庞久寅 闫运开 刘思琪 宋 洁 姜贵全
(北华大学,吉林 131200)
地榆(Sanguisorba officinalis L.)是蔷薇科地榆属多年生草本植物,纺锤形粗壮根,短柄小叶,紫红色花瓣,果实包藏萼筒内。广布于欧洲以及中国,常生于灌丛中、山坡草地、草原、草甸及疏林。地榆因具有丰富的营养价值、独特的药用价值、适应性强等特点,已由人工引种栽培。研究表明,地榆根部含有多种理化成分并具有抗炎消肿、抗菌等作用[1]。植物多酚是一类广泛存在于植物体内的复杂性多元酚类化合物,具有抑菌、清除体内自由基、抗氧化等作用,是用于木材防腐的良好原料[2]。Liu 等[3]通过细菌生长抑制试验,从88 种植物中筛选出包括地榆在内的抗菌效果较好的8种植物,再鉴定这些植物中发挥抑菌作用的成分,结果显示鞣质类成分对细菌有较强的抑制作用。鞣质是存在于地榆根体内结构比较复杂的多酚类化合物,地榆根中多酚类含量约为17%[4-5]。传统防腐剂虽然可有效防止微生物侵害木材,但其所含毒性物质且抗流失性较差,对人畜和环境产生诸多不利影响。因此,开发新的、低毒、高效防腐剂成为必然[6-7]。从具有天然防腐性能的植物中提取有生物活性功能的化学成分,并开发成为新型木材防腐剂是 21 世纪木材防腐剂发展的重要特点[8-10]。地榆多酚具有环保、对环境无污染、抗菌能力强等特点,并具有一定的木材防腐和防虫功能。本文以地榆根为原料,在传统工艺基础上借助超声波技术提取地榆多酚,对杨木进行浸渍处理,探究地榆多酚提取物对木材的防腐效果,为开发新型高效木材防腐剂提供参考。
杨木(Populus L.),河南省森培木业有限公司;地榆根,甘肃省德生誉药业有限公司;彩绒革盖菌(Basidiomycetes)、密粘褶菌(Gloeophyllum trabeum),阿坝州分部研究所。
超净工作台,HH-2 数显恒温水浴锅,江苏省金坛市科技仪器有限公司;FDU-1000 型冷冻干燥机,北京医博康实验仪器有限公司;FA2004A电子分析天平,上海精天电子仪器有限公司;DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱,上海一恒科技有限公司;SHZ-Ⅲ循环水真空泵,上海亚荣生化仪器厂;LF-23L-E蒸汽高压灭菌器,宁波市海曙莱富医疗科技有限公司;SDJ-800L电热恒温恒湿培养箱,深圳市宏建重力试验仪器有限公司;BSC250 型恒温恒湿箱,上海博讯实业有限公司;Quanta 200 型环境扫描电子显微镜,美国FEI公司。
将地榆根用粉碎机磨成粉状,再用细筛过滤后装入清洁容器中密封备用。称量地榆粉10 g放入烧杯中,加入体积分数60%的乙醇并搅拌均匀[11-12]。超声波提取条件[13]:功率300 W,料液比为1:12 g/mL,时间40 min,乙醇体积分数为60%,除去滤渣,收集提取液,用旋转蒸发仪浓缩提取液,再用真空冷冻干燥机冻干浓缩液,得到黄棕色溶液,该黄棕色溶液即为地榆多酚提取物样品。
测定地榆根中多酚的产率,将样品分别用适量的离子水稀释成1%、3%、5%质量分数的地榆多酚提取物防腐液,颜色呈淡黄色。
将杨木板材锯割成20 mm×20 mm×20 mm的小试件放入烘箱中,105 ℃下烘至绝干,分别称量并记录。常温常压下,将绝干小木块分别放入质量分数为1%、3%、5%的地榆多酚提取物防腐液中,浸泡24 h取出,并在105 ℃下烘至绝干,称量并记录质量,每组6块,另外6 块不做处理,作为对照。
1.5.1 河沙木屑培养基制备
1)麦芽糖液制备。取新鲜土豆120 g,去皮切块,放入烧杯中,加水煮沸30 min。过滤掉土豆块,加入12 g葡萄糖,充分溶解所得溶液为麦芽糖液。
2)河沙木屑培养基。准备500 mL的锥形瓶,向每个瓶中分别放入1 g红糖、7.5 g玉米粉、15 g杨木屑(40目)、150 g洗净的河沙(40 目),重量比为1: 7.5:15:150。搅拌均匀铺平整后,向每个锥形瓶中放入6 块20 mm×20 mm×10 mm的毛白杨饲木块,向瓶中倒入100 mL麦芽糖液,瓶口塞上脱脂棉并用牛皮纸包裹,在立式蒸汽灭菌器(121 ℃)灭菌30 min。
1.5.2 菌种的接种与培养
培养基灭菌后冷却,进行彩绒革盖菌和密粘褶菌的接种。在超净台内打开锥形瓶,先用酒精灯灼烧锥形瓶瓶口部位、彩绒革盖菌试管部位以及接种环。然后用接种环在彩绒革盖菌中取出一小块,放入河沙木屑培养基中,塞上脱脂棉包上牛皮纸,放入细菌培养箱中培养15 d;重复上述操作进行密粘褶菌的接种。15 d后,彩绒革盖菌和密粘褶菌长满锥形瓶,用紫外光灯对超净工作台灭菌10 min,打开台风,用75%酒精将锥形瓶擦洗消毒后,将防腐测试木块放入,每瓶中放入6 块后,依旧在细菌培养箱中培养4 周。
