人胃腺癌组织中S100A6的表达规律与化学治疗影响因素及预后的相关性研究

邵润东 孙 纲 刘子源

[摘要] 目的 探讨人胃腺癌组织中S100A6的表达规律、患者的临床病理情况以及经过相同化学治疗后患者预后生存期之间的相关性。 方法 应用免疫组化方法对随机选取的大连医科大学附属第一医院2008年8月～2013年9月胃癌根治术后，病理为胃腺癌，经相同方案化学治疗且随诊资料完整的患者70例病理标本进行检测，进一步收集胃腺癌组织中S100A6表达规律，将资料进行总结并应用SPSS软件进行统计学分析。 结果 入选人胃腺癌病例中S100A6总阳性表达率为85.7%，但与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、CA19-9情况之间无统计学意义（P>0.05）;S100A6阳性表达情况与患者相同化学治疗后预后生存期之间存在负相关性（P<0.05）。结论S100A6在人胃腺癌组织普遍存在;S100A6阳性表达率与胃腺癌患者临床、病理情况及肿瘤标志物CA19-9无相关性;S100A6阳性低表达可能是胃腺癌术后化学治疗预后生存的有利因素。

[关键词] S100A6;人胃腺癌;化学治疗;预后

[中图分类号] R735.2          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2020）06-0018-03

[Abstract] Objective To investigate the relationship between the expression pattern of S100A6 in human gastric adenocarcinoma， the clinicopathology of patients and the prognosis of patients after the same chemotherapy. Methods 70 pathological specimens of gastric adenocarcinoma patients with the same chemotherapy and complete follow-up data after radical gastrectomy in the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University from August 2008 to September 2013 were tested by using immunohistochemical method. The expression pattern of S100A6 in gastric adenocarcinoma was further collected. The data were summarized and SPSS software was used for statistical analysis. Results The total positive expression rate of S100A6 in selected patients with gastric adenocarcinoma was 85.7%， which was not statistically different from the age， sex， tumor histological grade， clinical stage of tumor and CA19-9（P>0.05）. There was a negative correlation between the positive expression and the prognosis survival after the same chemotherapy（P<0.05）. Conclusion S100A6 is prevalent in human gastric adenocarcinoma. The positive expression rate of S100A6 has no correlation with the clinical and pathological conditions and the tumor marker CA19-9 in human gastric adenocarcinoma tissue. The low expression of S100A6 may be a favorable factor for the prognosis of postoperative chemotherapy for gastric adenocarcinoma.

[Key words] S100A6; Human gastric adenocarcinoma; Chemotherapy; Prognosis

胃癌是我國发病率及死亡率很高的消化道恶性肿瘤，但治疗效果及预后仍处于不佳水平，临床中以病理类型为腺癌的胃癌较为多见[1]。相对于国内已普遍推行的胃癌规范化手术，术后化学治疗的效果可能影响患者的预后及生存期[2-4]。

S100A6是S100蛋白家族的一员，在细胞中广泛离散分布，与钙离子浓度及靶向目标相互螯合并发挥生物效应[5]。其在肿瘤中异常表达，与多种肿瘤的发生、发展关系密切，直接干预肿瘤的产生、进展、转移以及预后[6，7]。而其在胃癌中的表达规律以及与化学治疗的关系有待进一步扩展研究。

综上，本研究深入探讨了人胃腺癌组织中S100A6的表达情况，结合患者的临床情况、病理情况、肿瘤标志物情况、相同方案化疗后的预后生存期之间的联系及规律，为研究S100A6的表达情况与化学治疗预后影响因素提供新思路。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机选取大连医科大学附属第一医院2008年8月～2013年9月胃癌根治术后患者，其手术前病理类型为腺癌，术中、术后证实处于T（3-4）NXM0状态，手术过程顺利，诊治及随诊资料完整，手术后均以奥沙利铂、亚叶酸钙、5-Fu为中心的联合方案行化学治疗4～6个疗程。

