不同分子质量甲壳低聚糖对0～4周黄羽肉鸡性能的影响

陈静文 何雪萍 王润莲 梁翠萍 汪忠艳 刘国清

摘  要：旨在研究不同分子質量甲壳低聚糖对0～4周龄黄羽肉鸡生长、血脂含量、抗氧化能力及屠宰性能的影响。选取400只1日龄健康体重相近的黄羽肉鸡母鸡，随机分为5组，每组8个重复，每个重复10只。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加0.58%分子质量为600、1117、2374、3600Da的甲壳低聚糖。试验期为28d。结果表明：①各组间平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P>0.05）;②添加不同分子质量甲壳低聚糖使血清甘油三酯含量趋于降低（P=0.069）;与对照组相比，2374Da和3600Da甲壳低聚糖组显著降低血清游离脂肪酸含量（P<0.05），其它血脂成分组间均有明显变化（P>0.05）;③添加2374Da和3600Da分子质量甲壳低聚糖显著提高血清SOD和GSH-PX活性（P<0.05），而添加600Da和1117Da分子质量甲壳低聚糖对肉鸡抗氧化能力未显效应;④屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌率和腿肌率等各项屠宰性能组间差异不显著（P>0.05）。综上所述，0～4周龄黄羽肉鸡日粮中添加分子质量为600～3600Da的甲壳低聚糖对其生长和屠宰性能无显著影响，但对肉鸡血脂含量和抗氧化功能有明显的影响，添加2374Da和3600Da甲壳低聚糖可显著降低肉鸡血脂水平，改善了肉鸡的抗氧化能力，而添加600Da和1117Da的甲壳低聚糖对肉鸡血脂含量和抗氧化能力未显效应。

中图分类号：S831.5     文献标识码：B     文章编号：1673-1085（2020）3-0009-06

关键词：甲壳低聚糖;黄羽肉鸡;生长性能;屠宰性能;血脂;抗氧化能力

现代肉鸡产业长期偏重生产性能的选育，造成肉鸡脂肪过度沉积、饲料消耗增加、料重比增加、胴体品质下降等问题，很多学者试图通过营养调控手段（氨基酸、微量元素、添加剂等）减少肉鸡脂肪沉积以提高胴体品质[1-4]。甲壳低聚糖是由甲壳素脱乙酰基后得到的天然、无毒、生物可降解的碱性多糖，具有降脂、抗菌抑菌和免疫调节等多种生物学功效[5]，很多人试图利用甲壳低聚糖减少肉鸡脂肪沉积以提高胴体品质，但随着甲壳低聚糖加工技术的进展，发现其生物学活性与其脱乙酰度和分子质量大小等理化特性密切相关[5-6]。有报道指出，脱乙酰度越高的甲壳低聚糖其体外结合脂肪能力越强[7];对肉鸡的降脂效果越明显[8]。但对不同分子质量大小甲壳低聚糖的降脂效应结果差异很大。LeHoux & Grondin[9]在大鼠日粮中添加5%分子质量为70000、750000Da甲壳低聚糖，结果表明70000Da的降胆固醇效果优于750000kDa;Zhang等[10]在大鼠上做了研究，发现39800Da的甲壳低聚糖降脂活性优于712600Da;李兆杰[11]在小鼠日粮中添加200mg/kg分子质量为24500、8450、1500、600Da的甲壳低聚糖，结果表明低分子质量甲壳低聚糖显著降低肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量，且随着分子质量的降低其降血脂的作用有加强的趋势。王红卫[12]在蛋鸡日粮中添加200mg/kg分子质量为8000、3000、1000Da甲壳低聚糖，结果表明8000、3000Da的甲壳低聚糖均能显著降低血清中甘油三酯的含量，而1000Da没有表现出明显的降脂效果。动物的脂质代谢与其抗氧化状态密切相关。樊冰心[13]提出低分子质量（相对分子质量<5000Da）甲壳低聚糖可以提高抗氧化能力，从而抑制脂质过氧化，降低脂肪和胆固醇含量。本实验室研究表明Li等[14]，不同分子质量（50000、5000、2000Da）甲壳低聚糖对麒麟鸡的生长性能无影响，但能提高肉鸡的抗氧化活性，相对于50000Da分子的甲壳低聚糖，5000Da以下的甲壳低聚糖降脂效果更为明显，后者不仅可以降低脂肪的消化吸收，还可以被吸收进入体组织对脂质生化代谢产生影响，推测5000Da以下的甲壳低聚糖可能因此更易于影响肉鸡的脂质代谢和胴体性能，且其适宜分子质量的大小尚不明确。本研究拟在前人研究基础上进一步探讨600～3600Da甲壳低聚糖对黄羽肉鸡生长、血脂含量、抗氧化能力及屠宰性能的影响。

