不同铜源对肉兔生产性能、腹泻率及组织器官中铜沉积量的影响

晏家友，张锦秀，张 纯，邝声耀，李书伟，刁 慧，毛 驰

（四川省畜牧科学研究院，动物遗传育种四川省重点实验室，四川成都 610066）

铜是动物机体必需的一种微量元素，可以作为各种酶（如铜蓝蛋白、铜锌超氧化物歧化酶、赖氨酰氧化酶、酪氨酸酶等）的组成成分或激活剂，直接参与机体代谢，发挥重要的营养功能[1-2]。植物性饲料原料中铜含量较低，以之为主的基础饲粮不能满足动物对铜的营养需要，所以要在配合饲料中额外补铜，才能避免铜缺乏症的产生。无机铜是饲料中微量元素铜的主要添加形式，但是由于其吸收利用率低，高剂量使用是普遍现象[3]。然而养殖生产中，高剂量使用无机铜会对动物自身、畜禽产品及生态环境构成极大的安全威胁[4-5]。我国农业农村部发布的第2625 号公告《饲料添加剂安全使用规范》已经对动物饲料中铜的添加量作出进一步限制，其中规定肉兔配合饲料或全混合日粮中，铜的最高限量为25 mg/kg（包含饲料原料本底值）。本试验旨在研究日粮中添加不同铜源对肉兔生产性能、腹泻率及组织器官中铜沉积量的影响，为养兔生产中铜源的科学选择和合理应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲养管理 试验在四川省畜牧科学研究院肉兔科研基地进行。选用240 只35 日龄断奶的新西兰仔兔，随机分为5 个处理，每个处理8 个重复，每个重复6 只兔（公、母各半）。试验兔在同一栋封闭式兔舍内，放在不锈钢笼子里饲养，每个笼子2 只兔（1 公1母）。4 个试验组添加的铜源分别为硫酸铜、碱式氯化铜、柠檬酸铜和甘氨酸铜，铜的添加水平均为20 mg/kg，对照组不加铜。预试期7 d，正试期49 d。每天08:00 和17:00 投喂2 次饲料，投料量以兔充分吃饱而几乎不留料为准。试验期间自由饮水。每日清扫兔舍1 次，每隔4 d 对兔舍进行喷雾消毒1 次。仔兔免疫程序及其他饲养管理按兔场常规进行。

1.2 试验材料 柠檬酸铜（铜含量34.5%～36.7%）由四川省畜科饲料有限公司生产，硫酸铜（铜含量≥25.1%）、碱式氯化铜（铜含量≥58.1%）和甘氨酸铜（铜含量≥21%）均从市场采购。

1.3 试验日粮 试验日粮参照De Blas 等[6]《兔的营养需要》配制。日粮组成及营养成分见表1。

表1 日粮组成及营养成分（风干基础）

1.4 样品采集 试验结束后，从每个处理选取8 只（公、母各半）接近平均体重的兔，经屠宰后，分别取心脏、肝脏、肾脏样品各2 g，然后从第3～6 腰椎处取3 cm×1 cm×1 cm 背最长肌组织一块，液氮处理后，于-20℃冰箱冷冻保存，用于测定组织器官中铜含量。

1.5 测定指标与方法

1.5.1 生产性能 试验开始和结束时，分别对每只兔进行空腹称重。试验期内，以每3 个兔笼为1 个重复单位，记录总投料量和总剩料量。根据平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）计算耗料增重比（F/G）。

1.5.2 腹泻率 试验期内，每天观测兔的排粪情况，并对粪便进行感观评分，评分标准为0 分：正常；1 分：不成形；2 分：轻度腹泻；3 分：急性腹泻，将得分为2 分和3分者判定为腹泻[7]。统计整个试验期各处理兔的腹泻率。

腹泻率=各处理腹泻只数/各处理兔的总数×100%

1.5.3 组织器官中铜沉积量 组织器官中铜沉积量指标包括肌肉、心脏、肝脏和肾脏中铜含量，按照《食品安全国家标准 食品中铜的测定》（GB 5009.13-2017）中第二法进行测定，使用仪器包含原子吸收分光光度计和电子天平等。

1.6 统计分析 利用SAS V8 软件包编程进行数据统计分析，采用One-Way ANOVA 检验，组间差异进行Tukey 多重比较，腹泻率差异显著性采用U 检验。试验结果以平均值±标准差表示。以P＜0.05为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 不同铜源对肉兔生产性能的影响 由表2 可以看出，柠檬酸铜组、甘氨酸铜组和碱式氯化铜组肉兔的ADG较对照组分别提高18.75%、15.63%和12.50%（P＜0.05），而硫酸铜组与对照组无显著差异。柠檬酸铜组、甘氨酸铜组和碱式氯化铜组肉兔的F/G 较对照组分别降低12.08%、10.39% 和8.71%（P＜0.05），而硫酸铜组与对照组无显著差异。各处理组肉兔ADFI 差异均不显著。

