采用mNGS技术诊断皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎一例并文献复习

王苹莉 吴志鹏

【摘要】目的 提高临床医师对皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎的认识。方法 对1例确诊为皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎患者的临床资料进行分析，并以“皮氏罗尔斯顿菌”“脑膜炎”或“Ralstonia pickettii”“meningitis”为检索词对中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据及生物医学文献数据库（PubMed）中的文献进行检索，对相关病例的临床资料进行总结。结果 该例患者因发热、头痛伴恶心、呕吐入院，通过宏基因组二代测序（mNGS）明确皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎诊断，经美罗培南抗感染治疗有效，其后好转出院，出院后无继续服用药物，出院后3个月随访无复发。在数据库检索到3例皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎患者，其中2例有颅内手术史、1例为早产儿，3例经积极的抗感染治疗均痊愈。结论 皮氏罗尔斯顿菌作为条件致病菌引起的颅内感染临床少见，mNGS技术的应用可提高该病的确诊水平。

【关键词】皮氏罗尔斯顿菌;脑膜炎;宏基因组二代测序

【Abstract】Objective To deepen the clinicians understanding of Ralstonia pickettii meningitis. Methods Clinical data of 1 case of meningitis caused by Ralstonia pisiella were retrospectively analyzed. Literature review was conducted from CNKI， Wanfang Data， Chongqing Vip and PubMed databases by using the keywords of Ralstonia pickettii and meningitis. Relevant clinical data were summarized. Results The patient was admitted to our hospital due to fever， headache， nausea and vomiting and diagnosed with Ralstonia pickettii meningitis by metagenomic next-generation sequencing （mNGS）. The patient was discharged after effective anti-infection therapy of meropenem. No drug therapy was given after discharge. No recurrence was observed during 3-month follow-up. According to literature review， 3 cases of Ralstonia pickettii meningitis were identified. Among them， 2 cases had a history of intracranial surgery and 1 case was premature infant. All of them were cured by active anti-infection treatment. Conclusions Ralstonia pickettii remains an extremely rare cause of meningitis in clinical practice. Application of mNGS can improve the diagnostic accuracy of this disease.

【Key words】Ralstonia pickettii;Meningitis;Metagenomic next-generation sequencing

皮氏罗尔斯顿菌是医院感染的少见条件致病菌，该菌会引起菌血症、心内膜炎、脑膜炎、骨髓炎等，甚至会致患者死亡[1]。皮氏罗尔斯顿菌临床检测困难，临床新技术的开展提高了临床医师对该菌的认识水平。我科通过宏基因组二代测序（mNGS）确诊了1例皮氏罗尔斯顿菌感染致脑膜炎患者，遂收集其临床资料并对国内外文献进行了检索，以提高同行们对皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎的认识。

对象与方法

一、1例皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎患者临床资料的收集

我科于2019年11月9日诊治1例皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎患者，收集并分析其病史、体格检查、实验室及辅助检查、治疗及随访等资料。

二、文献检索

对中英文文献进行检索，检索时间为1975年至2020年。以“Ralstonia pickettii”“meningitis” 为检索词，对生物医学文献数据库（PubMed）中的相关文献进行检索;以“皮氏罗尔斯顿菌”“脑膜炎”为检索词，對中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据中的相关文献进行检索，收集并分析检索到的患者的临床资料。

结果

一、1例皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎患者的病历资料

1.主诉及体格检查

患者女，23岁，未婚。因头痛6 d于2019年11月9日来我院住院治疗。患者于2019年11月3日出现以枕部及双颞部为主的头痛，头痛性质为持续性胀痛，偶有针刺样疼痛，严重时出现恶心、呕吐，伴有体温升高，最高达39℃，曾到当地诊所就诊，予“输液抗感染”等处理后，体温下降，但仍有头痛，遂来我院就诊。体格检查：体温 37.2℃，神志清晰，精神欠佳，对答切题，言语清晰，查体合作。心率76次/分，心肺检查基本正常。颅神经检查、肌力及肌张力检查均正常，脑膜刺激征阳性，颈抵抗颌下三指，其他神经科体征为阴性。

2.实验室及辅助检查

入院查血常规、尿常规、粪便常规及血液生化，均在正常范围，脑脊液压力130 mm H2O（1 mm H2O = 0.0098 kPa），脑脊液常规及生化（2019年11月9日）：红细胞16×106/L，白细胞136×106/L，中性粒细胞40%，淋巴细胞52%，蛋白1.80 g/L，葡萄糖定量2.10 mmol/L，氯12 mmol/L，乳酸脱氢酶46 U/L，腺苷脱氨酶2.30 U/L;脑脊液微生物检测（2019年11月11日）：细菌涂片未检出细菌及抗酸杆菌;脑脊液细菌培养3 d未能发现细菌。

