新生儿血型鉴定困难的探讨

章小丽，徐秀云，柯江维，周根水

（江西省儿童医院，江西 南昌 330006）

1 材料与方法

1.1 标本来源 患儿，男，5d,第一胎第一产，因高黄疸、肝功能异常来我院就诊,总胆红素351μmol/L,间接胆红素332μmol/L,直接胆红素19μmol/L,血常规 RBC 5.3×1012/L，Hb 183g/L。既往无输血史,检测新生儿溶血病时发现患儿血型鉴定异常。已知母亲血型为O 型RHD 阳性。

1.2 仪器与试剂 抗-A(批号 20170819)、抗-B(批号 20170819)、ABO 红细胞(批号 20175333)、抗人球蛋白试剂(20175001)、抗H(20161107)均为上海血液生物医药责任有限公司产品。新生儿ABO、RhD 血型检测卡(批号20176915)、新生儿溶血病婴儿不完全抗体检测卡(批号20170901)均为长春博迅生物技术有限责任公司产品。KA－2200 专用离心机(日本久保田)，HH-W420 水浴箱（金坛市医疗仪器厂），TD-3A 型血型血清学专用离心机(长春博研)，FYQ 型免疫微柱孵育器(长春博研)。

1.3 检测方法 新生儿溶血病检测采用热放散法，ABO 血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、游离试验、放散试验均采用卡法与试管法互相验证[1,2]，ABO血型基因检测委托上海血液中心和江苏中济万泰生物医药有限公司若贝尔奖研究室进行。

2 结果

2.1 血清学患儿血型检测结果 见表1。

2.2 直接抗人球蛋白试验 阴性。

2.3 游离和放散试验 见表2。

2.4 分子生物学检测 根据测序回报的结果，ABO 1-5 外显子无突变位点，6、7 外显子有以下突变位点，与参考序列A101.1 进行对比，该样本符合B101/O01 基因型，见表3。

表1 患儿试管法ABO 血清学血型检测结果

表2 患儿游离与放散试验结果

表3 患儿ABO 基因6、7 外显子测序突变点结果

3 讨论

该患儿进行新生儿溶血病检测时发现ABO 血型鉴定结果异常,红细胞与抗B 试剂反应出现混合视野, 鉴于患儿无输血史我们怀疑他的ABO 血型是B3 亚型的可能性较高，进一步进行了ABO 基因分型与测序检测。根据回报的结果，该样本确定为B101/O01 基因型，但由于患者为新生儿，新生儿B型糖链抗原为直链抗原，抗原表达量约为成人25~50%，测序单位建议患儿满周岁后追踪血型，且不排除9 号染色体其他未测序部位变异导致血型异常的可能。

从输血相关实验结果联系临床其他检查结果，患儿虽然存在总胆红素351μmol/L,间接胆红素332μmol/L 升高引起的高胆红素血症，且新生儿溶血病检测中放散试验证实存在ABO 溶血[3,4]，但我们也观察到患儿同一时间查血常规,血红蛋白高达183g/L 并不因溶血而贫血。已知胎儿母体输血综合征(FMH）是指胎儿将血倒输回母体内的脐带或胎盘中,从而造成胎儿一出生就患有不同程度的贫血[5-10]。FMH 是一种少见的产科并发症，大部分病例原因不明，虽发病率不高，一旦发作很容易导致婴儿夭折。而本文报道的患儿情况, 笔者推测是FMH 的反转, 即母亲O 型血液通过脐带或胎盘输入了患儿体内即B 型血液中,故虽母子之间出现了ABO 血型不合新生儿溶血症，患儿红细胞被破坏，患儿网织红红细胞计数70.09×109/L,靠近正常值范围 25～75×109/L 上限,但 Hb 值未见下降并高达 183 g/L。同时也能解释患儿ABO 血型基因检测结果为B101/O01 基因型, 而血清学血型鉴定中出现的类似B3 的混合视野现象。因缺乏新旧细胞分离设备,且对症治疗后患儿病情好转很快出院了,我们没有进行进一步验证。比之FMH 可引起胎儿贫血、水肿甚至死亡等严重临床不良并发症,本案例预后良好。值得注意的是这种胎母输血会引起实验室血型鉴定困难,希望本案例的报道可以为输血界同行遇到类似现象，提供参考。