百菌清杂质六氯苯和十氯联苯的分析方法研究

宋 辉

（江苏新河农用化工有限公司，江苏新沂 221400）

六氯苯和十氯联苯是在百菌清生产过程中形成的氯化杂质，属于持久性的很难被降解的有机污染物，易于在生物体内和环境中积累，并且是一种对人体有害的能够致癌的有害物质。国际粮农组织FAO标准将百菌清中杂质六氯苯和十氯联苯的含量进行控制，并且对其含量要求越来越严格。国家标准（GB/T 9551-2017）规定采用液相色谱法对六氯苯和十氯联苯的含量同时进行测定，但该方法检测灵敏度较低，百菌清中低含量的六氯苯和十氯联苯的含量无法准确定量。本方法采用灵敏度更高、选择性更好的气质联用技术对百菌清杂质六氯苯的含量进行分析测定。

1 实验部分

1.1 仪器

气质联用色谱仪：Agilent 7890B/5977B气质联用色谱仪，MassHunter工作站，万分之一分析天平，超声波振荡器。

1.2 试剂

六氯苯标样：已知质量分数≥99.0%；十氯联苯标样：已知质量分数≥98.5%；甲苯：色谱纯，分析无干扰物。

1.3 色谱操作条件

色谱柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25µm）；溶剂延迟：5min；程序升温：初始温度60℃（1min），40℃/min 升温至180℃，20℃/min 升温至280℃（3min）；进样体积：1.0µL；柱流量：1mL/min；分流比：30∶1；离子源：EI；采集模式：SIM；进样温度：220℃；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；传输线温度：280℃；碰撞能量：70eV。

1.4 实验步骤

1.4.1 标样溶液配制

标准储备溶液：分别称取六氯苯标样和十氯联苯标样0.01g（准确至0.000 1g）于100mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀释至刻度，摇匀。

标准溶液：用移液管移取上述0.4ml的溶液A于100mL容量瓶中。加入甲苯稀释至刻度，摇匀。

1.4.2 试样溶液的配制

称取试样约0.2g（准确至0.000 1g）于10mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀释至刻度，摇匀。

1.4.3 测定方法

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针响应值，直至相邻两针的响应值变化小于5.0%，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的进样顺序进行测定。

1.5 计算

将测得的两针试样溶液中的六氯苯/十氯联苯的峰面积和试样前后的两针标样溶液中六氯苯/十氯联苯峰面积分别进行平均，试样中六氯苯/十氯联苯的含量X(μg/g)按下式计算：

式中：A1为标样溶液中的六氯苯/十氯联苯峰面积的平均值；A2为试样溶液中的六氯苯/十氯联苯峰面积的平均值；m1为标样的质量，g；m2为试样的质量，g；w为标准样品中六氯苯/十氯联苯的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

百菌清原药中杂质组分多且沸点范围宽，在满足六氯苯与其他杂质有效分离的同时，尽量缩短十氯联苯的流出时间，是本方法色谱条件选择的关键。通过多次实验，最终选择DB-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25µm），并通过调整气相色谱程序升温，使六氯苯达到最大程度分离的同时，十氯联苯也在适宜的时间流出。

2.2 质谱条件的选择

对六氯苯和十氯联苯的定性分析采用全扫描模式（Scan），在全扫描方式下获得六氯苯、十氯联苯的总离子流谱图，定量测定采用选择离子模式（SIM）。本方法选择相对丰度强，碎片离子质量较大，且相互干扰少的特征离子进行SIM检测。对于六氯苯，以m/z 283.8作为定量离子时，由于样品基质对其干扰较大，故选择丰度较次之的m/z 285.8离子作为六氯苯检测的定量离子；对于十氯联苯，选择丰度强且无干扰的m/z 497.7和499.7作为定量离子。

2.3 方法的线性相关性

分别配成0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.6μg/mL的6个不同浓度的六氯苯、十氯联苯混合标样溶液。按上述色谱条件分别进样，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标建立标准曲线。结果表明，在浓度范围内，六氯苯标准溶液浓度和吸收峰面积之间有良好的线性关系，回归方程为y=15 666x+17.072，相关系数r=0.999 2，线性相关图（图1）。十氯联苯苯标准溶液浓度和吸收峰面积之间有良好的线性关系，回归方程为y=13 305x-1.810 8，相关系数r=0.999 4，线性相关图（图2）。

2.4 方法的精密度试验

分别称取6个平行试样（准确至0.000 1g），测得百菌清中杂质六氯苯的含量为0.025μg/g，相对标准偏差为0.15%，变异系数为6.0%，具体数据见表1。

图1 六氯苯线性相关性图

图2 十氯联苯线性相关性图

表1 百菌清中杂质六氯苯和十氯联苯含量精密度测定结果

2.5 方法准确度的测定

在已知含量的样品中，分别加入不同体积的的六氯苯和十氯联苯混合标样溶液，按照上述方法进行6次加标回收率的测定。结果表明，六氯苯的回收率为99.56%～100.63%，平均回收率为100.01%，十氯联苯的回收率为99.02%～100.47%，平均回收率为99.77%，结果见表2。

表2 百菌清中杂质六氯苯和十氯联苯含量准确度测定结果

3 结论

本方法的准确度和精密度较高，线性关系良好，且分离效果也能满足产品的检验要求，可适用于百菌清中杂质六氯苯和十氯联苯的含量控制检测。