支气管哮喘患者血清趋化因子CCL19、CCL21与病情的相关性

康晓燕

（河南科技大学附属许昌市中心医院呼吸与危重症科，河南许昌461000）

支气管哮喘是常见的慢性气道炎症性疾病,多种炎症细胞及炎症介质均参与疾病发生及发展,其常见特征为多种炎症基因表达异常或表达增加[1]。支气管哮喘发病因素较为复杂，尚未完全阐明，虽然既往关于支气管哮喘的影响因素有研究,并表示遗传、环境等因素均对其有一定影响，但免疫及炎症机制一直是支气管哮喘发病的核心[2,3]。虽然大部分患者经长期规范化治疗症状可得到良好控制，但研究表明,近年哮喘发病率及病死率仍处于较高水平，分析其原因可能为气道炎症存在[4]。不少研究证实,树突状细胞及淋巴细胞等多种免疫细胞在哮喘的发生及发展中发挥一定作用[5]。趋化因子配体 19(C-C chemokine ligand 19，CCL19)、趋化因子配体 21(C-C chemokine ligand 21，CCL21)均属于CC 类趋化因子家族成员，是内环境稳定性的趋化因子，其在多种炎症组织中具有高表达，在维持免疫稳态中具有重要作用[6,7]。近年关于CCL19、CCL 21 与血管生成、自身免疫疾病的发生、肿瘤发生及转移关系的研究较多,但其与气道炎症性疾病的相关性研究较少,尤其与支气管哮喘患者病情的相关性研究更少。基于此，本研究旨在探讨血清趋化因子CCL19、CCL21 与支气管哮喘患者病情的相关性，以指导临床。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2018 年 1 月-2019 年 12 月本院收治的84 例支气管哮喘患者为研究对象，本次研究经本院医学伦理委员会批准同意。其中男44例,女 40 例；年龄 40~74 岁，平均年龄 52.36±3.16岁;体质量指数(Body Mass Index，BMI)16.0~24.6kg/m2,平均 22.15±1.46kg/m2;病程 1~6 年,平均 2.16±1.01 年；其中合并高血压26 例、糖尿病17 例、血脂异常14 例、冠心病9 例；文化程度：初中及以下28 例、高中及中专32 例、大专及以上 24 例；所有患者均有不同程度反复发作的喘息、气促、胸闷及咳嗽等症状。

1.2 入选标准

1.2.1 纳入标准 ⑴所有患者均符合 《中国支气管哮喘防治指南 （基层版）》[8]中支气管哮喘诊断标准，且经临床表现、肺功能检查等确诊；⑵患者及家属对本次研究知情并签署知情同意书；⑶依从性较好，可配合完成研究的患者；⑷入院前未使用过免疫抑制剂或激素类药物等干预；⑸无过敏性疾病的患者。

1.2.2 排除标准 ⑴合并心、肝、肾等重要脏器病变者；⑵合并慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张等慢性肺部疾病的患者；⑶合并免疫系统、消化系统或风湿免疫系统疾病的患者；⑷伴有精神疾病或认知功能障碍的患者；⑸合并恶性肿瘤。

1.3 方法

1.3.1 分组方法 参照《支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗和管理方案)》[9]评估84例支气管哮喘患者病情严重程度，其中轻度持续：第一秒用力呼气容积（Forced Expiratory Volume in the first second，FEV1）占预期值的百分比≥80%，1次/周≤胸闷、咳嗽等症状出现＜1 次/d，2 次/月＜夜间咳嗽症状＜1 次/周，将其设为轻度组；中度持续：60%≤FEV1 占预期值的百分比≤79%，胸闷、咳嗽等症状每日均存在,对患者活动及睡眠造成一定影响，夜间咳嗽症状≥1 次/周，将其设为中度组；重度持续：FEV1 占预期值的百分比＜60%, 患者每日频繁出现咳嗽、胸闷等临床症状，经常出现夜间哮喘症状，体力活动受限，将其设为重度组。

1.3.2 血清趋化因子CCL19、CCL21 检测法 采集所有患者入院时清晨空腹肘静脉血4~5ml，3000r/min 离心10min，分离血清后,将其置于-20℃环境中冷冻备用。采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) 检测所有患者血清CCL19、CCL21 水平；血清 CCL 19、CCL21 检测试剂盒均由美国R&D 公司提供；血清水平检测操作均严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0 统计学软件，全部剂量资料均经正态性检验，符合正态分布采用“”表示，3 组间比较采用单因素方差分析检验，组间两两比较采用SNK-q 检验；血清趋化因子CCL19、CCL21 与支气管哮喘患者病情的相关性采用一般线性双变量Pearson 直线相关性检验；支气管哮喘患者病情程度 （FEV1%） 对血清趋化因子CCL19、CCL21 的影响采用一般线性回归分析检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 支气管哮喘患者根据病情严重程度的分组情况 经《支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗和管理方案)》评估结果显示，84 例支气管哮喘患者中，有42 例病情轻度持续患者，占比50.00%（42/84），FEV1 占预期值的百分比为 87.69±3.07%；有29 例病情中度持续患者，占比34.52%（29/84），FEV1 占预期值的百分比为 70.11±2.86%;有13 例病情重度持续患者，占比15.48%（13/84），FEV1 占预期值的百分比为50.16±2.47%。

2.2 支气管哮喘不同病情程度患者血清趋化因子CCL19、CCL21 水平比较 重度组、中度组患者趋化因子CCL19、CCL21 水平高于轻度组，且重度组患者趋化因子CCL19、CCL21 水平高于中度组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同病情程度患者血清趋化因子CCL19、CCL21 水平比较（，ng/L）

