196例血清意外抗体的特点分析

董 林 包 进 赵昕亚 张瑞生 徐 菲

(南京医科大学附属南京医院/江苏省南京市第一医院输血科，南京市 210006，电子邮箱：1262725610@qq.com)

输血是临床疾病治疗的重要手段之一，在输血之前需要进行相应的交叉配血，以检验患者和供血者双方的血型以及两者的血液成分相容性，这也是输血科或者血库的主要工作，理论上需要供受双方的红细胞和血清完全相容才可以进行输注。而在实际工作中，因患者输血次数增加、病情变化等因素，会造成意外抗体的出现，从而导致血型鉴定以及交叉配血困难，进而延迟患者输注血制品的时间，对患者的治疗造成很大的影响。意外抗体，即不符合传统的ABO血型Landsteiner规则的血型抗体，也被称为意外抗体[1]，主要为血清中抗A和抗B以外的抗体，此种抗体可能会导致患者发生溶血性输血不良反应，从而对患者的生命造成威胁[2]。本研究总结196例血清意外抗体的特点，以探讨意外抗体检测的意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 病例来源 2017年7月至2019年7月我院输血科收到的存在意外抗体的标本共196例，均为交叉配血不合(包括主侧和/或次侧凝集)、血型正反定型不符或意外抗体筛查阳性，且经南京市红十字血液中心鉴定出意外抗体。交叉配血供血者血液来自南京市红十字血液中心。

1.2 方法

1.2.1 仪器和试剂： 血型仪及配套ABO正反定型、Rh血型鉴定卡购自强生公司；反定型细胞、抗人球蛋白检测卡(意外抗体筛检卡、交叉配血卡)、意外抗体筛检试剂(人红细胞)均购自长春博迅生物科技有限公司；意外抗体鉴定细胞谱试剂购自荷兰Sanquin公司；37℃孵育器和抗人球蛋白检测相应离心机均购自长春博研科学仪器责任有限公司；标本离心机购自北京白洋医疗器械有限公司；生理盐水(0.9%氯化钠注射液)购自安徽双鹤药业有限责任公司。

1.2.2 血型鉴定： 将患者全血标本以3 500 r/min离心4 min后，放入血型仪进行全自动血型鉴定。

1.2.3 意外抗体筛查： 将患者全血标本以3 500 r/min离心4 min，分离血清，将血清和意外抗体检测试剂(人红细胞)各50 μL加入抗人球蛋白检测卡中，37℃孵育15 min，900 r/min离心2 min、1 500 r/min离心5 min后读取结果。

1.2.4 交叉配血： 将患者和供血者的全血标本分别以3 500 r/min离心4 min，分离血清，并取压积红细胞用生理盐水配置成1%红细胞悬液。分别将患者血清和供血者1%红细胞加入抗人球蛋白检测卡(交叉配血卡)一孔中，另一孔加入患者1%红细胞和供血者血清，37℃孵育15 min，900 r/min离心2 min、1 500 r/min离心5 min后读取结果。

1.2.5 意外抗体的鉴定：出现血型鉴定正反定型不符、意外抗体筛检阳性、交叉配血不符中的任一种情况，均需重新抽血送至南京市红十字血液中心进行意外抗体的具体鉴定，方法同意外抗体的筛查，细胞谱试剂为荷兰Sanquin公司产品。

2 结 果

2.1 意外抗体的病区分布 196例意外抗体病例中，来自血液科和ICU的病例最多，其次为心脏科，见表1。

表1 196例意外抗体病例的病区分布

2.2 意外抗体病例的血型分布 196例意外抗体病例中，B型血型病例最多，占32.1%(63/196)，其次为O型及A型，分别占28.6%(56/196)、24.0%(47/196)，最少为AB型，占15.3%(30/196)。

2.3 意外抗体种类 自身抗体最为常见，其次为自身IgG抗体及Rh类抗体，见表2。

表2 意外抗体种类

3 讨 论

输血已经成为一种重要的临床治疗手段，而输血前的血型鉴定和交叉配血是最为关键的操作，只有患者和供血者的血型和交叉配血相合才可以进行输注。而输血也被认为是造成意外抗体出现的最主要原因[3]。意外抗体会导致血型鉴定或者交叉配血等疑难情况的出现，只有对患者血清中意外抗体的类型进行确认，血液中心才能够提供相合的血液给患者进行输注，以避免不良反应的发生。

