫颈高级别病变病人其HPV感染情况进行调查，以分析HPV型别感染与宫颈高级别病变之间关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2017年1月至2018年6月于本院妇科就诊并已被确诊为宫颈高级别病变的患者287人，患者年龄在20-70岁，均有性生活史，无全子宫切除史，所有检查患者处于非月经期，在检查前2 d内无性生活，未使用阴道药物。登记患者的年龄，HPV检查结果等，本研究经过患者本人的知情同意，我院医学伦理学会委员会批准。

1.2 检测方法

1.2.1标本采集 进行样本采集时，在取样前先用棉签轻轻拭去宫颈表面的分泌物，然后用HPV专用宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转3-5圈。慢慢取出宫颈刷，将其放入装有细胞保存液的样品管中。在管口处将多余的刷柄折断，将刷头留在样本管中，旋紧管盖，做好标记并保持样本管直立放置，送检。

1.2.2HPV分型检测 利用HPV基因分型检测试剂盒(YZB/国6157/2014，广东凯普生物科技股份有限公司)，采用PCR体外扩增结合DNA反向点杂交技术对37种HPV型别(分别为HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、26、73、82，34、40、42、44、43、55、54、57、61、67、69、70、71、72、83、84、6、11、CP8304)进行检测，具体操作步骤根据试剂盒说明书进行操作，此检测方法灵敏度高，准确性好，可重复性好。

1.3 数据统计

使用SPPS20.0软件对数据进行分析，计数资料用感染率进行表示，采用卡方检验进行组间比较。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV感染单一型别比较结果

全组HPV感染257例中，按单一型别统计共计408例中， 检测到30种HPV亚型感染程度由高到低分别为HPV16型131例(50.97%)，HPV52型48例(18.68 %)，HPV58型45例(17.51%)，HPV33型32例(12.45 %)，HPV31型22例(8.56 %)，HPV18型17例(6.61%)，HPV39型16例(6.23%)，HPV51型13例(5.06 %)，HPV53型11例(4.30%)，HPV68型9例(3.50%),结果表明，不同HPV单一亚型感染的感染占比之间存在显著差异，见表1。

2.2 HPV型别单一与多重感染检测结果

全组HPV不同型别感染共257例数中，单一型别感染159例(61.87%)，二重型别感染69例(26.85%)，三重型别感染20例(7.78%)，四重型别感染5例(1.95%)，更多重型别感染4例(1.56%)，结果表明不同型别感染占比之间具存在差异，见表2。

2.3 不同年龄段HPV型别感染检测结果

全组HPV感染共257人中，结果表明不同年龄段占比以31-50岁占绝大多数(64.21%)，见表3。

表1 HPV单一亚型感染例数及感染率

表2 HPV型别单一与多重感染例数及构成比

表3 不同年龄段HPV型别感染例数及构成比

2.4 针对三种疫苗中所检出HPV型别病人感染情况比较

本调查结果中单独感染HPV 16和/或 HPV 18亚型病人例数共有141例(54.86%)，感染HPV6、HPV11、HPV16和HPV18亚型中的一种或多种病人例数共有142例(55.25%)，感染HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33亚型中的一种或多种例数共有237例(91.51%)，其他亚型感染例数共有80例(31.13%)，见表4。

表4 不同HPV疫苗类型中HPV型别感染例数及感染率

3 讨论

根据世界卫生组织(WHO)报道，全球女性每年新患宫颈癌患者约46万例，在中国女性中每年新患宫颈癌患者约13万例，占全球比例的29%，位居首位，严重威胁我国广大女性的健康和生命[5]。宫颈癌作为目前唯一能够通过筛查进行早期确诊和人为预防的恶性肿瘤，有效的进行筛查可以显著降低宫颈癌的发病率及死亡率，有着十分重要的意义。Wolf H[6]，Walboomers[7],Bosch[8]通过研究均指出HPV型别感染与宫颈癌有重要相关性，HPV的持续性感染可导致宫颈癌的发生。WHO对于诊断宫颈癌的标准中，HPV感染作为一种必要感染因素[9]，因此进行HPV检测在宫颈癌的筛查中有着重要作用。

HPV上的L1壳蛋白的高度表达或缺失都能够引发相关病变，HPV上的E2蛋白是一种特殊的结合蛋白，通过E2基因进行表达，对于病毒的复制有一定的抑制作用，E2基因断裂后E6、E7基因不受抑制后发生过度蛋白表达，结合P53形成复合体，P53是一种抑癌基因，被形成复合体后失活，从而导致宫颈癌病变[10,11]。

HPV不同型别感染有一定的地域相关性，地理环境以及所处的社会区域的差异使得HPV感染型别存在差异，不同的感染型别具有不同的致病性[12]，在本研究HPV单一亚型感染中，发现HPV16亚型在扬州市地区是所有单一亚型感染占比例最高的亚型，其次是HPV52、HPV58亚型。国外研究表明HPV16型别感染与宫颈高级别病变以及宫颈癌病变关系最为密切，致癌性最高。

多数研究报道HPV占比例最高的为单一型别感染，其次是二重型别感染，三重、四重及多重所占比例较低[13,14]。本研究中与以往的研究报道相符，单一型别的感染率最高，其次是二重型别感染。关于HPV感染的型别数与宫颈癌的病变的关系说法不一，有研究表明，多重型别感染会增加宫颈癌病变的风险[15]，但也有研究表明型别感染数与其没有太大关系[16]，此项还需进行进一步研究。

近年来，宫颈癌病变的发生越来越趋于年轻化女性，这与整体社会对性观念的认识和改变，HPV感染率增加有关，本研究中年龄段在31-50岁的女性HPV感染占比最高，可以看出HPV感染在年轻妇女比较普遍，建议30-50岁的女性及时进行HPV检测，早早做好预防工作。

目前HPV疫苗有三种类型，分别是葛兰素史克公司(GSK)的HPV 2价疫苗(HPV 16和HPV 18)，默沙东公司(Merck)的HPV 4价疫苗(HPV6、HPV11、HPV16和HPV18)，默沙东公司(Merck)的HPV 9价疫苗[17](HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33)，本调查结果中二价疫苗所包含的型别感染例数为141例(54.86%)，四价疫苗所包含的型别感染例数为142例(55.25%)，九价疫苗所包含的型别感染例数共有237例(91.51%)，其它亚型感染例数共有80例(31.13%)，可见针对扬州市女性而言九价疫苗更能有效的预防HPV感染和宫颈癌疾病的发生。值得注意的是，通过统计发现，在三种疫苗所包含的亚型以外，其他HPV亚型感染率也较高，建议考虑在疫苗范围内适当增加HPV亚型。

综上， HPV16型别感染对高级别病变及宫颈癌病变的影响最大，因此需要高度重视，对于HPV感染应及早检查。目前，三种类型的疫苗接种有一定年龄范围限制，二价疫苗的年龄范围为9-25岁，四价疫苗的适用年龄范围为20-45岁，九价疫苗的年龄范围为9-45岁，建议有条件的女性及早接种九价疫苗进行预防。