松茸竹荪搭配饮食对提升运动员免疫力的影响

韩世昊

（广西大学行健文理学院，广西 南宁 530005）

松茸（Tricholoma matsutake） 是一种十分珍贵的野生食用菌，至今仍无法人工栽培[1]。松茸具有独特的香味，气味芳香浓郁，含有人体所需的营养，而且还具有药用保健功效，可以提高人体免疫力，其富含的双链松茸多糖，可以激活人体T细胞，具有抗衰老、解疲乏的特殊功效，对非特异性免疫和特异性免疫具有确定的增强作用[2]。松茸的功效非常广泛，民间也常用来强身补虚、恢复精力，被身体虚弱、术后产后等人群所喜爱，以减轻疲劳、快速恢复提高免疫力。竹荪（Dictyophora indusiata） 则是一种是生长在枯竹根部的一种食用菌，营养丰富，富含多种氨基酸以及维生素，具有补气养阴、润肺止咳、清热利湿、护肝利胆、抗疲劳等功效[3]。

松茸和竹荪搭配不仅味道鲜美，营养价值也更高，松茸中松茸醇、异松茸醇和多糖类药用成分具有抗氧化、抗肿瘤等药用功效[4]，同时也具有提高抵抗力、恢复体力等保健功效；而竹荪中富含的氨基酸等有效成份可以补充人体营养元素，具有益气补脑、宁神健体的作用。

运动员想要提高运动成绩，往往需要长期高强度的训练来保障，这会损害人体免疫系统，尤其是高强度的运动会使人体细胞时常处于无氧状态，而过量运动会产生过多的氧自由基，破坏正常的免疫细胞，导致免疫细胞死亡，加速免疫力的下降。因此，对运动员来说，其免疫力恢复要比常人需要更多的时间。而真正能提高运动员免疫力的，是健康的饮食加上科学训练方式，通过调节饮食等生活习惯来抵抗免疫力的下降。

就松茸竹荪搭配的饮食，从体外抗氧化力调节的角度，对松茸竹荪搭配方式的效果进行试验，探讨松茸竹荪对提升运动员免疫力的影响。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

松茸片和竹荪干品均购自云南官渡区镶毅药材经营部，一级品（杂质含量小于0.1%，水分小于1%）。主要试剂：邻苯三酚、过氧化氢、硫酸亚铁由天津市天力化学试剂有限公司生产，分析纯；水杨酸、乙醇由洛阳市化学试剂厂生产，分析纯。

1.2 仪器设备

主要仪器设备：FW400A型高速万能粉碎机，北京科伟永鑫实验仪器厂；UV-722紫外可见分光光度计，上海第三分析仪器厂；NCSY-1实验室烘箱，苏州耐氏干燥设备有限公司；DA-8002型电子恒温水浴锅，北京市化玻联医疗器械有限公司；AE124型电子天平，上海皓拂仪器仪表有限公司。

1.3 松茸竹荪样品溶液制备

除去松茸片和竹荪干品表面沙尘清洗干净，竹荪剪去菌盖头（菌体与菌裙连接部分封闭的一端），与松茸片一起在烹制前用40℃左右的温淡盐水泡发20 min，取出冲洗干净，将竹荪切小段，松茸也切小片后，放入烘箱中80℃下烘干至恒重，用粉碎机研磨成粉末，过80目筛后即得松茸和竹荪的混合粉末，备用。

松茸竹荪样品溶液制备：将制备的松茸和竹荪的粉末按1∶20的料水比混合，90℃水浴6 h，静置30 min后2 500 r·min-1离心15 min，取上清液浓缩即得松茸竹荪样品溶液[5-6]。

2 体外抗氧化试验

2.1 对超氧阴离子自由基的抑制作用

称取松茸竹荪混合粉末样品，分别配制浓度0.5 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1、1.5 mg·mL-1、2.0 mg·mL-1、2.5 mg·mL-1的松茸竹荪样品溶液，备用；在20 mL的比色管中依次分别加入不同浓度的松茸竹荪样品溶液1.0 mL、pH 8.2的0.05 mol·L-1的缓冲溶液8 mL，在25℃恒温水浴20 min后，精确移取该混合液5 mL于比色皿中，测定其在430 nm处的吸光度，记为H2；将测完吸光度的比色皿取出，向其中加入40 mmol·L-1的邻苯三酚溶液0.2 mL，摇匀，准确反应3 min后，测定其在430 nm处的吸光度，记为H1；在20 mL的比色管中依次分别加入双蒸水1 mL， pH 8.2的 0.05 mol·L-1的缓冲溶液 8 mL，25℃恒温水浴20 min，精确移取该混合液2.0 mL于比色皿中，同时向其中加入40 mmol·L-1的邻苯三酚溶液0.1 mL，摇匀，准确反应3 min，测定其在430 nm处的吸光度，记为H3，超氧阴离子自由基抑制率（E1，%） 计算公式为：

