施今墨对药方“腰痛康”对腰椎间盘突出症SD 大鼠IL-1、NO 水平的影响

吕玉娥，段永峰，李亚峰

（1.山西省针灸医院，山西太原030006； 2.山西中医药大学，山西晋中030619）

施今墨对药方“腰痛康”是国医大师吕景山教授用于治疗腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation，LDH）的经验方，在临床上每获良效。为了探究其作用机制，进行其对LDH 大鼠模型血清白介素-1（IL-1）和一氧化氮（NO）水平影响的实验研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 选取60 只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠。其体质量为 250～300 g，单一喂养，温度控制在25 ℃左右。

1.1.2 药物与试剂 腰痛康胶囊主要由生黄芪、当归、蜈蚣、全蝎、杜仲、川续断、乳香、没药等组成，每粒0.4 g（相当于生药2.6 g），由山西省针灸医院制剂室提供。双氯芬酸钠肠溶片（国药准字H41022703，批号100813，南阳普康药业有限公司）。试剂盒IL-1、NO 由山西省针灸医院检验科提供。

1.2 实验方法

1.2.1 模型制备 ①制备自体髓核混悬液。术前1 d，先腹腔注射1%氯胺酮50 mg/kg 进行麻醉。然后，剪短大鼠背部的毛，再使用脱毛剂脱毛。手术时，先腹腔注射1%氯胺酮50 mg/kg，麻醉。在大鼠尾部、背部进行消毒，铺无菌巾。在距尾根部1 cm处切断鼠尾，缝合伤口。切开尾部椎间盘，可看到髓核呈胶冻状。取出5 个髓核，加入50 μL 生理盐水，充分搅拌，使其呈混悬液，以备使用。②建立模型。固定大鼠，使其腰椎呈屈曲侧卧位。选取腰椎4，5 棘突间隙作为穿刺点。采用9 号腰椎穿刺针，行硬膜外穿刺。穿刺成功后，使用微量注射器，注射20 μL 自体髓核混悬液。然后注射2%利多卡因30 μL 于硬膜外腔，拔出穿刺针。将大鼠置入笼中进行观察。造模成功的标准：若麻醉苏醒后，大鼠四肢活动自若，则表明硬膜外穿刺、注射未成功。若双侧前肢活动自若，而双侧后肢运动、感觉丧失或减弱，且20～30 min 后完全恢复，则表明造模成功。

1.2.2 分组与给药 采用随机数字表法，将60 只SD 大鼠随机分为正常组（A 组）、造模组（B 组）、中药组（C 组）及西药组（D 组），每组 15 只。A 组大鼠正常喂养；余组大鼠均造模，造模成功后，A组、B 组予以生理盐水灌胃；C 组给予施今墨对药方“腰痛康”灌胃给药，折合生药2.6 g/d；D 组予以双氯芬酸钠肠溶片灌胃给药。

1.2.3 观察指标 于制模后第7 天、第14 天、第28 天，各组随机抽取5 只大鼠，摘除眼球取血，测定血清 IL-1、NO 水平。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 腰痛康对LDH 大鼠IL-1 水平的影响

在相同时间点，B 组较A 组IL-1 水平显著升高（P<0.05），说明在LDH 所致神经根炎过程中，IL-1 发挥重要作用。与B 组相同时间点相比，C组、D 组 IL-1 水平降低（P<0.05），说明施今墨对药方“腰痛康”、双氯芬酸钠肠溶片都能有效抑制炎性介质，而 C 组 IL-1 水平较 D 组降低（P<0.05），差异有统计学意义，说明施今墨对药方“腰痛康”的作用优于双氯芬酸钠肠溶片。结果见表1。