表1 不同病情程度患者血清趋化因子CCL19、CCL21 水平比较（，ng/L）

注：与轻度组同指标比较，aP＜0.05；与中度组同指标比较，bP＜0.05

组别 例数轻度组中度组重度组42 29 13 F P--CCL19 CCL21 57.11±18.56 70.65±20.14a 81.02±21.64ab 8.929 P＜0.001 110.32±21.36 135.45±25.64a 157.89±24.39ab 23.911 P＜0.001

2.3 支气管哮喘病情严重程度（FEV1%）与血清趋化因子 CCL19、CCL21 水平相关性 经双变量Pearson 直线相关性检验结果显示, 血清趋化因子CCL19、CCL21 水平与支气管哮喘患者病情严重程度呈正相关（r＞0，P＜0.05），即随着支气管哮喘患者病情越重，其血清趋化因子CCL19、CCL21 水平越高。见表2。

表2 支气管哮喘病情严重程度与血清趋化因子CCL19、CCL21 水平相关性

2.4 血清趋化因子CCL19、CCL21 水平对支气管哮喘患者病情的影响的线性回归结果 将支气管哮喘患者病情严重程度作为因变量,将血清趋化因子CCL19、CCL21 水平作为自变量, 做线性回归检验得到线性回归方程结果显示, 血清趋化因子CCL1 9、CCL21 水平是气管哮喘患者病情严重程度（FEV1%）的影响因素（P＜0.05）,得到线性回归方程如下：Y=51.236＋12.269XCCL19+25.205XCCL21。见表3。

3 讨论

支气管哮喘发病机制较为复杂,目前认为气道炎症在疾病发生及发展中起到重要作用[10]。临床用于检测支气管哮喘气道炎症的方式较多,包括侵入性操作及非侵入性操作,其中前者被认为是评估气道炎症金标准，主要包括支气管镜内膜活检、诱导痰等，其可准确反应气道炎症情况，但该种方式对操作人员的技术要求较高，患者依从性差，临床应用受限[11]。呼出气一氧化碳是反映气道炎症反应较为准确的非侵入性操作检查方式,但该种检查方式价格昂贵，且准确性易受患者呼吸频率、屏气次数等因素影响，应用仍存在一定局限[12,13]。因此，探寻可客观、准确、实时反映支气管哮喘患者气道炎症指标十分重要，可进一步指导临床对哮喘的评估、诊断、治疗及管理等。

表3 支气管哮喘病情对血清趋化因子CCL19、CCL21 水平影响的线性回归结果

血清中炎症相关因子在哮喘病早期诊断、预后风险评估、疗效评估中受到重视[14]。趋化因子也称为趋化素或趋化激素，是一种小分子分泌蛋白，由70-100 个氨基酸组成, 主要包括CC、CXC、CX3 C、C4 个家族，其受到炎症因子的影响，对各种免疫细胞具存在一定趋化作用[15]。血清趋化因子CC L19、CCL21 均属于CC 类趋化因子家族成员，均是CC 趋化因子受体 7 （CC chemokine receptor 7，CCR7）的配体，由活化的T 淋巴细胞及内皮细胞产生，主要通过对树突状细胞的归巢进行趋化，进而转变为成熟细胞，参与激活T 细胞，调节机体免疫功能，促进炎症反应等作用[16,17]。CCL19、CCL21 也是内环境稳定性趋化因子，在气管内呈现高表达，具有调节炎症细胞的迁移功能,与多种呼吸系统疾病发生及发展具有密切关系，其中CCL21 与CCR7结合可促进细胞向趋化因子源处进行迁移[18,19]。研究报道，与CCL19 比，CCL21 对T 淋巴细胞及树突状细胞具有更强的趋化性；此外，CCL19 与气道平滑肌细胞CCR7 相结合，可在一定程度上参与哮喘气道平滑肌的增殖，CCL21 并无该作用，故二者虽然均属于CC 类趋化因子家族成员，但仍存在一定区别。李毅等[20]研究发现，CCL19、CCL21 可能参与肺间质病变的发生及发展过程。因此，本研究推测趋化因子CCL19、CCL21 在支气管哮喘患者病情发展中发挥重要作用。但目前关于其研究较少，且机制尚未明确。

FEV1 是评估肺功能重要指标之一，其不仅是一种容量测定，也是一秒内的流量测定，因支气管哮喘患者起到阻塞，使得呼吸时间延长，故FEV1占预期值有所降低,其对判定支气管哮喘病情严重程度具有重要价值。故本研究通过FEV1 评估支气管哮喘患者病情,并分析支气管哮喘患者血清趋化因子CCL19、CCL21 与病情的相关性，研究结果显示,重度组、中度组患者趋化因子CCL19、CCL21 水平高于轻度组,且重度组患者趋化因子CCL19、CC L21 水平高于中度组,结果提示,血清趋化因子CCL 19、CCL21 水平越高,支气管哮喘患者病情越严重，这也初步证实血清趋化因子CCL19、CCL21 与支气管哮喘患者病情的关系;进一步做一般线性双变量Pearson 直线相关检验结果显示，血清趋化因子CCL19、CCL21 水平与支气管哮喘患者病情严重程度呈正相关, 进一步证实随着血清趋化因子CCL 19、CCL21 水平越高,支气管哮喘患者病情越重；最后做线性回归检验得到线性回归方程结果显示，血清趋化因子CCL19、CCL21 水平是气管哮喘患者病情严重程度（FEV1%）的影响因素，故推测临床可将CCL19、CCL21 作为评价支气管哮喘患者气道炎症的重要指标,对评价病情严重程度具有一定应用价值。

综上所述，血清趋化因子CCL19、CCL21 与支气管哮喘患者病情存在一定相关性,临床可通过早期持续监测患者血清CCL19、CCL21 水平，并采取相应防范措施，对延缓疾病进展起到重要作用。