按照LY/T 1283—2011《木材防腐剂对腐朽菌毒性试验室试验方法》进行木材防腐试验[14-15],将不同浓度的防腐剂分别通过真空浸渍处理工艺注入尺寸为 20 mm×20 mm×10 mm 的毛白杨试样内,一部分放入 BSC250 型恒温恒湿箱,调节温度、湿度,培养周期为12 周。
待试件被两种菌侵蚀3 个月后,取出并剥去表面菌丝,105 ℃烘至绝干,称重记录,计算质量损失率,判断防腐性能[16-18]。
(3)病因治疗 肝衰竭病因对指导治疗及判断预后具有重要价值,包括发病原因及诱因两类。对其尚不明确者应积极寻找病因以期达到正确处理的目的[14]。
试件失重率计算公式:
式中:WLR ——试样质量损失率,%;
W1——试样腐朽前的绝干质量,g;
W2——试样腐朽后的绝干质量,g。
将腐朽后的试件在40 ℃下鼓风干燥后,沿弦向切成薄片,再进行镀金处理,最后将试件置入SEM,选择不同的放大倍数拍照[19]。
表1 试件失重率(彩绒革盖菌)Tab. 1 Weight loss rate of specimens(Basidiomycetes)
表2 试件失重率(密粘褶菌)Tab.2 Weight loss rate of specimens(Gloeophyllum trabeum)
(续表2)
表3 试件失重率(素材)Tab.3 Weight loss rate of untreated specimens
表4 木材耐腐等级Tab.4 Wood Corrosion Rating
从表1 可见,随着地榆多酚提取物溶液质量分数的增加,彩绒革盖菌侵蚀试件的失重率降低,但是经不同浓度地榆多酚提取液处理的试件木材损耗程度相差不大,随着地榆多酚的浓度增加,试件的失重率保持在1.3~7.5,3 组杨木试件平均失重率为4.49%,属于I强耐腐等级,处理材抗菌性强,耐腐性明显提高。
从表3 可以看出,素材在白腐菌(彩绒革盖菌)侵蚀后的平均失重率在 21.38%,属于II耐腐等级,素材在褐腐菌(密粘褶菌)侵蚀后的平均失重率在41.62%,为III稍耐腐等级。与彩绒革盖菌相比较来说,素材对于密粘褶菌的侵蚀很敏感。
地榆中的多酚含量较高,地榆多酚具有良好的抑菌效果[21-26],上述试验结果表明:经过地榆多酚提取液处理的木材试件防腐性能明显提高,地榆多酚对木材具有良好的防腐效果。
图1 彩绒革盖菌侵蚀木材(弦切面)的SEM图Fig.1 Scanning electron microscope image of Basidiomycetes eroding wood (string section)
图1 为彩绒革盖菌侵蚀木材的SEM 微观图像(试样室环境条件:温度10 ℃、732 Pa),图1a中,木材素材内部的菌丝数量多纹孔结构,管胞和纤维结构大部分被破坏。而经过地榆多酚提取物溶液处理后的木材纹孔结构较之完整,在其表面可以看见菌丝减少明显。对比可知,地榆多酚对彩绒革盖菌有抑菌性,可对木材起到保护作用。
图2 为密粘褶菌侵蚀试件的扫描电镜微观图(试样室环境条件:温度10 ℃、732 Pa)。由图2 可见,密粘褶菌对木材腐蚀性较强,素材的纹孔结构已裂开,导管和木射线中布满菌丝, 损坏严重,纹理结构已经完全丧失。而经过地榆多酚提取物溶液处理后的木材纹孔破坏程度有所减弱,木材防腐性得到明显提高,可以观察到纹孔结构保存较完整,菌丝数量明显减少。通过对比1%、3%和5%的地榆多酚提取物溶液处理的木材图像,可看出地榆多酚浓度的差异对防腐效果的影响明显。
图2 密粘褶菌侵蚀木材(弦切面)的SEM图Fig.2 Scanning electron microscope image of Gloeophyllum trabeum eroding wood (string section)
以地榆根为试验材料,在传统工艺基础上借助超声波技术提取地榆多酚,对杨木进行浸渍处理,用白腐菌(彩绒革盖菌)和褐腐菌(密粘褶菌)接种浸渍后木块12周后,对腐朽材进行失重率检测分析与SEM表征,得出如下结论:
1)经防腐处理的白腐菌(彩绒革盖菌)和褐腐菌(密粘褶菌)杨木试件,平均失重率分别为4.49%和9.93%,而素材白腐菌试件平均失重率为 21.38%,褐腐菌试件平均失重率为41.62%。试验结果表明:地榆多酚的提取物对木材具有较明显的防腐效果,对木腐菌有较强的抑菌活性。
2) 地榆多酚对木材真菌的防治效力与其质量分数成正比。随着地榆多酚质量分数的不断增加,试件质量损失率呈现下降趋势,在地榆多酚质量分数为3%时,可达到强耐腐效果。其中5%地榆多酚提取液处理的试件失重率最低,防腐效果最好。失重率分析与SEM表征均表明:当地榆多酚提取物防腐液浓度为5%时,对木材具有良好的防腐效果。
3)地榆多酚绿色无毒、环境友好,应用范围广,可以作为一种天然抑菌剂,用于低毒、高效木材防腐剂的研发。