三黄矾冰烧伤中药油对小鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合的影响

黄梅， 王晶晶， 傅思莹， 香雪玮， 顾笑颜

（广州中医药大学第一附属医院，广东广州 510405）

烧伤是临床常见疾病，物理、化学、放射等多种因素均会造成烧伤。三黄矾冰烧伤中药油是我院乳腺科黄梅教授的经验方，具有解毒止痛、敛湿止痒、敛疮润肤的功效。本研究通过对比不同浓度、不同配伍烧伤中药油对小鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合情况的影响，为临床确定三黄矾冰烧伤中药油的最佳配伍方案提供依据，现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物SPF级昆明小鼠30只，雄性18只，雌性12 只，体质量35 ～40 g，由广东省医学动物实验中心提供，动物质量合格证号：SYXK（粤）2013-0092。室温控制在（24 ± 2）℃之间，湿度50%～70%，通风每天2～3 次，每次1 h。雌雄小鼠分笼饲养，每笼6 只。控制昼夜光照，昼14 h、夜10 h。避免过多噪声及其他干扰。给予通用鼠料喂养，饮水采用自来水，不限食水。

1.2 药品及制备三黄矾冰方由黄连、大黄、黄柏、明矾、冰片等组成；三黄方由黄连、大黄、黄柏组成；矾冰方由明矾、冰片组成。药物剂量：三黄矾冰方高剂量组各原料药材均为15 g、中剂量组各原料药材均为10 g、低剂量组各原料药材均为5 g；三黄方、矾冰方各原料药材剂量为10 g。制备方法：将各原料药材研成细粉，一起放入70～80 ℃橄榄油100 mL 中，密闭浸泡1 周，过滤去渣即得烧伤中药油。

1.3 试剂与仪器5%水合氯醛（青岛宇龙海藻有限公司）。BX51显微镜（日本Olympus公司）。

1.4 造模方法参照刘颖等[1]经验建立小鼠皮肤烫伤模型：（1）第1 天：将小鼠剪去背毛，然后用40 ℃温热的脱毛剂涂在小鼠背部脊柱两侧区，脱毛面积3 cm × 4 cm 左右，5～10 min 后用清水洗净，观察24 h，确定脱毛部位无红肿、炎症和破损等异常情况。（2）第2 天：保持室温（20～24 ℃），先将小鼠用5%水合氯醛（0.001 mL/g）腹腔麻醉后，将小鼠置于俯卧位，四肢伸展，用胶带将其四肢固定在操作板上，使背部皮肤平坦。用小电推推去小鼠背部毛发，范围约6 cm，面积大于预计烧伤面积，将20 g 的砝码置于锅内加热至沸，维持10 min，用体积分数75%乙醇消毒小鼠实验区皮肤后，然后用钳子夹住砝码上端，迅速放在小鼠皮肤上5 s，并稍加压力，即可形成烫伤面积为2 cm×2 cm 的浅Ⅱ度烫伤模型。烧伤判断标准详见表1。烫伤后局部皮肤呈瓷白色，表皮皱缩，常见局部皮肤有溃破，正常区域与烫伤部位清晰可辨，烫伤4 h 内皮下组织水肿明显。（3）随机抽选1 只小鼠取其创面组织做病理组织学检查，镜下见小鼠烫伤区域表皮消失，表皮全层、真皮浅层受损，皮下组织水肿，皮下组织中可见急慢性炎细胞浸润，符合浅Ⅱ度烫伤。

表1 烧伤判断标准[2]Table 1 Burn judgement standard

1.5 分组按随机数字表抽取30只昆明小鼠随机分为空白组，三黄矾冰方高、中、低剂量组，三黄方组，矾冰方组共6 组，每组5 只。烧伤4 h 后各给药组烧伤区域分别对应涂抹给药，0.2 ～0.5 mL/次，每天3次，连续14 d。空白组使用0.9%生理盐水涂抹。