式中：H1为加入待测糖液后的吸光度；H2为无显色剂时多糖的本底吸收；H3为不加糖液的空白对照液吸光度。

2.2 对羟自由基抑制作用

称取松茸竹荪混合粉末样品，分别配制浓度0.5 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1、1.5 mg·mL-1、2.0 mg·mL-1、2.5 mg·mL-1的松茸竹荪混合粉末样品溶液，备用；在25 mL的比色管中依次加入9.0 mmol·mL-1的Fe-SO4溶液 1.0 mL，9.0 mmol·mL-1水杨酸-乙醇溶液1.0 mL，双蒸水 1.0 mL，8.8 mmol·mL-1双氧水 1.0 mL，37℃反应0.5 h，以蒸馏水为空白，在520 nm处测定其吸光管度，并记为M1；将双蒸水分别替换为不同浓度的松茸竹荪混合粉末样品溶液1.0 mL，并记为M2；将9.0 mmol·mL-1水杨酸-乙醇溶液替换成1.0 mL乙醇，重复上述过程并记为M3。羟自由基抑制率（E2，%）计算公式为：

式中：M1为不加糖液的空白对照液吸光度；M2为加入待测糖液后的吸光度；M3为无显色剂时多糖的本底吸收。

3 结果与讨论

3.1 对超氧阴离子自由基的抑制作用结果

利用邻苯三酚遇水产生超氧阴离子自由基，生成有色的中间物质[7]，其线性时间维持在3 min～4 min，因此在试验选用了3 min为测定时间。当加入超氧阴离子自由基的抑制剂后，可以减小中间有色物质的产生，使吸光度减小。因此可以利用此方法来测定被测物对超氧阴离子自由基的抑制率。分别检测不同浓度的松茸竹荪混合溶液对超氧阴离子自由基的抑制率，测得的结果如表1、图1所示。

表1 松茸竹荪混合溶液对超氧阴离子自由基的抑制率Tab.1 The inhibition rates of mixed solution of Tricholoma matsutake and Dictyophora indusiata to O2-

从表1和图1可以看出，松茸竹荪混合溶液对超氧阴离子自由基有较强的清除作用，主要原因可能是由于松茸和竹荪中均含有多糖类物质，多糖蛋白质中的C3、C4、C6上羟基较活泼，因此羟基上的氢活性很高，能够快速和超氧阴离子自由基进行化学反应，所以超氧阴离子自由基反应被干扰阻断，而且随着松茸竹荪混合溶液浓度的增加，对超氧阴离子自由基抑制率也有较大的提高，可能是由于结合在松茸竹荪多糖大分子上的基团提高了对其结合为点周围基团的活性，且其本身也可以被氧化成基团。因此会逐步增加清除的效果，曲线出现上扬趋势。这说明松茸竹荪混合溶液中的多糖类物质仍然保持其原有的特性，并在原有的基础上有所提高。

3.2 对羟自由基抑制作用结果

利用Fenton反应原理[8]，过氧化氢和二价的铁离子反应产生强活性的羟自由基，水杨酸与其结合，并产生有色物质。该物质在520 nm处有强吸收，若在反应体系中加入具有清除羟自由基的被测物，便会与水杨酸产生反应，争夺羟自由基，使羟自由基还原产生成有色物质，有色物质产生量减少使得吸光度也减小。因此可以利用此方法来测定被测物对羟自由基的清除率，即羟自由基的抑制率。分别检测不同浓度的松茸竹荪混合溶液对羟自由基的抑制率，测得的结果如表2、图2所示。

表2 松茸竹荪混合溶液对羟自由基的抑制率Tab.2 The inhibition rates of mixed solution of Tricholoma matsutake and Dictyophora indusiata to·OH

由表2和图2可以看出，松茸竹荪混合溶液对羟自由基的清除作用随着浓度的增加而增加，而且随着浓度增加清除效率也增强。当浓度在2.5 mg·mL-1时，抑制率达到最高的62.24%；5个不同浓度的松茸竹荪混合溶液平均抑制率为38.41%

推测其主要原因是由于松茸和竹荪中均含有多糖类物质，结合在松茸多糖上的基团对羟自由基有一定吸附作用。多糖类物质对免疫系统有调节能力，可以间接刺激巨噬细胞、淋巴T细胞等免疫细胞的活性，促使免疫细胞多分泌白细胞介素，从而刺激诱导人体白细胞产生更多的干扰素，可以有效防止病毒感染，从而促使人体免疫系统对病毒入侵的抵抗力。可见，松茸和竹荪所含有的有效成份可以直接或间接地促进人体免疫细胞的杀伤力，改善机体的抗病毒能力，从而提高人体自身的免疫力。