1  材料和方法

1.1  试验材料  甲壳低聚糖平均分子质量分别为600、1117、2374、3600Da，脱乙酰度≥85%，均为粉末状，粒度≥0.100mm，水分≤10%，不溶物≤1%，分别由大连中科格莱克生物科技有限公司、惠州长龙生物技术有限公司、浙江澳兴生物科技有限公司、青岛博智汇力生物科技有限公司提供。1日龄黄羽肉鸡品种（K902）由高州市万农农业有限公司提供。

1.2  试验设计与动物分组  试验采用单因子完全随机设计，选取400只1日龄健康、体重相近的黄羽肉鸡母鸡，随机分为5组，每组8个重复，每个重复10只。其中，对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮上添加分子质量分别为600、1117、2374、3600Da甲壳低聚糖，添加水平为0.58%，试验期28d。基础日粮的组成及营养水平参照我国黄羽肉鸡的营养水平[15]配制0～4周龄玉米-豆粕型日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3  饲养管理  试验肉鸡饲养于3层立式金属鸡笼，饲养前一周对试验用具（鸡笼、料槽、水槽等）、鸡舍以及周围环境进行全面清洗和甲醛熏蒸消毒，雏鸡入舍后饮水1.5h后开食。鸡舍内采用红外灯保温。鸡自由采食和饮水，每天对鸡舍进行清粪，保持鸡舍卫生，舍内的温度、湿度、光照等按要求进行严格控制。定期按照制定的免疫程序进行免疫。每天观察并详细记录鸡的行为及饲料消耗、死亡数等情况。

1.4  样品采集与测定

1.4.1  生长性能测定  記录初始重，试验期以重复为单位在4周末对鸡进行空腹称重（禁食12h，不禁水），观察采食情况，于每周末对料槽余料称重，并计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）。

1.4.2  血脂和抗氧化能力测定  4周末称量体重后，从每个重复抽取体重接近平均体重的1只鸡，翅静脉采血，室温静置至有少量血清析出后，3000 r/min离心10min，分离出血清，于-20℃冰箱保存。血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）用酶法测定;游离脂肪酸（NFFA）用铜试剂比色法测定;高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）用选择性沉淀法测定。血清抗氧化指标包括超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）活性、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）的含量采用酶标法测定。

1.4.3  屠宰性能测定  试鸡采血后进行屠宰，测定屠宰性能指标。屠宰率、半净膛率及全净膛率分别为供试鸡屠体重、半净膛重、全净膛重占宰前体重的百分比;腹脂率、胸肌率、腿肌率分别为供试鸡腹脂重、胸肌重、腿肌重占全净膛重的百分比。

1.5  数据处理  数据分析利用 SPSS 20.0 统计软件，采用 One-way ANOVA 进行单因素方差分析，并用 Duncan 法进行多重比较，P<0.05表示差异性显著，试验结果以平均值±标准差的方式表示。

2  结果与分析

2.1  不同分子质量甲壳低聚糖对0～4周龄黄羽肉鸡生长性能的影响  结果见表2。由表2可以看出，甲壳低聚糖组与对照组相比，平均日增重均有所增加，分别增加0.65%、5.19%、5.54%和2.00%;平均日采食量分别提高2.08%、1.29%、1.69%和0.79%。此外，甲壳低聚糖组料重比与对照组相比，除600Da分子甲壳低聚糖组有所提高外，其它甲壳低聚糖组均有所降低，分别降低4.72%、4.72%、1.89%，但各组间平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P>0.05）。

