金俊杰,侯凤香,沈 坚
(1.温州科技职业学院 325006;2.浙江省台州市路桥区农业农村局 318050)
兽肉鸽养殖成本低,周期短,见效快,效益高,是乡村振兴、农民致富的特种养殖项目。 鸽肉与鸽蛋都具有极高的营养价值,随着人们生活水平的提高,对鸽制品的需求日益增加,肉鸽养殖成为我国养殖的第四大禽种[1]。 温州市系华东地区最大的蛋鸽和乳鸽生产基础,也是浙江省的主要养鸽区,存栏数约占全省份额的40%,主要集中在平阳、瑞安、乐清等地,已成为当地乡村振兴、农民致富的主导产业。
但随着养殖规模的扩大,集约化的生产,鸽细菌病络绎不断, 特别是鸽大肠杆菌病已成制约养鸽业发展的重要细菌病之一。 各年龄的鸽子均可发病,且死亡率高[2-,3],在治疗大肠杆菌病的过程中,又由于抗生素的不合理使用,造成耐药菌不断产生,并且耐药谱越来越广,耐药菌可以不同途径随食物链进入人体,对人的健康构成严重威胁[4-,5]。 本文通过对瑞安某鸽场一起鸽大肠杆菌病病例的诊断与治疗进行总结, 以期为鸽大肠杆菌病的诊治提供参考。
病鸽羽毛松乱,呆立,多呼吸困难,精神萎靡,闭眼,流泪,流涕,排绿色水样的粪便,肛门绿色被粪便污染成,严重者出现仰头、扭颈等神经症状。 哺乳鸽脐部脱出,红肿。
腹腔积液呈胶冻状,心包炎、肝周炎、气囊炎等表面被覆大量黄白色的纤维素性分泌物,肝脏肿大呈土黄色,胃内充满绿色粪便,气管环状出血。
伊红美蓝、营养琼脂、麦康凯琼脂、药敏培养基等购自温州康泰生物科技有限公司;革兰氏染色液,细菌微量生化反应管,多粘菌素B、卡那霉素、庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星等药敏纸片购于杭州微生物试剂有限公司。
2.2.1 细菌分离
无菌采集病(死)鸽的心脏、肝脏、脾脏及粪便等,接种至麦康凯平皿培养基,生化培养箱37℃培养培养18~24h,挑取单个粉红色菌落,接种至伊红美蓝平皿培养基内,生化培养箱37℃培养18~24h。 挑取深紫色、带金属光泽单个菌落,接种至营养琼脂平皿培养基内,生化培养箱37℃培养18~24h,进行细菌纯化。
2.3.1 革兰氏染色
于营养琼脂平皿挑选纯化的单个菌落进行革兰氏染色,按照试剂操作说明书进行细菌的涂片、干燥、固定、染色等操作,然后镜检观察。
2.3.2 生化试验
将营养琼脂平皿挑选单个菌落接种至肠杆菌科微量生化反应管中,37℃培养24~48h,按照操作说明书定时观察并记录生化反应结果,并予以判定。
采用K-B 琼脂纸片扩散法进行药敏试验, 根据CLSI-2016标准进行结果判定[6]。
采集青年鸽和种鸽各20 份血液,分离血清;采用微量血凝试验,检测鸽新城疫抗体。
通过无菌采集病料,依次接种于麦康凯培养基、伊红美蓝培养基、 营养琼脂培养基, 在麦康凯培养基上菌落呈粉红色、圆形、、表面光滑、湿润;在伊红美蓝平板菌落呈扁平、深紫色、带金属光泽;在营养琼脂培养基上菌落呈半透明灰白色、圆形、光滑,其生长形态特征、培养特性均与大肠杆菌相符合。
通过染色镜检,可见两端钝圆、粗短,单个散在,无芽孢、荚膜,中等大小的杆菌。
通过细菌生化实验,该菌氢氧化钾拉丝实验结果阳性,氧化酶实验结果阴性,可以分解葡萄糖、木糖、山梨醇等,硫化氢、枸橼酸盐等阴性, 依据实验结果分离菌符合大肠杆菌的生物学特性。 生化特性结果见表1。
表1 分离菌生化特性
由生化试验结果得出,分离到的菌株符合大肠杆菌的生物学特性。
通过对临床分离的6 株大肠杆菌, 选用13 种兽医临床药物进行药敏试验,根据药敏试验结果可以看出,该养殖场大肠杆菌分离菌对麦迪霉素全部耐药, 耐药率为100%, 对氯霉素(50.0%)和复方新诺明(66.8%)的耐药率较高;对丁胺卡那和头孢呋辛高度敏感,分离菌株均未出现耐药性。
表2 药敏试验结果
种鸽新城疫血清抗体合格率100%, 效价主要集中在7~9,效价较高;青年鸽新城疫血清抗体合格率95%,效价主要集中在5 和6(具体见过见表3)。
表3 鸽新城疫抗体检测情况
从以上临床症状、解剖病变、细菌化验和血清学检测结果,可以排除鸽新城疫, 判定该为鸽大肠杆菌病。 根据药敏试验结果,在饲料中加入多粘菌素B,对部分症状严重的,单独注射庆大霉素(或链霉素)。 虽然头孢呋辛和丁胺卡那霉素均为敏感药,但是头孢呋辛为2 代头孢菌素类药物,人用临床使用较多,动物上一般不建议使用。
大肠杆菌为条件性致病菌,养殖场的环境卫生是导致大肠杆菌病发生的主要因素,并且各种品种与各日龄的鸽均易感,是养鸽场危害性最大的细菌病之一[7];且大肠杆菌病常与其他疾病混合感染,如鸽新城疫和支原体等,因此要进行实验室化验进行确诊。 通过实验室检测,药敏试验等,选用高敏药物,既可以提高治疗效果,又能延缓(或避免)细菌耐药性的产生,同时可以减少抗生素的滥用。
大肠杆菌作为动物机体常在细菌,经常因管理不当,天气变化等应激情况造成发病,因此要加强饲养管理,加强通风和保温,减少鸽群应激;及时清除鸽粪,消毒鸽笼、养殖器械与周边环境,注意饮水与饲料卫生。 同时尽量采用全进全出的饲养模式,注意饲养密度,严禁混群饲养。 对于有孵化能力的养殖场,注意种蛋的清洁与消毒。 对于发病鸽要及时进行隔离,对于病死鸽及其粪便进行无害化处理。 在治疗过程中,切忌盲目用药,要选用敏感药物,同时注意联合用药与轮换用药,有条件的养殖场自己可以进行细菌的分离鉴定与药敏试验, 无条件的就近联系科研院所与相关高校,将病死鸽送实验室检测,查明其本场流行的大肠杆菌血清型及本场大肠杆菌的敏感药物与所耐药物, 以进行精准有效地预防与治疗,促进养鸽业的健康良性发展。