1.6 观察指标与方法

1.6.1 创面结痂时间 记录每只小鼠创面结痂的时间进行比较。

1.6.2 皮损愈合率 治疗后第7、10、14 天采用描记加称重法测定局部皮损面积[3]。先用透明胶片标记皮损范围，后剪下与皮损面积大小相应的透明胶片称其质量，以质量代替面积。皮损愈合率=（原始创面面积-未愈合创面面积）/原始创面面积×100%。

1. 7 统计方法采用SPSS 20.0 软件进行数据处理。所得数据以均数±标准差(±s)表示，对各组数据行正态性检验及方差齐性检验，组间比较用单因素方差分析或重复测量方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 皮损愈合率结果见表2。

表2 各组小鼠皮损愈合率的比较Table 2 Comparison of the wound healing rate in various groups （±s，p/%）

表2 各组小鼠皮损愈合率的比较Table 2 Comparison of the wound healing rate in various groups （±s，p/%）

各组治疗前后比较：F=175.48，P＜0.05；各组交互效应比较：F=0.96，P＞0.05；第14天各组组间比较：F=5.17，P＜0.05；①P＜0.05，与同期空白组比较；②P ＜0.05，与同期矾冰方组比较；③P＜0.05，与同期三黄矾冰方低剂量组比较

组别空白组三黄矾冰方高剂量组三黄矾冰方中剂量组三黄矾冰方低剂量组矾冰方组三黄方组N/只555555治疗后第7天42.50±8.48 53.68±11.06 52.85±9.67 49.00±8.57 42.80±8.86 48.70±6.41治疗后第10天54.00±4.49 70.75±7.33①64.30±13.83 61.20±8.26 59.95±7.88 64.50±10.35治疗后第14天65.40±4.92 88.55±1.08①②③88.60±2.15①②③78.35±4.50①78.50±10.03①83.30±6.96①

2.1.1 自身治疗前后比较 随着时间推移，各组皮损均不同程度修复，时间越长，愈合越好（治疗前后比较，P＜0.05）。皮损愈合率以三黄矾冰方高剂量组治疗后第14 天最高（88.55±1.08）%，空白组治疗后第14天最低（65.40±4.92）%。

2.1.2 组间比较 经重复测量方差分析比较结果显示：治疗后第7天各治疗组皮损愈合率高于空白组，但组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后第10 天，三黄矾冰方高剂量组皮损愈合率较空白组明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05），其他治疗组皮损愈合率与空白组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。治疗后第14天，各治疗组皮损愈合率均较空白组增高，差异有统计学意义（P＜0.05），治疗组中三黄矾冰方高、中剂量组皮损愈合率明显高于三黄矾冰方低剂量组及矾冰方组，差异有统计学意义（P＜0.05）；三黄矾冰方高、中剂量组间及三黄方组、矾冰方组、三黄矾冰方低剂量组间疗效无明显差异（P＞0.05）。由此可见，三黄矾冰方促进皮损愈合能力明显优于矾冰方、三黄方。

2.2 创面结痂时间单因素方差分析比较结果显示：各治疗组结痂时间均明显优于空白组，差异有统计学意义（P＜0.05）。各治疗组组间比较结果显示：三黄矾冰方高、中剂量组及三黄方组创面结痂时间明显优于三黄矾冰方低剂量组、矾冰方组，差异有统计学意义（P＜0.05）；三黄矾冰方高、中剂量组与三黄方组组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结果见表3、图1。

3 讨论

烧伤属于中医学“水火烫伤”范畴，中医学对烧伤治疗积累了丰富的经验，外治法在其中占据了重要的地位。早在《五十二病方》中就有关于烧伤外治的记载。晋代葛洪《肘后备急方》指出：“烫火伤用年久石灰敷之，或加油调。”“猪油煎柳自皮成膏外敷。”明确提出了烧伤治疗可用油膏剂。清代《医宗金鉴》记载应用“黄连膏”治疗烧伤，其中黄连、黄柏是主要药物。