1.2 研究方法

将入选病例病理石蜡标本切片处理后，采用MaxVision/HRP 免疫组化染色并进行检测。具体方法如下：石蜡切片脱蜡、脱水，蒸馏水冲洗;EDTA 抗原修复液（pH=9.0）进行高压抗原修复 2～3 min后，室温下自然冷却;3%过氧化氢孵育 5～10 min，消除内源性过氧化物酶的活性，阻断过氧化物酶，PBS冲洗3次;滴加 S100A6抗体，室温下孵育2 h，PBS冲洗3次;滴加 Max Vision/HRP试剂，室温下孵育 15 min，PBS 冲洗 3 次;DAB 显色、苏木素复染，切片经梯度乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。主要试剂为：鼠抗人S100A6单克隆抗体（10245-1-AP），免疫组化染色试剂盒（碧云天公司）。已知阳性平片作对照。

1.3判定标准

S100A6主要表达于细胞质及细胞核，以上染色成棕黄色颗粒状判定为阳性。阳性细胞比例大于75%判定为（+++）;位于25%～75%之间判定为（++）;位于5%～25%之间判定为（+）;小于5%判定为（-）[8]。CA19-9判定标准结合临床实验室区间，以大于27U/mL记作（+）。

1.4 观察指标

根据染色结果阳性细胞百分比统计S100A6的表达情况;收集各病例年龄、性别、肿瘤组织学分级及临床分期情况;根据染色结果阳性细胞百分比统计表达CA19-9情况;收集化学治疗后患者生存期（中位生存时间）情况。

1.5 统计学分析

采用SPSS19.0统计学软件，采用秩和检验方法分析S100A6与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、CA19-9表达情况之间的关系;采用Log-Rank法分析S100A6阳性表达情况与患者相同化学治疗后预后生存期之间的关系。检验水准α设定为0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

共入选70例病例，其中男44例，女26例;入选病例中年龄区间为36～60岁，平均年龄40岁，中位年龄50岁。其中50岁以上患者32例，40～50岁患者26例，50岁以下患者12例。定期随访。

2.2 S100A6阳性表达情况

采用免疫组化法检测S100A6的表达情况，其中阳性表达见封三图2。

2.3 S100A6的阳性表达情况以及与患者临床、病理情况之间的关系

组内S100A6总阳性表达率为85.7%（60/70），经秩和检验可得出S100A6阳性率的分布与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、CA19-9阳性情况均无统计学相关性（P>0.05）（表1）。

2.4 S100A6阳性表达情况与相同化学治疗后预后生存期之间的关系

经Log-Rank单因素相关性分析，S100A6与患者化学治疗后预后生存期有关（P<0.05），且S100A6阳性表达情况越低，患者相同化学治疗后预后生存期越长（图1），S100A6低表达可能是对肿瘤化学治疗预后生存期的有利因素（表2）。

3讨论

以病理分型为腺癌为主的胃癌在我国的发病率居高不下，且近年发病率有逐步上升趋势[9]。因其早期缺乏典型的临床特异性症状，易于被忽视或误诊。一旦确诊多处于进展阶段。尽管规范化胃癌根治性手术及NCCN所倡导的综合治疗指南已取得了十足的发展，并且大量抗肿瘤治疗新兴技术不断涌现，但胃癌的预后仍不乐观[10-11]。

S100A6具有典型的EF-手型结构，属于小分子量酸性钙结合蛋白S100家族。其在细胞中离散存在，分布规律受细胞分裂情况左右，同时钙离子梯度也会导致S100A6的迁移[12]。这可能与S100A6具有特殊的钙受体识别机制，其靶目标主要与肌动蛋白结合蛋白及膜联蛋白有关[13]。研究表明，S100A6在肿瘤中呈现异常表达并与细胞的生理分化周期相关，实际上，当静止细胞受到诸如生长因子、血清、视黄酸、缺血乏氧等内外环境刺激时均可能出现S100A6的显著升高[14]。而临床上如乳腺癌、肺癌、消化道肿瘤、甲状腺癌等也同时出现了S100A6高表达的情况[15]。本研究揭示了S100A6与胃腺癌临床、病理分级无明显相关性，然而与患者预后有明显的相关性。

受困于胃癌根治性手术规范程度统计学角度的限制以及肿瘤术后化学治疗不规范等因素，本研究仍不能直接闡述S100A6是否直接参与胃癌术后化学治疗的影响，本研究得出S100A6在人胃腺癌组织普遍存在;S100A6阳性表达率与胃腺癌患者临床、病理情况及肿瘤标志物CA19-9无相关性;说明S100A6阳性低表达可能是胃腺癌化学治疗预后生存期的有利因素，为今后相关领域的研究提供了一定的借鉴。

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（收稿日期：2019-07-30）