表2 不同铜源对肉兔生产性能的影响

2.2 不同铜源对肉兔腹泻率的影响 由图1 可以看出，柠檬酸铜组肉兔的腹泻率较对照组、硫酸铜组、碱式氯化铜组和甘氨酸铜组分别降低60.01%、55.57%、55.57%和50.03%（P＜0.05）。但硫酸铜组、碱式氯化铜组或甘氨酸铜组肉兔腹泻率与对照组无显著差异。

2.3 不同铜源对肉兔组织器官中铜沉积量的影响 由表3 可以看出，柠檬酸铜组、甘氨酸铜组和碱式氯化铜组肉兔心脏中铜含量较对照组分别提高37.78%、31.11%和22.22%（P＜0.05），而硫酸铜组与对照组无显著差异。柠檬酸铜组、甘氨酸铜组、碱式氯化铜组和硫酸铜组肉兔肝脏中铜含量较对照组分别提高314.44%、251.11%、242.22% 和234.44%（P＜0.05）。柠檬酸铜组、甘氨酸铜组、碱式氯化铜组和硫酸铜组肉兔肾脏中铜含量较对照组分别提高52.94%、47.06%、41.18%和41.18%（P＜0.05）。但各处理组肉兔肌肉中铜含量差异均不显著。

表3 不同铜源对肉兔组织器官中铜沉积量的影响 mg/kg

3 讨 论

在动物饲料“减铜限铜”的国家政策引领下，研制和应用更加安全、有效、环保的新型铜源是当今饲料行业必然的发展趋势。Mcdowell[8]研究指出，动物对日粮中不同铜源的吸收率各有差异。这说明各类铜源对肉兔的促生长效果可能存在不同。本试验结果表明，在日粮中添加20 mg/kg 柠檬酸铜、甘氨酸铜或碱式氯化铜均可显著提高肉兔的ADG 和饲料转化率，而在日粮中添加20 mg/kg 硫酸铜对肉兔的生产性能却无显著影响。这证实了肉兔对硫酸铜的吸收利用率更低，在饲料中添加低剂量的硫酸铜只能满足肉兔对铜的基本营养需要，而达不到促进肉兔生长的作用，与连继勤等[9]研究结果一致。本试验结果还表明，较对照组、硫酸铜组、碱式氯化铜组和甘氨酸铜组，在日粮中添加20 mg/kg 柠檬酸铜可以显著降低肉兔的腹泻率，而硫酸铜组、碱式氯化铜组或甘氨酸铜组肉兔的腹泻率并无显著变化，提示实际生产中可以应用柠檬酸铜来减少肉兔腹泻。关于柠檬酸铜降低动物腹泻率的原因，可能与其提高了机体免疫力有关[10]，但具体作用机制还有待于进一步研究。

关于不同铜源在肉兔组织器官中铜沉积量的研究报道甚少。本试验结果表明，硫酸铜、碱式氯化铜、柠檬酸铜或甘氨酸铜在肉兔各组织器官中的铜沉积量从高到低依次为肝脏、心脏、肾脏和肌肉，与李宏等[11]研究结果一致。以上结果提示，肝脏是肉兔主要的“储铜库”，可能起着一种滤过作用，防止血液中铜含量过高，所以铜容易在肝脏中积聚，因而肝铜浓度可以作为评价肉兔铜营养状况的敏感指标之一[12]。本试验结果也表明，不同铜源在肉兔肌肉组织中铜含量差异不显著。这可能是由于在一定铜水平范围内，为了保持内环境的稳定，机体组织的铜含量不会随外界添加的铜水平的变化而变化[13]。本试验结果还表明，硫酸铜、碱式氯化铜、柠檬酸铜或甘氨酸铜在肉兔各组织器官中铜沉积量从高到低依次为柠檬酸铜、甘氨酸铜、碱式氯化铜和硫酸铜，总体来看，有机铜在肉兔组织器官中的铜沉积量高于无机铜。关于柠檬酸铜和甘氨酸铜在肉兔组织器官中铜沉积量更高的原因，可能与其生物学利用率有关，但具体作用机制也需要进一步研究。

4 结 论

本研究结果表明，与对照组相比，在肉兔日粮中添加20 mg/kg 柠檬酸铜可以提高ADG 和饲料转化率，降低腹泻率，并且提高心脏、肝脏和肾脏中铜沉积量；柠檬酸铜组的腹泻率较硫酸铜组、碱式氯化铜组或甘氨酸铜组也有显著降低。本试验结果为实际生产中应用更加高效、环保的新铜源，既发挥肉兔的生长潜力，又减少粪铜的排放量，提供了新的思路。