乌兰温都苏-10 活血胶囊丹参酮提取工艺研究

韩风雨通讯作者，王亚辉，于秀玲，孟令江，上官同强

（1.内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司，内蒙古 赤峰 024000；2.内蒙古博奥蒙中药工程研究院有限公司，内蒙古 赤峰 024000）

0 引言

乌兰温都苏-10 活血胶囊具有活血化淤，通络止痛之功效，是蒙医临床使用多年的验方[1]。临床用于治疗冠心病，心绞痛。将冠心活血汤散剂改革为乌兰温都苏-10 活血胶囊，具有提高药物稳定性、起效快的特点。研发该品种对推动蒙医药的现代化发展和提高蒙药的质量可控性具有一定的意义。乌兰温都苏-10 活血胶囊主要由丹参、檀香、降香、山柰等十味蒙药材组成，丹参为处方中主药。该药所含药材味数多，成分较复杂。现代研究表明丹参酮ⅡA 在治疗冠心病、修复心肌、调节微循环等方面都具有重要的应用价值，本文重点就丹参中丹参酮提取进行研究，采用醇提方法对丹参酮进行单独提取，并通过正交试验确定提取工艺最优参数[2]。

1 仪器与试药

美国Thermo Fisher U3000 高效液相色谱仪；瑞士梅特勒MS105DU 电子天平（十万分之一）等。

甲醇（VBS 公司，批号934002），娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司），其他试剂均为分析纯。

丹参酮ⅡA（批号：110766-201721），购于中国食品药品检定研究院。检定样品来源于内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司。

2 方法与结果

2.1 正交设计优化丹参酮醇提工艺。根据文献资料确定考察因素为：醇浓度、加液量、回馏时间和回馏次数，各因素确定三个水平，详见表1。

表1 乌兰温都苏-10 活血胶囊丹参酮提取工艺考察因素及水平

实验方法。取样品9 份，每份精密称取丹参300 g，按照正交试验L9（34）表的条件安排试验，提取完成后，回收乙醇，浓缩，定容至1000 mL 容量瓶中，得9 份提取液样品。各样品液摇匀，各取1 mL，分别置三角瓶中蒸干，加入甲醇50 mL，回流1h，过滤，定容，备用。

2.2 丹参酮ⅡA 的含量测定。精密称取丹参酮ⅡA（批号：110766-201721）2.04 mg 于10 mL 容量瓶中，精密吸取2 mL，用甲醇定容至25 mL，备用。将上述提取的9 份样品液，用微孔滤膜过滤，弃去初滤液，收集续滤液于EP 管中，进样10μl，以甲醇/水=75：25 为流动相，气体压力3.0 kpa，检测器温度70℃，测定丹参酮ⅡA 的含量，结果见表2。

表2 9 份样品所含丹参酮ⅡA 实验结果

2.3 数理统计得出结果。将表2 中含量测定结果，经数理统计学处理，结果见表3。

表3 L9（34）正交实验设计表及实验结果

从表中数据可以看出，各因素的影响规律为：B＞D＞C＞A，最佳工艺条件为A3B3C3D3。即90%的乙醇溶液，10 倍加液量，回流提取2.5h，提取3 次。将表3 数据经统计学处理后进行方差分析，结果见表4。

方差分析结果表明：B 因素水平之间具有显著性的差异，A、C、D 因素水平之间无显著性的差异。

结合直观分析结果和方差分析结果，冠心活血胶囊中丹参醇提最佳工艺条件为：A3B3C3D3，即药材每次加入10 倍量的90%乙醇，回流提取2.5 小时，提取3 次。

表4 方差分析表

3 讨论

本实验采用HPLC 法测定经过正交试验后丹参中丹参酮ⅡA 的含量，能够综合评价最终提取工艺的好坏[3]。该提取方法简便，可用于乌兰温都苏-10 活血胶囊的提取工艺中对丹参酮的提取，并为生产乌兰温都苏-10 活血胶囊提供质量保证和依据。