子宫肌瘤组织中PCNA、EGFR的表达特点及与患者病理学特征的关系

陶伟华，孙红娜，欧阳璐璐

（濮阳市油田总医院，河南 濮阳 457001）

流行病学研究证实, 子宫肌瘤的发病率可达294~509/1 万女性左右[1]。临床上子宫肌瘤的发生，能够导致患者月经紊乱症状的出现,并能够增加直肠膀胱压迫症状的发生风险[2,3]。在探讨子宫肌瘤发病机制的过程中,可以发现生物学蛋白或者细胞因子的改变,能够通过影响到平滑肌细胞的增殖和凋亡,进而促进平滑肌细胞的纤维化和间质的增生过程。增殖细胞核抗原（PCNA）的表达上升，能够通过提高癌细胞核DNA 的增殖速度，进而提高癌细胞扩增水平，促进平滑肌间质细胞的成熟[4]；表皮生长因子受体（EGFR）的表达上升，能够通过提高局部平滑肌组织的血流灌注水平,进而提高子宫平滑肌异常病变组织的血氧含量,进而促进了平滑肌细胞的增生[5]。部分研究者探讨了EGFR 或者PCN A 在生殖系统恶性肿瘤患者中的表达情况，认为EGFR 或者PCNA 的表达上升与恶性肿瘤的发生密切相关[6]，但缺乏对于EGFR 或者PCNA 的表达与子宫肌瘤的关系研究。为了揭示EGFR 或者PCNA 的表达子宫肌瘤的关系，从而为临床上子宫肌瘤的病情评估或者诊疗提供理论基础,本次研究选取我院2017 年1 月至2017 年12 月收集的120例子宫肌瘤妇女, 探讨了病灶组织中EGFR 或者PCNA 的表达情况及其与患者临床病理特征的关系，报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院2017 年 1 月至2017 年12 月收集的120 例子宫肌瘤妇女作为病例组、120例健康妇女作为健康组。

病例组，年龄 30~52 岁，平均为 42.6±8.6 岁，体质量指数(BMI)21.8±2.3kg/m2,发增生期 63 例、分泌期57 例；其中肌瘤多发65 例、单发55 例；肌瘤最大径≥5cm 63 例、<5cm 57 例。健康组，年龄 30~53 岁,平均为 41.6±9.3 岁,BMI 22.1±2.4kg/m2,发增生期 67 例、分泌期 53 例。两组妇女的年龄、BMI、增生期、分泌期构成情况差异无统计学意义（P>0.0 5）。

纳入标准：⑴子宫肌瘤患者的诊断标准参考《妇产科学》第八版中的标准；⑵年龄30~52 岁；⑶子宫肌瘤经腹部超声检查证实;⑷对照组为健康妇女；⑸本研究获得医学伦理委员会的批准,研究对象知情同意。

排除标准：⑴伴有其他类型的妇科恶性肿瘤；⑵长期使用糖皮质激素类药物；⑶长期使用免疫抑制剂；⑷伴有全身感染性疾病；⑸类风湿、结缔组织疾病。

1.2 免疫组化染色方法 采用石蜡进行连续性切片,脱蜡至水后采用H2O2室温下孵育10min，磷酸盐缓冲液冲洗3 次,每日3~5min，8%的蛋白粉封闭液（商品名：BSA 购自南京博奥生物科技公司），封闭2h,倒去封闭液后加入一抗(兔来源 浓度1：1000~1500)，4℃冰箱过夜,磷酸盐缓冲液冲洗 3 次，每日3~5min，加入二抗（鼠来源 1：400~500），室温孵育20~30min，磷酸盐缓冲液冲洗3 次，每日3~5min，加入辣根酶或碱性磷酸酶的标记物, 室温孵育10 min，磷酸盐缓冲液冲洗3 次，每日3~5min，滴加显色剂（DAB 购自南京博奥生物科技公司），复染，脱水，封片。

1.3 结果判断标准 免疫组化结果判定：增殖细胞核抗原（PCNA）、表皮生长因子受体（EGFR）的阳性着色表达于平滑肌细胞核中，呈黄色、棕黄色、褐色表达，⑴根据着色强度：0 分为无色、1 分为淡黄色、2 分为棕黄色、3 分为褐色、黑色；⑵根据阳性细胞比例：阳性细胞数目所占比例≤10%为1分、阳性细胞所占比例11%～50%为2 分、阳性细胞数51%～75%为3 分、阳性细胞数所占比例>75%为4 分，两种积分相乘总分<3 分为阴性、≧3 分为阳性。

2 结果

2.1 两组患者标本中的 PCNA、EGFR 表达比较病例组肌瘤组中的PCNA、EGFR 表达阳性率分别为80.00%、62.50%，健康妇女子宫肌层组织中的PCNA、EGFR 表达阳性率为 45.00%、15.83%，两组比较差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 两组患者标本中的PCNA、EGFR 表达比较[n（%）]

2.2 不同肌瘤数目、大小的肌瘤组织中的PCNA 表达比较 在不单发与多发、肌瘤最大径≥5cm 或<5cm 的肌瘤组织中的PCNA 阳性表达率差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