本研究的196例意外抗体病例中，血液科和ICU的病例最多，其次为心脏科。有研究表明,输注1个单位红细胞会导致1%的红细胞致敏，而多次输血后意外抗体的发生率也会提高5%～20%[4]。血液科患者由于原发疾病而出现不同程度的贫血、ICU和心脏科患者由于基础疾病较为复杂，通常均需要输血进行治疗，因此以上病区的患者出现意外抗体的概率较大。196例意外抗体病例中，AB型血型的病例最少，其余3种血型相差不大，这可能与人群中AB型血型比例较低有关。

意外抗体主要是由于免疫刺激所致，大部分属于IgG，此类抗体在盐水中不容易出现凝集，而采用微柱凝胶法可以产生凝集现象[5]。有研究表明，意外抗体的类型主要是IgG类和Rh类[6]。本研究结果显示，IgG和Rh类抗体也是较为常见的意外抗体类型，分别占31.1%、21.4%。在Rh类抗体中，以抗E抗体最为常见，有研究显示抗E抗体在Rh类抗体中约占57%[7]。本研究中抗E抗体在Rh系统中的比例为50%，与该结果相近。而抗E抗体阳性通常被认为主要出现在多次输血的患者中[8]，对于血液科、ICU等需要反复输血的科室，可以增加对此类患者进行Rh系统抗原表型测定的频率，从而保障其在紧急用血时可以快速提供相应的血液，以挽救生命。

本研究中，Rh、MNS、Kidd、Lewis系统抗体所占比例依次降低，其中以Rh系统的抗E抗体出现的比例最高，而MNS、Lewis、Kidd系统抗体所占比例较低，均不足10%，这与相关文献[9-10]报告的结果类似。MNS系统复杂性仅次于Rh系统，也是第二个被发现的血型系统。MNS系统的抗M抗体有IgM和IgG两种类型，较为多见的是IgM，它是一种天然抗体，在4℃以下会激活补体导致变态反应的发生，而在37℃无凝集现象的出现，通常被认为没有临床意义，因为在交叉配血过程中有37℃孵育的操作，因此会造成漏检，虽然其阳性率较低，但是在输血检验的过程中也需要加以重视；IgG类抗M抗体较为少见，其通常与IgM类抗M抗体同时混合存在于血浆中，在37℃温度下有较强的活性，可以与红细胞上的M抗原反应，因此其对于临床输血有着明显的意义。此外，Kidd系统的抗JK抗体是免疫抗体，通常是由于受到JK抗原刺激产生，在中国人群中较少，在体外和体内的活性较弱[11]。抗Lea抗体是Lewis系统最为常见的抗体，和MNS系统抗体一样，多数为IgM型，其系统抗原在组织液中可以大量的存在，也可以中和部分抗体，因此抗Lea抗体极少引起输血不良反应。抗P1抗体也属于冷抗体系列，在30℃以上一般不会出现凝集反应。

随着医疗技术的不断发展，以及病情的不断变化，临床对于输血的需求也越来越大，对于血型鉴定的困难也逐渐增多。目前，很多医院包括笔者所在医院的输血科，用于意外抗体鉴定的标准细胞仅为三种一组，细胞谱较窄，多数情况下无法确定血型抗体的类别，只能送到血液中心进行具体确定，使临床用血不能及时到位。而在交叉配血过程中，传统的聚凝胺方法时间较短，但是出错的可能性较大；微柱凝胶法时间虽长，但可以大大提高配血的安全性。在我院，除了特殊紧急情况下进行聚凝胺法检测外，其余均采用微柱凝胶法进行配血。在输血前对于意外抗体的筛查十分必要，特别是对于反复输血或者有妊娠史的患者更加需要重视，及早发现相应的意外抗体，选择对应抗原阴性的血液进行输注，可以有效避免输血不良反应的发生。而血型系统的复杂性，也对输血科的人员技能和设备提出了更高的要求，配备更多更有效的谱细胞，可以及早检测出相应的血型抗体，减少了配血所需时间，确保了临床用血的合理、有效、安全。