2.2  不同分子质量甲壳低聚糖对0～4周龄黄羽肉鸡血脂含量的影响  结果见表3。由表3可知，与对照组相比，甲壳低聚糖组甘油三酯含量均有降低的趋势（P=0.069），分别降低25.32%、27.85%、2.53%和15.19%;总胆固醇含量各组之间差异不显著（P>0.05）。血清游离脂肪酸含量组间差异显著（P<0.05），与对照组相比，2374Da和3600Da分子质量甲壳低聚糖组显著下降（P<0.05），但600Da和1117Da分子质量甲壳低聚糖组未有变化（P>0.05）;各添加组之间，2374Da和3600Da分子质量甲壳低聚糖组差异不显著（P>0.05），但2374Da分子质量甲壳低聚糖组显著低于600Da和1117Da分子质量甲壳低聚糖组（P<0.05）;低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇含量组间均差异不显著（P>0.05）。

2.3  不同分子质量甲壳低聚糖对0～4周龄黄羽肉鸡抗氧化能力的影响  结果见表4。由表4可知，血清CAT活性与MDA含量组间差异不显著（P>0.05）。血清SOD活性和GSH-PX活性组间差异显著（P<0.01），与对照组相比，血清SOD和GSH-PX活性2374Da和3600Da甲壳低聚糖组显著提高（P<0.05），而600Da和1117Da分子质量甲壳低聚糖组未显变化（P>0.05）。各添加组之间，血清SOD活性差异不显著（P>0.05），而血清GSH-PX活性3600Da分子质量甲壳低聚糖组显著高于600Da和1117Da分子质量甲壳低聚糖组（P<0.05）。

3  讨论

本试验结果表明，在黄羽肉鸡日粮中添加不同分子质量甲壳低聚糖（<5000Da）对其平均日增重、平均日采食量、料重比无显著差异，该结果与Li等[14]的研究一致。Li等[14]进行肉鸡研究，发现不同分子质量（2000、5000、50000Da）的甲壳低聚糖对动物生长性能没有影响。但与Yao等[16]和Zhang等[10，17]在大鼠上的研究结果有出入。Yao等[16]在大鼠饲粮中添加5%分子量为14000、1000000Da的甲壳低聚糖，能显著降低体增重，但其采食量没有明显影响;Zhang等[17]也报道了饲粮中添加3%分子量分别为315000、51000Da的甲壳低聚糖可以显著降低大鼠体增重与饲料转化率。后者试验中选用甲壳低聚糖分子质量远远大于本试验，因此推测甲壳低聚糖对动物生长性能的影响与其分子质量大小密切相关，小分子质量甲壳低聚糖对生长性能没有明显的影响。

大量研究表明甲壳低聚糖的降脂效果与分子质量大小有关，多数研究趋向于小分子质量的甲壳低聚糖活性比大分子更强。LeHoux & Grondin[9]和李兆杰[11]在鼠上做了相关研究，发现随着分子质量的降低，降脂作用呈现加强的趋势;王红卫[12]在蛋鸡上得到了相似的结论，但提出1000Da甲壳低聚糖没有表现出明显的降脂效果;Li等[14]得出，相对于50000Da分子的甲壳低聚糖，5000Da以下的甲壳低聚糖降脂效果更为明显。本试验日粮中添加600～3600Da甲壳低聚糖，发现甘油三酯含量趋于降低，游离脂肪酸含量在添加2374Da和3600Da分子质量甲壳低聚糖组显著下降。但试验表明，添加600、1117Da的甲壳低聚糖组各项血脂成分和对照组无异。

血脂水平的高低与脂质过氧化程度相对应，肉鸡由于其营养及生理特点，体内脂质含量相对较高，故容易发生脂质过氧化反应，产生的过氧化产物对机体有一定的伤害[18]。SOD、GSH-PX、CAT、MDA是衡量机体抗氧化性能的重要指标，SOD、GSH-PX主要抑制自由基的生成与清除体内的自由基，防止自由基对生物膜和细胞质造成损伤，其活性高低直接反应了机体的抗氧化能力，CAT与SOD存在协同作用;MDA是脂质过氧化作用的分解产物，它通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化作用引起细胞损伤，所以MDA含量能反映机体脂质过氧化程度[19]。本试验结果表明，2374Da和3600Da分子甲壳低聚糖组SOD活性和GSH-PX活性显著提高，由此说明上述分子质量的甲壳低壳聚糖能通过提高机体内的抗氧化酶活性来降低机体的脂质过氧化反应，这与Li等[14]研究结果一致。Li等[14]在麒麟鸡日粮中添加0.75%分子质量为2000、5000、50000Da的甲壳低聚糖，结果表明均显著提高SOD活性。卢美鸾等[20]报道添加不同分子质量甲壳低聚糖（Mr>100000Da，Mr<5000Da;Mr为相对分子量）不影响肉鸡血清中MDA含量，本试验MDA含量结果与卢美鸾等[20]报道一致。

