岳 稳 傅光华 黄 瑜*
(1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013;2.龙岩学院 福建龙岩 364000)
鸭瘟(Duck plague,DP),又称为鸭病毒性肠炎(Duck virual enteritis,DVE),是由鸭瘟病毒引起鸭、鹅及天鹅等雁形目禽类发生急性、热性和败血性传染病[1-2]。鸭瘟可感染不同品种及不同日龄鸭,传播迅速、流行广泛,发病急、病死率高,是危害养鸭业的主要疫病之一。鸭瘟最早由Baudet等于1923年首次报道在荷兰发生,我国最早是黄引贤在1959年报道广州出现首例鸭瘟病例[3]。福建省于1998年出现樱桃谷肉鸭感染鸭瘟病例,此后至2015年这17年间均未见鸭瘟报道,然而2016年初开始,福建省部分地区肉鸭陆续出现疑似鸭瘟的病例[4-5]。该文就一起福建省连城县某鸭场饲养的麻鸭感染鸭瘟的诊断详细报道如下,以期为同行提供参考和借鉴。
2019年12月初,福建省农业科学院畜牧兽医研究所接诊一起来自福建省连城县的160日龄麻鸭病例。据主诉,11月25日有部分鸭只出现精神沉郁、食欲减退,3 d后有的鸭只头部肿大、急性死亡,2 d内每天死亡200多羽,病死率20%。
剖检送检的病死鸭,可见食道黏膜覆盖大量假膜,散布大小不等的溃疡出血带;肝脏出血、胰腺出血,脑膜充血;肠道黏膜出血,泄殖腔出血。其余组织均无明显眼观病变。
3.1 临床样品处理 无菌采集病死鸭肝脏、脾脏组织,一部分用于细菌分离培养;另一部分加入含抗生素(青霉素1 000 U/mL、链霉素1 000 ug/mL)的PBS缓冲液研磨匀浆,制成20%混悬液。
3.2 细菌分离培养 将采集的病死鸭肝脏、脾脏组织样品,分别取样划线接种血琼脂平板进行细菌分离培养,并观察2 d。结果未见细菌生长。
3.3 样品 (RT-)PCR检测 以病毒DNA/RNA抽提试剂盒,按产品说明书提取样品中的核酸,分别进行禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、禽1型副粘病毒、鸭瘟病毒和鸭圆环病毒等检测。PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶进行电泳。结果,仅鸭瘟病毒呈阳性,其余病毒均呈阴性。扩增片段送生物试剂公司进行测序,测序结果表明获得的扩增片段序列与GenBank数据库中的鸭瘟病毒序列同源性为99.6%以上。
图1 样品PCR产物电泳图
3.4 病毒分离鉴定 将制备的肝脾组织混悬液离心取上清,经尿囊腔接种5枚11日龄鸭胚,每枚接种0.2 mL。之后于37℃恒温培养,连续观察7 d。无菌收集致死鸭胚尿囊液,对所收集尿囊液测定血凝活性并再次进行以上病毒检测。结果显示收集的死亡鸭胚尿囊液毒不凝集SPF鸡红细胞,经PCR检测结果显示分离病毒仅呈鸭瘟病毒阳性,其余病原均为阴性。
根据发病情况、临床症状、剖检病变及实验室检测结果,确诊该麻鸭群感染鸭瘟。
5.1 紧急分类和消毒 对发生鸭瘟的该群麻鸭及其鸭舍、场地等进行紧急消毒,每天1次、连续3 d;从发病鸭群中挑出患鸭并淘汰,与死亡鸭一同进行无害化处理。
5.2 紧急接种疫苗 对发生鸭瘟的该群麻鸭每羽紧急注射3倍量的鸭瘟活疫苗,并在饮水中适当添加维生素C和葡萄糖,连饮3~4 d。
由于确诊快、处理快,该批发病麻鸭群于紧急注射鸭瘟疫苗后4 d起病死鸭数量明显减少,于第7 d未见病死鸭,较好控制了疫情。
1)该群发病麻鸭于紧急注射鸭瘟活疫苗后4 d起病死鸭数量明显减少,于第7 d未见病死鸭,疫情得到较好控制,表明紧急注射鸭瘟活疫苗对控制鸭瘟疫情有效,也表明当前养鸭生产中可用现有的鸭瘟活疫苗进行免疫预防鸭瘟和发生鸭瘟时的紧急接种,鸭瘟病毒还未出现变异。
2)从全国情况看,虽然鸭瘟不呈大面积暴发,但仍有零星发生。因此,养鸭企业(户)平时养殖中应加以防范,加强饲养管理,搞好环境卫生;同时,定期对鸭群做好鸭瘟疫苗的免疫;引进种苗、种蛋或种鸭时均应来自安全地区。
3)鸭瘟可感染不同品种、不同年龄的鸭,但发病率和病死率存在一定差异,雏鸭发病率低于成年鸭,以往研究也表明雏鸭在20日龄内极少发生该病,但近年来发现鸭瘟最早可在7日龄内发病,呈现一种低龄化的趋势[6-7]。