表3 各组小鼠创面结痂时间的比较Table 3 Comparison of the wound healing time in various groups (±s)

表3 各组小鼠创面结痂时间的比较Table 3 Comparison of the wound healing time in various groups (±s)

①P＜0.05，与空白组比较；②P＜0.05，与矾冰方组比较；③P＜0.05，与三黄矾冰方低剂量组

组别空白组三黄矾冰方高剂量组三黄矾冰方中剂量组三黄矾冰方低剂量组矾冰方组三黄方组N/只555555结痂时间（t/d）3.70±0.22 1.40±0.55①②③1.30±0.45①②③2.30±0.45①2.40±0.22①1.80±0.27①②③

三黄矾冰烧伤中药油是广州中医药大学第一附属医院乳腺科黄梅教授的临床经验方，用于防治乳腺癌放疗皮损。前期的临床研究[4]表明，该方外用可以安全有效地治疗乳腺癌急性放射性皮炎，与西药奥克喷相比，疗效相当，并且外用药油较奥克喷可以更快地缓解疼痛、瘙痒、红斑等症状，在药物经济学方面有明显优势。

图1 各组治疗前后创面面积比较Figure 1 Comparison of the wound area in various groups before and after treatment

本研究观察不同浓度、不同配伍的三黄矾冰烧伤中药油对小鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合的影响，结果显示：三黄矾冰方高、中、低剂量组，三黄方组与矾冰方组均能明显缩短创面结痂时间，提高创面皮损愈合率，疗效显著，其中三黄矾冰方高、中剂量组疗效明显优于其他治疗组。该结果与临床研究结论一致，充分说明该方能够有效地促进烧伤创面愈合。而从药物经济学的角度，三黄矾冰方中剂量是最佳的配伍方式。

三黄矾冰烧伤中药油是由黄连、大黄、黄柏、明矾、冰片组成，这些药物均具有清热泻火之功效。其中：黄连，性寒，味苦、有清热燥湿、泻火解毒之功效。其抗菌谱广，如肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌等G+菌，大肠杆菌、伤寒杆菌、淋球菌等G-菌，以及白色念球菌、红色毛癣菌等真菌[5]。大黄性寒，味苦，有清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经之功效。现代药理研究表明，大黄中所含儿茶类化合物可以降低毛细血管通透性[6]。黄柏性寒，味苦，具有清热燥湿、泻火解毒之功效。药理研究证实，黄柏可使血小板不易破碎，外用还可促进皮下渗血的吸收[7]。明矾性寒，味酸涩，有毒，外用解毒杀虫，燥湿止痒。现代药理研究证实，0.5%～5%明矾可从细胞中吸收水分，使细胞发生脱水收缩，减少炎症渗出物，使组织呈现干燥，可用于局部炎性渗液，同时可激活巨噬细胞，使其向炎症病灶聚集而有收敛消炎的作用[8]。冰片性凉，味辛苦，具有止痛、防腐的作用。研究发现，冰片具有抑制或杀灭金黄色葡萄球菌，并且能促进其他药物透皮吸收的作用[9]。橄榄油富含角鲨烯、不饱和脂肪酸、维生素以及酚类抗氧化物，对皮肤有滋润防皲裂、抗氧化、抗炎抗病毒、防辐射等功效[10]。诸药合用共奏清热解毒、去腐生肌、消肿止痛之功效。从以上分析各原料药材药理学成果可见，三黄矾冰烧伤中药油所含的药物有多种抑菌和杀菌的成分，故可有效的防治创面的感染，减少脓毒血症的发生率，缩短创面的愈合时间。

在烧烫伤治疗方面，中医外治法有着独到的优势。合理的处理创面及选择外用药，是防治创面感染、加速创面愈合的关键环节，同时亦能降低致残率。三黄矾冰烧伤中药油值得临床推广。