添加不同分子质量甲壳低聚糖（<3600Da）对黄羽肉鸡的屠体率、半净膛率、全净膛率、胸肌率和腿肌率无显著性影响，说明分子质量较小的甲壳低聚糖对黄羽肉鸡胴体各个部分的生长和产肉性能无影响，该结果也和黎秋萍等[21]的相近。

4  结论

4.1  在0～4周龄黄羽肉鸡日粮中添加分子质量为600～3600Da的甲壳低聚糖对其生长和屠宰性能无显著影响。

4.2  高于2374Da分子壳聚糖可显著降低黄羽肉鸡血清游离脂肪酸含量，使血脂水平下降;并使血清SOD活性和GSH-PX活性显著提高，改善了肉鸡的抗氧化能力;低于1117Da的甲壳低聚糖对肉鸡血脂含量和抗氧化能力未显效应。

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Effects of different molecular weight chitosan oligosaccharides on growth， lipid content ，antioxidant activity and slaughter performance of Chinese Color-feathered chickens at the age of 0 to 4 weeks

CHEN Jingwen  HE Xueping WANG Runlian  LIANG Cuiping

WANG Zhongyan  LIU Guoqing

（1.Shenzhen Institute of Guangdong Ocean University， Shenzhen518108，China;

2.Department of Animal Science，Guangdong Ocean University，Zhanjiang524088，China;

3.Guangzhou Applon Technology Co， Ltd.， Guangzhou510310， China）

Abstract：The purpose of this study was to investigate the effects of different molecular weight chitosan oligosaccharides on the growth， lipid content， antioxidant activity and slaughter performance of Chinese Color-feathered chickens at the age of 0 to 4 weeks.Four hundred 1-day-old healthy female Chinese Color-feathered chickens with similar body weight were randomly divided into 5 groups with 8 replicates of 10 birds each.The control group was fed with corn-soybean meal basal diet，and the experimental groups were fed basal diet supplemented 0.58% chitosan oligosaccharides with molecular weight of 600，1117，2374 and 3600 Da，respectively.The experiment lasted for 28 days. The results show that：1）there was no significantly difference in average daily gain， average daily feed intake and the feed conversion ratio among the groups （P>0.05）.2）Supplementation of different molecular weights of chitosan oligosaccharides trend to decrease the serum triglycerides （P =0.069）. Compred that of control group， the serum free fatty acid content of groups supplied chitosan oligosaccharides of molecular weights of 2374Da and 3600Da decreased significantly （P<0.05）. The other components of blood lipids did not differ between treatments （P>0.05）.3）Addition of 2374 and 3600 Da molecular weight chitosan oligosaccharides significantly increased serum SOD and GSH-PX activity （P<0.05），while addition of 600Da and 1117Da molecular weight chitosan oligosaccharides did not change the antioxidant activities in broilers.4）The slaughtering rate， full bore rate， half bore rate， breast muscle rate and leg muscle rate did not differ between groups （P>0.05）.In summary， the additions of chitosan oligosaccharides with molecular weights of 600～3600 Da had no significant influence on growth and slaughter performance，but the lipid content and antioxidant activity of broilers were significantly affected.Supplementation of 2374Da and 3600Da chitosan oligosaccharides significantly reduced blood lipids and improved antioxidant status in broilers，whereas supplementing 600Da and 1117Da  chitosan oligosaccharides had no significant effect on blood lipid content and antioxidant activity in broilers.

Key words： chitosan oligosaccharide; Chinese Color-feathered chickenss; growth performance; blood lipid; antioxidant activity; slaughter performance□

基金項目：深圳市科技计划项目（JCYJ20170818111931279）;广东海洋大学动物营养与饲料课程群教学团队项目。

作者简介：陈静文（1993-），女，硕士研究生，从事动物营养与饲料科学的研究工作。E-mail：1395580704@qq.com。

通讯作者：王润莲（1965-），教授，硕士生导师，主要从事动物营养与饲料科学的研究工作。E-mail：wangrunlian2005@163.com。