表1 腰痛康对LDH 大鼠IL-1 水平的影响 （ng，）

表1 腰痛康对LDH 大鼠IL-1 水平的影响 （ng，）

注：与 A 组相同时间点比较，1）P<0.05；与 B 组相同时间点比较，2）P<0.05；与 C 组相同时间点比较，3）P<0.05

组别 n A 组 15 B 组 15 C 组 15 D 组 15第7 天 第14 天 第28 天0.112±0.006 0.089±0.008 0.111±0.006 0.264±0.0061） 0.179±0.0131） 0.198± 0.0031）0.247±0.0892） 0.128±0.0082） 0.104± 0.0062）0.258±0.0052）3） 0.136±0.0072）3） 0.114±0.0042）3）

2.2 腰痛康对LDH 大鼠NO 水平的影响

在相同时间点，B 组较A 组NO 水平显著升高（P<0.05），说明在腰椎间盘突出症所致神经根炎的过程中，NO 是一个重要的炎症介质，可能发挥重要的作用。与B 组相同时间点比较，C 组、D组随治疗时间延长，NO 水平下降（P<0.05），差异具有统计学意义，且C 组相同时间点NO 水平较D 组明显降低（P<0.05），说明施今墨对药方“腰痛康”的作用优于双氯芬酸钠肠溶片。结果见表2。

3 讨 论

LDH 属于骨科常见病，其临床发病率高［1］。该病的发病机制包括以下两方面：一方面，椎间盘自身存在退行性变，在遇到外伤、劳损、受寒等后，导致纤维由内向外破裂，引发本病。另一方面，髓核液里含有糖蛋白、脂蛋白等物质，这些物质可以对神经根产生刺激，当髓核突出破裂后，释放这些物质的炎性介质，刺激神经根，引起神经根炎，导致神经内压力升高，产生神经支配区的疼痛。

表2 腰痛康对LDH 大鼠NO 水平的影响 （ng，）

表2 腰痛康对LDH 大鼠NO 水平的影响 （ng，）

注：与 A 组相同时间点比较，1）P<0.05；与 B 组相同时间点比较，2）P<0.05；与 C 组相同时间点比较，3）P<0.05

组别 n A 组 15 B 组 15 C 组 15 D 组 15第7 天 第14 天 第28 天6.608±0.102 7.526±0.322 7.690±0.312 13.245±0.2921） 16.742±0.4081） 17.993±0.9721）12.968±0.3652） 9.768±0.2582） 8.541±0.6242）13.304±0.3822）3） 10.386±0.6422）3） 9.196±0.3422）3）

炎症介质如IL-1、NO 在神经根病变导致的LDH中起着十分重要的作用。IL-1 通过刺激炎症细胞聚集，使炎症递质被激活，进而被释放，然后，刺激脊神经，产生腰腿痛［2］。NO 是一种具有广泛生物学功能的第二信使物质，内源性NO 已被证实参与炎症反应［3］。

当前，医治LDH 的方法分为非手术治疗与手术治疗，80%～90%的患者可经非手术治疗使其症状得到改善，或可病愈［4］。非手术治疗包含平卧硬板床、药物医治、牵引、按摩疗法、艾灸、针刺、其他康复疗法。虽然手术可以治愈本病，但很多人不适合手术或恐惧手术，给患者带来极大的痛苦。中医学认识到，引起本病主要有：外感风、寒、湿、热之邪，经络闭阻，气滞血瘀，不通则痛；肝肾亏虚，筋脉失养，不荣则痛；外伤或劳损，气滞血瘀，不通则痛。临床中多是上述三方面杂合为病，且三方面互相影响。实邪病久，则可致虚。若为虚证，则实邪不易被祛除。施今墨对药方“腰痛康”基于LDH 的中医病因病机拟定，方中生黄芪、当归、杜仲、续断补益肝肾，蜈蚣、全蝎、乳香、没药舒经活络、消肿止痛。合用之，可使血液循环得以改善，新陈代谢得以调整，神经根水肿得以减轻，进而炎症得以消退。

本实验 B 组 IL-1、NO 水平较 A 组升高，说明炎性介质在腰椎间盘突出症中发挥重要作用，而C 组能明显降低模型大鼠血清IL-1、NO 水平，说明施今墨对药“腰痛康”可能通过抑制炎性介质，使腰椎间盘突出所致神经根痛得以改善。