3.确诊过程

初步考虑临床诊断为病毒性脑膜炎，给予患者阿昔洛韦0.5 g静脉滴注、每8 h 1次。但患者体温升高至39.3℃，头痛加重，并出现神志改变，睡眠时间增多。头颅MRI（2019年11月11日）：枕顶叶脑表面异常信号，见图1A;头颅MRI增强扫描（2019年11月15日）：浅表脑沟异常强化，见图1B。结合影像学检查，更改诊断为细菌性脑膜炎，于2019年11月12日换用美罗培南2 g静脉滴注、每8 h 1次，患者体温逐渐下降，头痛逐渐缓解。2019年11月15日复查脑脊液压力 265 mm H2O，脑脊液常规及生化：红细胞0，白细胞62×106/L，中性粒细胞22%，淋巴细胞78%，蛋白1.27 g/L，葡萄糖定量2.29 mmol/L，氯125 mmol/L，乳酸脱氢酶40 U/L，腺苷脱氨酶1.60 U/L;脑脊液细菌培养3 d未能发现细菌;血培养及鉴定：需氧、厌氧及真菌培养均阴性。

2019年11月15日采用mNGS检测患者脑脊液标本，在脑脊液中检测到皮氏罗尔斯顿菌（检出序列数 5788，基因组覆盖度 59 940 bp/10.81%，估测浓度1.1×103 copies/ml），见图1C，继续给予美罗培南治疗。2019年11月25日再次复查脑脊液压力150 mm H2O，脑脊液常规及生化：红细胞0，白细胞8×106/L，蛋白0.45 g/L，葡萄糖定量2.55 mmol/L，氯123 mmol/L。经治疗后患者好转，并于2019年11月28 日出院，最终诊断为皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎。患者出院后无继续服用药物，随访3个月，无复发。

二、皮氏罗尔斯顿菌脑膜炎相关文献检索结果

在PubMed中检索出相关文献3篇，在其他数据库中无相关文献。3篇文献中的3例患者，1例为早产儿，其因脑积水接受分流手术，术后出现皮氏罗尔斯顿菌感染并引发脑膜炎，主要表现为头围增加，给予抗感染治疗后完全治愈，其神经发育与其双胞胎兄弟无差异[2]。1例为成年女性患者，其在接受手术治疗海绵状血管瘤并留置引流管后出现脑膜炎症状，经抗感染治疗后好转，但多次复发，主要表现为高热，1998年11月再发并伴癫痫发作，对留置的引流管进行细菌检测发现皮氏罗尔斯顿菌，遂去除该装置并予抗感染治疗，后治愈[3]。3例患者的具体情况见表1。

讨论

罗尔斯顿菌属是1995年建立的一个新的细菌种属，皮氏罗尔斯顿菌是其模式种。罗尔斯顿菌在临床标本中极少被分离到，被分离到的以皮氏罗尔斯顿菌为主。皮氏罗尔斯顿菌是医院感染的少见条件致病菌，感染多由血液制品、医用溶剂、医用消毒液、呼吸管道、静脉导管等的污染所致，能够引起菌血症、心内膜炎、骨髓炎、脑膜炎等[4]。易感人群是免疫功能低下者，例如血液系统恶性肿瘤患者、需重症监护的患者、带有留置装置（例如中心静脉导管）的患者及新生儿等。本例患者为青年女性，无留置装置，在刚开始出现体温升高的时候曾接受“输液抗感染”治疗，考虑本例的发病机制极可能为输液溶剂被污染，细菌进入血液后通过血脑屏障进入颅内，从而引发脑膜炎。

皮氏罗尔斯顿菌对β-内酰胺类抗生素和大多数氨基糖苷类抗生素耐药，其中诱导性β-内酰胺酶blaOXA-225和blaOXA-606被認为是对β-内酰胺类药物具有高度抗性的原因，基因组12J和12D中存在氨基糖苷乙酰基转移酶导致皮氏罗尔斯顿菌素对氨基糖苷广泛耐药[1]。大多数菌株对碳青霉烯类抗生素敏感，查阅文献，颅内感染的治疗主要使用头孢曲松和环丙沙星。本例患者选择的抗菌药物为美罗培南，疗效确切。

本例患者3次脑脊液细菌培养均未能发现细菌，后通过mNGS技术发现病原菌，这提示我们应提高对少见细菌的认识水平，并需明确到常规检测手段存在缺陷。mNGS无需提前预知感染微生物，理论上能面向所有感染微生物进行检测，且不依赖于传统的微生物培养，可直接对临床样本中的核酸进行检测，具有很高的检测灵敏度。这种超广谱病原体筛查技术的出现，拓宽了传统病原体检测的思路，为解决临床未知感染等疑难问题提供了极具前景的广谱筛查手段。

参 考 文 献

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（收稿日期：2020-02-16）

（本文编辑：洪悦民）