表2 不同肌瘤数目、大小的肌瘤组织中的PCNA 表达比较

2.3 不同肌瘤数目、大小的肌瘤组织中的EGFR 表达比较 多发肌瘤、肌瘤最大径≥5cm 肌瘤组织中的EGFR 阳性表达率高于肌瘤单发、肌瘤最大径<5cm 的肌瘤组织，差异具有统计学意义（P<0.05），见表3。

表3 不同肌瘤数目、大小的肌瘤组织中的EGFR 表达比较

2.4 子宫肌瘤组织中的EGFR、PCNA 表达的相关性 子宫肌瘤组织中的EGFR 阳性表达与PCNA阳性表达呈显著的正相关系 （Spearman 秩相关系数=0.387，P=0.000<0.05），见表4。

表4 子宫肌瘤组织中的EGFR、PCNA 表达的相关性

3 讨论

临床上性激素受体的敏感性改变或者性激素水平的波动，均能够促进子宫肌瘤的发生，特别是在年龄大于45 岁的育龄期女性人群中，子宫肌瘤的发病率可进一步的上升[7]。临床上子宫平滑肌瘤的发生，能够导致月经量增多、继发性贫血或者尿频尿急等临床症状的出现,导致患者生活质量的显著下降，并增加了远期子宫肌瘤变性的风险[8,9]。现阶段临床上子宫肌瘤治疗后,患者的复发率仍然较高,而本次研究对于子宫肌瘤患者病灶组织中EGF R 或者PCNA 的表达分析研究，具有下列几个方面的现实意义：⑴能够为临床上子宫肌瘤的发病病因的研究提供参考,从而为高危人群的筛查和随访提供依据；⑵能够为揭示子宫肌瘤的复发机制提供参考，从而降低子宫肌瘤治疗后的复发风险。

EGFR 是生长因子家族成员，其能够通过结合血管内皮细胞受体,提高新生血管内皮细胞的迁移和移行能力，促进新生血管的形成。EGFR 的表达上升能够提高平滑肌细胞的血流灌注水平,提高平滑肌细胞DNA 的扩增速度，进而导致平滑肌细胞持续性的自我增殖。基础方面的研究还认为，EGFR 的表达上升能够导致平滑肌细胞细胞周期的紊乱,导致其快速跨越G0 期能力的显著提高[10]；PCNA 是细胞核增殖相关因子，其不仅能够反应细胞的增殖状态,同时还能够评估细胞的成熟程度和分裂的风险。PCNA 的上升能够导致平滑肌细胞间质成分增生的发生,导致间质成分纤维化和成熟能力的增强[11]。部分研究者探讨了EGFR 的表达与子宫肌瘤的关系,认为EGFR 的表达与子宫肌瘤的关系密切相关[12]，但缺乏对于PCNA 的表达与子宫肌瘤的关系研究。

本次研究发现, 在子宫肌瘤病灶组织中,PCNA、EGFR 蛋白的表达阳性率均明显的上升，高于对照组，差异较为明显，表明PCNA、EGFR 的表达与子宫肌瘤的发生密切相关，PCNA、EGFR 的高表达可能参与到了子宫肌瘤的病情进展过程中。通过汇集不同的相关文献,笔者认为这主要由于PCNA、EGFR 的下列几个方面的作用有关[13,14]：⑴PCNA 的表达上升能够提高细胞核转录基因的活性，提高平滑肌细胞的增殖速度；⑵EGFR 的表达上升，不仅能够提高新生血管的形成速度，增加平滑肌组织的血流灌注,同时还能够提高平滑肌细胞间质成分的增生水平。曹丽娟等[15]研究者也认为，在子宫肌瘤患者中，EGFR 的表达阳性率可平均上升30%以上，特别是在合并有明显的月经量改变或者多发性子宫肌瘤患者中，EGFR 的表达阳性率的上升更为明显。在探讨PCNA、EGFR 的表达与子宫肌瘤临床病理特征关系的过程中可以发现PCNA的表达与子宫肌瘤的临床病理特征并无明显的关系,提示PCNA 的表达并不能影响到子宫肌瘤的数量或者直径大小，但部分研究者认为，在多发性子宫肌瘤患者中，PCNA 的表达浓度上升较为明显，本次研究并无发现PCNA 的表达与子宫肌瘤数量的关系，存在不同的临床结论，主要由于PCNA 蛋白的检测阳性率或者检测时机的不同有关;在探讨EGFR 的表达与子宫肌瘤临床病理关系的过程中，可以发现在多发性肌瘤或者肌瘤直径较大的患者中，EGFR 的表达明显的上升, 高于单发组或者直径较小组患者，差异较为明显，提示了临床上可以通过随访EGFR 的表达, 进而评估子宫肌瘤的病情。最后，本次研究发现，PCNA、EGFR 的表达具有一定的相关系,提示PCNA、EGFR 在影响到子宫肌瘤的病情进展过程中可能发挥了一定的协同作用，但其具体的机制仍然需要深入探讨。

综上所述, 在子宫肌瘤患者中，PCNA、EGFR的表达阳性率均明显的上升，EGFR 的表达与子宫肌瘤的数量或者肌瘤的大小密切相关, 同时PCNA、EGFR 的表达同样具有一定的关系。后续临床相关研究可以探讨PCNA、EGFR 的表达与子宫肌瘤复发的关系。