外周血T淋巴细胞亚群与乙型肝炎患者病情程度的关联性探究

（河南省柘城县人民医院 输血科，河南 商丘 476200）

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）是诱发乙型肝炎的嗜肝DNA 病毒，人体感染后可发展成为无症状病毒携带者或急慢性乙型肝炎患者，病情迁延难愈，长期病毒感染可进展为肝癌或肝硬化等严重疾病［1］。目前，乙型肝炎发病机制尚不明确，有学者认为，当HBV 进入机体后可诱发一系列免疫应答反应，而免疫应答强弱与HBV 所致不同临床结果紧密相关，并在免疫应答反应中细胞免疫最为重要［2］。据统计，成人、儿童、幼儿不同免疫应答水平人群感染HBV 后分别存在5%、30%、95%的感染者发展成为慢性乙型肝炎，说明机体免疫成熟程度是HBV 持续感染相关重要因素之一［3］。外周血T 淋巴细胞为机体主要免疫细胞，其比例、数量可反映人体免疫水平。本研究为探究T 淋巴细胞亚群能否评估乙型肝炎患者病情程度及其在HBV 感染中的作用，对72 例乙型肝炎患者进行外周血T 淋巴细胞亚群检测与分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究经本院伦理委员会审批通过，选取本院2018 年5 月至2019 年5 月接收的乙型肝炎患者72 例为肝炎组，其中轻度18 例，中度30 例，重度24 例，男39 例，女33 例；年龄21～65 岁，平均（44.10±8.20）岁。选取同期健康体检者52 例为对照组，男30 例，女22 例；年龄19～64 岁，平均（43.25±7.87）岁。两组年龄、性别等资料均衡可比（P＞0.05）。

1.2 选取标准

1.2.1 纳入标准 符合2015 年版《慢性乙型肝炎防治指南》［4］中乙型肝炎相关诊断标准，并经临床确诊为乙型肝炎；签署本研究知情同意书。

1.2.2 排除标准 恶性肿瘤者；感染性疾病者；无法配合完成研究者；近期接受免疫调节、保肝、抗病毒等相关治疗者；其他类型肝病者；自身免疫系统疾病者；凝血功能障碍者；血液系统疾病者；先天性自身免疫缺陷者。

1.3 外周血T 淋巴细胞亚群检测方法

采集1.5 mL 晨空腹外周静脉血，EDTA-2Na抗凝，利用流式细胞仪（型号：FACSVia，厂家：美国BD 公司）进行荧光标记抗体检测，T 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）水平检测采用单克隆抗体及组合：TC-CD3/FITC-CD4/PE-CD8，同型阴性对照：Tc-IgG2a/PE-IgG2a/FITC-IgG2a，检测所用试剂及试剂盒购自上海酶联生物，所有操作均按照试剂说明书严格执行操作。

1.4 观察指标

①观察不同病情程度乙型肝炎与对照组外周血T 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+） 水平；②分析T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与乙型肝炎病情程度相关性。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平变化

肝炎组T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平低于对照组，肝炎组中度、重度CD4+/CD8+比值低于对照组（P＜0.05），且肝炎组T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平随病情程度加重而逐渐递减（P＜0.05），肝炎组重度CD4+/CD8+比值低于轻度者（P＜0.05），见表1。

表1 T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平变化 （）

表1 T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平变化 （）

注：1）与对照组相比，P＜0.05；2）与轻度相比，P＜0.05；3）与中度相比，P＜0.05。

2.2 T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与乙型肝炎病情程度相关性

经Spearman 相关性分析，T淋巴细胞亚群CD3+水平与乙型肝炎病情程度呈负相关（r=-0.732，P＜0.001）；T 淋巴细胞亚群CD4+水平与乙型肝炎病情程度呈负相关（r=-0.598，P＜0.001）；T 淋巴细胞亚群CD8+水平与乙型肝炎病情程度呈负相关（r=-0.682，P＜0.001）。

3 讨论

研究发现，HBV 感染致病机理与免疫系统状态密切相关［5］，HBV 侵入机体后所致免疫应答反应会造成肝脏病变，而在肝细胞损害中细胞免疫占据主导作用［6］。T 淋巴细胞亚群是机体主要免疫细胞之一，对抗原识别、激活能力及产生的相关趋化与调节因子均对病情程度及转归存在不同程度影响。T 淋巴细胞是介导细胞免疫应答的主要免疫细胞，T 淋巴细胞可分为若干亚群，机体正常情况下，细胞亚群间保持动态平衡状态，是机体发挥正常免疫功能的基础，各亚群间可相互制约、相互作用，共同参与免疫应答反应［7-8］。有研究指出，T 淋巴细胞亚群数量、比例可反映机体免疫水平，其中CD3+、CD4+除在机体免疫应答中具有辅助、诱导作用外，还可促进淋巴因子分泌，开启迟发性超敏反应，激发巨噬细胞活化，产生肝细胞损伤效应，而其水平下降、功能衰退可直接造成细胞免疫功能低下［9］。CD8+是一种重要免疫细胞，其产生依赖于CD4+细胞的存在，并对病毒感染肝细胞、相关病毒具有重要清除作用，同时CD4+细胞亚型可通过直接溶解病毒感染肝细胞而间接清除病毒，从而减轻肝脏病变程度［10］。本研究发现，肝炎组T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平低于对照组（P＜0.05），并随病情程度加重而逐渐递减，提示乙型肝炎病毒感染均存在不同程度的免疫功能低下，且病情越重免疫功能越弱。此外，CD4+/CD8+比值失衡是机体多种免疫病理改变、细胞免疫系统紊乱的重要标志之一，CD4+淋巴细胞数量减少，CD4+/CD8+比值随之降低，而机体细胞免疫低下是造成HBV 持续感染重要因素之一［11］。本研究发现，不同病情程度乙型肝炎患者CD4+/CD8+比值呈下降趋势，但缺乏一定规律，表明T 淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值变化不能完全判定乙型肝炎病情程度。另外，本研究发现，T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与乙型肝炎病情程度呈负相关（P＜0.05），表明T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平越低，乙型肝炎病情越严重，可为临床选择合理治疗方案提供循证依据。

综上所述，外周血T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与乙型肝炎病情程度呈负相关，而T 淋巴细胞亚群水平变化、免疫功能紊乱是乙型肝炎肝细胞受损、向慢性化转变重要机制，增强T 淋巴细胞免疫、提高机体免疫应答水平，对延缓或阻止病情进展具有重要意义。